制备“微生物”检测培养基细节问题
一、称取 用精确度1/100的电子天平称取培养基所需药品。先根据配方计算出配制一定量培养基所需各种成分药品的量，然后用天平准确称取。称量时用称量纸折叠成簸箕状盛放药品。称量纸折叠方法如图所示。 二、溶化 培养基放入烧杯或搪瓷缸中，慢慢加入少量所需水，边加入边用玻棒搅拌。如果培养基中不含有琼脂，培养基不需要加热;如果含有琼脂，则需要用本生灯或电磁炉加热煮沸，完全溶解后，再补齐所需水，并搅拌均匀(如图3所示)。如果配制的培养基量很大，可用不锈钢锅加热溶化，可先用温水加热并随时搅动，防止焦化，如有焦化现象，配制的培养基就不能使用，要重新配制。 配制培养基时不可用铜或铁的容器溶化，因铜或铁制容器可能会使培养基中的铜和铁的含量超标，影响实验(培养基中铜含量大于0.3mg/L，细菌不宜生长，铁含量超过0.14mg/L，妨碍细菌产毒素)。对容易发生反应，产生沉淀的药品，要分开溶解，最后加入培养基，如磷酸氢二钾......阅读全文
培养基灭菌方法
培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌：高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下，温度121℃时，灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长，也不能超过规定的压力范围，否则
培养基的灭菌
一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中，如无特殊规定，即可用此法灭菌。 某些畏热成分，如糖类，应另行配成20%或更高的浓液，以过滤或间歇灭菌法消毒，以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和抗生素等则应以无菌操作技术抽
培养基灭菌方法
1.灼烧灭菌将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌。此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌。2.干热灭菌将灭菌物品放入干热灭菌箱内，在160～170℃加热1～2h可达到灭菌的目的。能耐高温的、需要
培养基灭菌方法
培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌：高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下，温度121℃时，灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长，也不能超过规定的压力范围，否则
细胞培养箱内的支原体怎么检测
可用直接培养法检测细胞培养箱内的支原体污染。培养基准备： 基本配方为Difco PPLO broth（60%），马血清（20%），15%酵母膏溶液（10%），10x储存液（10%）。由于培养时间长，可加50u/ml青霉素至10x储存液 或加入乙酸铊（1：2000）至培养基中以防止其他细菌的污染。 1
细胞培养箱内的支原体怎么检测
可用直接培养法检测细胞培养箱内的支原体污染。培养基准备： 基本配方为Difco PPLO broth（60%），马血清（20%），15%酵母膏溶液（10%），10x储存液（10%）。由于培养时间长，可加50u/ml青霉素至10x储存液 或加入乙酸铊（1：2000）至培养基中以防止其他细菌的污染。 1
食品检测技术微生物培养基常见问题
1、培养基煮沸溶解后再高压灭菌，还是直接高压灭菌存在疑惑。 拿麦康凯琼脂举个例子，溶解后灭菌，平板上没有不溶的结晶紫，没有紫色的斑点；相对比未溶解灭菌的，平板上有结晶紫和紫色的斑点。所以正确的做法是先煮沸溶解后再高压灭菌。 2、培养基PH值为什么不在标准范围内？ 其实出现这个情况的问题有很
霉菌的形态观察
实验原理 霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，而且孢子很容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片其特点是：(a)细胞不变形；(b)具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间；(c)溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。霉菌自然生长状态下的形态，常用载玻片观察，此法是接种霉菌
霉菌的形态观察实验
霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，而且孢子很容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片其特点是：（a）细胞不变形；（b）具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间；（c）溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。实验方法原理霉菌自然生长状态下的形态，常用载玻片观察，此法是接种霉菌
食品微生物实验室培养基质量控制
一、配制时的质量控制 (1)容器：配制和分装培养基的烧瓶、平皿或试管等器材应为中性，无酸、碱抑制物残留，平皿底部要平，以免琼脂厚薄不一，影响药敏试验结果。 (2)成分来源：各种成分来源可靠，不含对目的菌生长有抑制的物质。特殊要求的培养基，如葡萄糖氧化发酵试验(O/F 试验)，除加入葡萄糖外
噬菌体的鉴定方法和步骤
1 样品采集将一定的样品放入灭菌三角瓶中，加入对数生长期的敏感指示菌如大肠杆菌菌液3～5mL，再加20mL二倍肉汤蛋白胨培养液。2 增殖培养30℃振荡培养12～18h, 使噬菌体增殖。3 离心分离将上述培养液以3000rpm离心15～20min, 取上清液，用pH7.0，1%蛋白胨水稀释至10-2～
药敏试验
药敏试验 用药敏实验进行药物敏感度的测定，以便准确有效的利用药物进行治疗。但由于药敏试验要求比较严格，条件比较高。目前，临床微生物实验室进行药敏试验的方法主要有纸片扩散法，稀释法（包括琼脂和肉汤稀释法），抗生素浓度梯度法（E-test法），和自动化仪器等。一、 纸片扩散法 该法是
