制备“微生物”检测培养基细节问题
一、称取 用精确度1/100的电子天平称取培养基所需药品。先根据配方计算出配制一定量培养基所需各种成分药品的量,然后用天平准确称取。称量时用称量纸折叠成簸箕状盛放药品。称量纸折叠方法如图所示。 二、溶化 培养基放入烧杯或搪瓷缸中,慢慢加入少量所需水,边加入边用玻棒搅拌。如果培养基中不含有琼脂,培养基不需要加热;如果含有琼脂,则需要用本生灯或电磁炉加热煮沸,完全溶解后,再补齐所需水,并搅拌均匀(如图3所示)。如果配制的培养基量很大,可用不锈钢锅加热溶化,可先用温水加热并随时搅动,防止焦化,如有焦化现象,配制的培养基就不能使用,要重新配制。 配制培养基时不可用铜或铁的容器溶化,因铜或铁制容器可能会使培养基中的铜和铁的含量超标,影响实验(培养基中铜含量大于0.3mg/L,细菌不宜生长,铁含量超过0.14mg/L,妨碍细菌产毒素)。对容易发生反应,产生沉淀的药品,要分开溶解,最后加入培养基,如磷酸氢二钾......阅读全文
微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数
微生物的分离纯化和计数一般用于(1)某些产品检定,如根瘤菌剂等产品检定,生物制品检验;(2)土壤含菌量测定;(3)食品、水源的污染程度的检验。实验方法原理一、自然条件下,微生物常以群落状态存在,这种群落往往是不同种类微生物的混合体。为了研究某种微生物的特性或者要大量培养和使用某种微生物,必须从这些混
微生物的分离和纯化实验
在土壤、水、空气或人及动、植物体中,不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起,(1)用于细胞分离(2)细胞纯化(3)细胞增殖培养。实验方法原理为了获得某种微生物的纯培养,一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件要求不同,而供给它适宜的培养条件,或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长,而抑制其他菌生长
几种常见的微生物基础实验(一)
本文介绍几种常见的微生物基础试验的目的、原理、内容等,以便刚刚接触微生物的同志们对试验有个基本的认识. 实验一 常用培养基的制备、灭菌与消毒一、实验目的 1、掌握配制培养基的一般方法和步骤;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法; 2、了解培养基的配制原理;了解常见灭菌
涂布平板法flash演示
涂布平板法是平板计数的一种重要方法,不会影响某些热敏感菌和严格好氧菌的生长,因此在微生物学研究中也是很常用的纯种分离方法。 (1)样品稀释液的制备,按照样品需要稀释成相应浓度的菌液。 (2)先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中,待凝固后编号,然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液对号接种在不同稀释度编号的琼
关于平板培养基的简介
培养平板培养基(culture plate)是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式,它是冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面,常被简称为培养平板(plate)。也叫平面培养基、平皿培养基。 平板培养基常用于单孢分离,测定菌丝生长速度,观察菌落的形态,拮抗实验,测定
霉菌的形态观察
实验概要掌握观察霉菌形态的基本方法,并观察其形态特征。实验原理 霉菌菌丝较粗大,细胞易收缩变形,而且孢子很容易飞散,所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片其特点是:(a)细胞不变形;(b)具有杀菌防腐作用,且不易干燥,能保持较长时间;(c)溶液本身呈蓝色,有一定染色效果。
用玻璃纸琼脂平板透析培养法观察放线菌形态
(一)实验目的:用放线菌的玻璃纸培养物观察放线菌的个体形态(二)实验原理:放线菌自然生长的个体形态的观察现多用玻璃纸琼脂透析培养法。玻璃纸具有半透膜特性,其透光性与载玻片基本相同,采用玻璃纸琼脂平板透析培养,能使放线菌生长在玻璃纸上,然后将长菌的玻璃纸剪取小片,贴放在载玻片上,用显微镜镜检可见到放线
用玻璃纸琼脂平板透析培养法观察放线菌形态
(一)实验目的:用放线菌的玻璃纸培养物观察放线菌的个体形态(二)实验原理:放线菌自然生长的个体形态的观察现多用玻璃纸琼脂透析培养法。玻璃纸具有半透膜特性,其透光性与载玻片基本相同,采用玻璃纸琼脂平板透析培养,能使放线菌生长在玻璃纸上,然后将长菌的玻璃纸剪取小片,贴放在载玻片上,用显微镜镜检可见到放线
SS琼脂配置实验——倾注平板
S-S琼脂(沙门,志贺菌属琼脂)为选择性培养基,对大肠杆菌的抑制作用很强,对肠道病原菌无抑制作用,因此,可以增加标本的接种量,提高对肠道病原菌的阳性分离率。实验方法原理1. 中性红为指示剂,在酸性时呈红色,在碱性时呈淡黄色,一般肠道致病菌不分解乳糖,但分解蛋白胨,产生碱性物质,故菌落呈淡黄色。大肠
Muellerhintot(MH)琼脂平板制备实验
实验方法原理MH琼脂平板,药物敏感试验专用。实验步骤成分:牛肉浸出液: 600 ml酪蛋白酶水解物: 17.5 g淀粉: 1.5 g琼脂:
琼脂平板上的细菌数怎么定量
检测水中细菌总数可以用平板计数琼脂培养基的。一般来说,营养琼脂(NA)、胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)和平板计数琼脂(PCA)都是用作嗜温性细菌的培养基,3者成分大同小异,通常情况下可以互相替代。当然如果是按照标准来做检测的话,尽量还是用与检测标准上相同的培养基。PCA配方:胰酪蛋白胨 5.0g 酵母浸
实验室常用微生物菌种的分离和纯化方法
从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中,不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物,而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”,防止其他微生物的混入。 1、用固体培养基分离和纯化 单个微生物在适宜的固体培养基表
微生物限度检查法方法介绍
对于口服药及外用药,不必要求达到无菌状态,但要保证药物的卫生质量。这就要求进行微生物限度检查。微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。控制菌检查指大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌的检查。微生物限度检查
细菌的接种方法
常用的细菌接种方法有平板划线分离法、斜面接种法、穿刺接种法、液体和半固体接种法、涂布接种法等。一、平板划线分离法 平板划线分离法:是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落,通常把这种单
配制培养基的原则和方法
培养基有很多种,你要配制哪一种呢?你要查清楚,你要配的培养基的成分有那些,然后把要用的东西找到。在配制之前你要把装培养基的容器准备好,是用试管、平皿还是三角瓶。之后看要配的是固体培养基还是液体培养基,觉得是否放琼脂或明胶。之后找来一个大烧杯,依次把要放的物质放入,要是配的是固体培养基要把加入琼脂或明
抗药性突变株的分离实验——梯度平板法
实验方法原理生物的抗药性突变是 DNA 分子的某一特定位置的结构改变所致,与药物的存在无关,某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段,而不是作为引发突变的诱导物,因而在含有一定抑制生长药物浓度的平板上涂布大量的细胞群体,极个别抗性突变的细胞会在平板上长成菌落。将这些菌落挑取纯化,进一步进行
实验室常用微生物菌种的分离和纯化方法
从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中,不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物,而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”,防止其他微生物的混入。1、用固体培养基分离和纯化 单个微生物在适宜的固体培养基
抗药性突变株的分离实验
实验方法原理 生物的抗药性突变是 DNA 分子的某一特定位置的结构改变所致,与药物的存在无关,某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段,而不是作为引发突变的诱导物,因而在含有一定抑制生长药物浓度的平板上涂布大量的细胞群体,极个别抗性突变的细胞会在平板上长成菌落。将这些菌落挑取纯化,进一
斜面培养基移种技术