微生物检测中培养基的质量控制措施
培养基是液体、半固体或固体形式的，含天然或合成成分，用于保证微生物繁殖或保持其活力的物质。培养基的制备和使用是微生物实验室检测工作的重要环节，培养基自身质量的优劣、保存是否得当、配制使用是否正确等都直接影响到检测结果的准确性。本文对微生物实验室在培养基购置、贮存、制备、使用等方面应采取的质量控制措
微生物检测中培养基的质量控制措施
培养基是液体、半固体或固体形式的，含天然或合成成分，用于保证微生物繁殖或保持其活力的物质。培养基的制备和使用是微生物实验室检测工作的重要环节，培养基自身质量的优劣、保存是否得当、配制使用是否正确等都直接影响到检测结果的准确性。本文对微生物实验室在培养基购置、贮存、制备、使用等方面应采取的质量控制措施
噬菌体效价的测定实验
实验方法原理噬菌体的效价就是 1 ml 培养液中所含活噬菌体的数量。效价测定的方法，一般应用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上，噬菌体产生肉眼可见的噬菌斑，因此，能进行噬菌体的计数，但因噬菌斑计数方法其实际效率难以接近 100％（—般偏低，因为有少数活噬菌体可能未引起感染），所以为了
噬菌体效价的测定
实验方法原理 噬菌体的效价就是 1 ml 培养液中所含活噬菌体的数量。效价测定的方法，一般应用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上，噬菌体产生肉眼可见的噬菌斑，因此，能进行噬菌体的计数，但因噬菌斑计数方法其实际效率难以接近 100％（—般偏低，因为有少数活噬菌体可能未引起感
微生物菌种的扩大培养及污染的检测与判别
现代工业的生产规模越来越大，每只发酵罐的容积有几十甚至几百立方米。因此要在短时间内完成发酵，必须要有数量巨大的微生物细胞才行。种子扩大培养的任务就是要获得数量足够的健壮的微生物。种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培
食用菌二级菌种和三级菌种接种箱（室）的杂菌检查
接种箱（室）在使用前必须进行消毒处理。消毒效果的好坏直接影响到接种的成败和菌丝生长情况。定期检验接种箱（室）的空气污染情况，对改进消毒措施，提高接种成功率是非常必要的。(1)平板检验法取内径90mm的无菌培养皿若干，采用常规培养基（培养细菌一般采用牛肉膏蛋白胨培养基，培养真菌一般采用马铃薯葡萄糖琼脂
培养基的灭菌流程
原理培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定
培养基移种方法
一、斜面培养基移种技术(1)材料琼脂斜面培养基经分离培养的平板培养物。(2)方法①在琼脂斜面培养基试管上部标明移种的菌名(或编号)、接种日期、接种者的组别及代号。②左手持长有细菌的平板底，右手持接种环。接种环在火焰上灭菌冷却后，沾取平板划线上发育良好的孤立菌落。把平板放回原处，立即用此手取斜面培养基
培养基移种方法，你知道几种？
一、斜面培养基移种技术 (1)材料 琼脂斜面培养基 经分离培养的平板培养物。 (2)方法 ①在琼脂斜面培养基试管上部标明移种的菌名(或编号)、接种日期、接种者的组别及代号。 ②左手持长有细菌的平板底，右手持接种环。接种环在火焰上灭菌冷却后，沾取平板划线上发育
培养基移种方法
一、斜面培养基移种技术(1)材料琼脂斜面培养基经分离培养的平板培养物。(2)方法①在琼脂斜面培养基试管上部标明移种的菌名(或编号)、接种日期、接种者的组别及代号。②左手持长有细菌的平板底，右手持接种环。接种环在火焰上灭菌冷却后，沾取平板划线上发育良好的孤立菌落。把平板放回原处，立即用此手取斜面培养基
琼脂培养基的融化
将培养基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法（如高压锅中的层流蒸汽）使之融化。经过高压的培养基应尽量减少重新加热时间，融化后避免过度加热。融化后应短暂置于室温中（如2 min）以避免玻璃瓶破碎。 融化后的培养基放入47℃～50℃的恒温水浴锅中冷却保温(可根据实际培养基凝固温度适当提高水
TCBS琼脂培养基配方
中文名TCBS琼脂培养基配方 英文名TCBS Agar用途用于肠道致病性弧菌特别是霍乱弧菌和副溶血性弧菌的选择性分离培养。标准配方（g/L)配方（每升） 含量 酵母膏粉 5.0g 牛胆汁粉 5.0g 多价
碱性琼脂培养基配方
中文名碱性琼脂培养基配方 英文名Alkaline Agar用途用于霍乱弧菌及其它弧菌的培养标准配方（g/L)配方（每升） 含量 蛋白胨 20.0g 牛肉膏粉 5.0g 氯化钠 5.0g 琼脂
常用培养基
LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1
微生物样品的不同取样方法的介绍
1、琼脂肠法 琼脂肠有无菌圆塑料袋（或塑料筒）和加入其中的无菌琼脂培养基制成。可在实验室制作，一些国家也有成品出售。使用时，在琼脂的末端无菌切开，将暴露的琼脂面压在样品表面，用无菌解剖刀切下一薄片，放在培养皿上培养。 2、影印盘 影印盘是一种无菌的塑料盘，也可称为“触盘”，可以从许多生产厂
培养基的制备和灭菌
一、实验目的 了解并掌握培养基的配制、分装方法；2掌握各种实验室灭菌方法及技术。二、实验原理 培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有
物理因素、化学因素对细菌的影响和药物敏感试验
物理因素对细菌的影响（结合实物在消毒室中介绍）1.热力灭菌：（1）干热灭菌：干烤（160～170℃，2h）、焚烧（易燃、废弃物品）、烧灼（不易燃的物品，如取菌环、试管口）、红外线：0.77～1000mm电磁波,1～10 mm效应最强。（2）湿热灭菌巴氏消毒法：61.1～62.8℃ 30min；71.
微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数
微生物的分离纯化和计数一般用于（1）某些产品检定，如根瘤菌剂等产品检定，生物制品检验；（2）土壤含菌量测定；（3）食品、水源的污染程度的检验。实验方法原理一、自然条件下，微生物常以群落状态存在，这种群落往往是不同种类微生物的混合体。为了研究某种微生物的特性或者要大量培养和使用某种微生物，必须从这些混