(1)材料琼脂斜面培养基经分离培养的平板培养物。(2)方法①在琼脂斜面培养基试管上部标明移种的菌名(或编号)、接种日期、接种者的组别及代号。②左手持长有细菌的平板底,右手持接种环。接种环在火焰上灭菌冷却后,沾取平板划线上发育良好的孤立菌落。把平板放回原处,立即用此手取斜面培养基斜持,用右手小指与手掌
斜面培养基移种技术
(1)材料 琼脂斜面培养基 经分离培养的平板培养物。 (2)方法 ①在琼脂斜面培养基试管上部标明移种的菌名(或编号)、接种日期、接种者的组别及代号。 ②左手持长有细菌的平板底,右手持接种环。接种环在火焰上灭菌冷却后,沾取平板划线上发育良好的孤立菌落。把平板放回原处,立即用此手取斜面培养基斜持,用右手
微生物学技术:斜面培养基移种技术
(1)材料琼脂斜面培养基经分离培养的平板培养物。(2)方法①在琼脂斜面培养基试管上部标明移种的菌名(或编号)、接种日期、接种者的组别及代号。②左手持长有细菌的平板底,右手持接种环。接种环在火焰上灭菌冷却后,沾取平板划线上发育良好的孤立菌落。把平板放回原处,立即用此手取斜面培养基斜持,用右手小指与手掌
斜面培养基移种技术
(1)材料 琼脂斜面培养基 经分离培养的平板培养物。 (2)方法 ①在琼脂斜面培养基试管上部标明移种的菌名(或编号)、接种日期、接种者的组别及代号。 ②左手持长有细菌的平板底,右手持接种环。接种环在火焰上灭菌冷却后,沾取平板划线上发育良好的孤立菌落。把平板放回原处,立即用此手取斜面培养基斜持,用右手
单胞菌(monad)的人工感染与分离(1)
一、实验目的熟悉单胞菌的形态特征及培养特点,鱼类病原菌分离鉴定的基本方法,巩固单胞菌所致鱼病的基本特性及症状。二、实验材料单胞菌株纯培养物 普通琼脂平板 鲜血琼脂平板 普通肉汤 无菌蒸馏水 解剖刀 剪刀 镊子 纱布 白瓷盘 洁净的玻片 平皿 光学显微镜 一次性注射器 针头 记号笔 酒精棉球 饵料
嗜血杆菌分离及药敏试验培养基配方
一、 嗜血杆菌分离培养基配方1、哥伦比亚琼脂(按配方称取需要量)2、加入7%-10%羊血3、加入15微克/ml NAD(辅酶I)(过滤除菌后备用)4、加入15微克/ml 牛血红素5、加入5微克/ml 万古霉素6、加1微克/ml 克林霉素pH7.2-7.4, 哥伦比亚琼脂配好后高压灭菌,取出加入羊血制
真菌培养基
一、沙保罗琼脂培养基[用途]供真菌及酵母样真菌的分离培养用.[配法] 麦芽糖40g,蛋白胨10g,琼脂20g,蒸馏水1L. 将上述成分溶于水,加热溶解,调pH至6.0±0.2,分装三角瓶或试管中,118℃灭菌15min,倾注平板或置斜面,无菌试验后备用.[用法]将标本接种培
真菌培养基
一、沙保罗琼脂培养基 [用途] 供真菌及酵母样真菌的分离培养用. [配法] 麦芽糖40g,蛋白胨10g,琼脂20g,蒸馏水1L. 将上述成分溶于水,加热溶解,调pH至6.0±0.2,分装三角瓶或试管中,118℃灭菌15min,倾注平板或置斜面,无菌试验后备用.
真菌培养基的配制
一、沙保罗琼脂培养基[用途]供真菌及酵母样真菌的分离培养用。[配法]麦芽糖40g,蛋白胨10g,琼脂20g,蒸馏水1L。将上述成分溶于水,加热溶解,调pH至6.0±0.2,分装三角瓶或试管中,118℃灭菌15min,倾注平板或置斜面,无菌试验后备用。[用法]将标本接种培养基,如系血液标本,则采取1~
微生物培养基手册大全
微生物培养基种类大全:1、营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤) 100毫升 琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。用途:作普通琼脂平皿。2、血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使
微生物培养基手册大全
1、营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤) 100毫升 琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。用途:作普通琼脂平皿。2、血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50
微生物接种方法详解
一、平板划线分离法平板划线分离法:是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落,通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的,故必须反复分离多次才可得到纯种。其