谷氨酰胺转胺酶的分离纯化及酶学性质

摘 要: 茂原链轮丝菌S t reptoverticillium mobaraense 所产生的谷氨酰胺转胺酶发酵液通过抽滤、超滤、乙醇沉淀、离心和冷冻干燥,制得粗酶粉的酶活约为1 033 U/ g. 对粗酶研究发现,该酶的最适反应温度为52 ℃,最适pH 为6. 0 ;粗酶的pH 稳定范围在4~8 ,温度稳定范围在20~40 ℃,离子强度对该酶的活性稍有影响. 粗酶经CM2纤维素层析和Sephadex G275 凝胶过滤层析后得到较纯的酶,通过SDS2聚丙烯酰胺凝胶电泳检验蛋白质纯度,得到较弱的单一区带. 其中,CM2纤维素层析的纯化倍数为4. 5 ,收率质量分数约为78. 8 %;凝胶过滤层析纯化倍数为1. 11 ,收率质量分数为50 %;用凝胶过滤法测得谷氨酰胺转胺酶的相对分子质量为40 092。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文

生物酶学基础酶的提取和分离纯化

许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎开来。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。化学破碎法是指利用甲醛、丙酮等有机溶

微生物果胶酶的酶学性质

国内外科学家利用层析、电泳等手段对果胶酶的酶学性质进行了研究,明确了一些果胶酶的分子量、动力学性质及其影响因素。常用果胶酶纯化方法有:硫酸铵沉淀、丙酮沉淀、离子交换层析以及凝胶过滤色谱等。果胶酶分子量一般在20kD~60kD之间,单体存在,个别以多聚体形式存在,如海栖热袍菌果胶酸裂解酶分子量为115

生物酶学基础-脂肪酶的性质

脂肪酶是一类具有多种催化能力的酶,可以催化三酰甘油酯及其他一些水不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯化及酯类的逆向合成反应,除此之外还表现出其他一些酶的活性,如磷脂酶、溶血磷脂酶、胆固醇酯酶、酰肽水解酶活性等(Hara;Schmid)。脂肪酶不同活性的发挥依赖于反应体系的特点,如在油水界面促进酯水解,

葡萄糖氧化酶的酶学性质

高纯度GOD为淡黄色粉末,易溶于水,完全不溶于乙醚、氯仿、丁醇、吡啶、乙二醇和甲酰胺等有机溶剂,50%丙酮、66%甲醇都能使其沉淀,可以被弱酸性的离子交换树脂及氧化铝等吸附。GOD 最大光吸收波长为377 和455 nm,在pH 为2.2~8.4,温度为20~70 ℃均可起催化作用,其适宜温度为30

TGM2基因的结构特点和主要功能

转谷氨酰胺酶是通过epsilonγ-谷氨酰赖氨酸等肽键催化蛋白质交联的酶虽然转谷氨酰胺酶的一级结构并不保守,但它们的活性位点都具有相同的氨基酸序列,并且它们的活性是钙依赖性的。该基因编码的蛋白质作为单体,由维甲酸诱导,似乎参与了细胞凋亡最后,编码的蛋白质是与乳糜泻有关的自身抗原已经发现了两个编码不同

湘雅医院发现脊髓小脑性共济失调新致病基因

  中南大学湘雅医院神经内科唐北沙教授领衔的团队与医学遗传学国家重点实验室及华大基因研究院合作,对脊髓小脑性共济失调(SCA)深入研究,发现在人小脑神经组织中高表达的转谷氨酰胺酶6型(TGM6)基因突变后,可导致该病的发生,并在国际上首次提出TGM6基因是SCA一个新致病

哪些因素引起蛋白质交联

蛋白质的变性是蛋白质空间和形态、功能发生的变化,最简单的例子就是,把打碎的鸡蛋里面加入盐的成分,鸡蛋由浑浊状态变成透明状态,这就是蛋白质的变性化学交联和酶交联.蛋白质化学交联剂主要是戊二醛,酶交联剂主要是转谷氨酰胺酶;通过蛋白质交联可改变食品组织结构和功能性质蛋白质是由基因组成的,基因是由每一段的D

甘露聚糖酶的酶学性质研究

甘露聚糖酶是一种半纤维素水解酶,以内切方式降解β-1,4糖苷键,降解产物的非还原末端为甘露糖,其作用底物包括葡萄甘露聚糖、半乳甘露聚糖及β-甘露聚糖等。它不仅能够降解肠道粘度,促进营养物质的消化和吸收,而且还可消除豆类中富含的β-甘露聚糖对葡萄糖吸收的干扰,极大提高饼粕尤其是豆粕的能量消化率;同时,

关于溶葡萄球菌酶的酶学性质介绍

  溶葡萄球菌酶具有多个催化活性中心,其中内切肽酶、糖苷酶和酰胺酶3个活性域与水解细菌胞壁肽聚糖交联结构的催化活性有关以内切肽酶活性最为重要。除作用于细菌胞壁外,溶葡萄球菌酶还具有结合并降解弹性蛋白质(elastin)的作用,弹性蛋白质的氨基酸序列中约1/3为gly,但溶葡萄球菌酶降解弹性蛋白质的特

简述葡糖氧化酶的结构和酶学性质

  1、葡糖氧化酶的结构:  GOD是同型二聚体分子,含有2个黄素腺嘌呤二核苷酸( FAD)结合位点。每个单体含有2个完全不同的区域:一个与部分FAD非共价但紧密结合,主要为β折叠;另一个与底物β-D-葡萄糖结合,由4个α-螺旋支撑1个反平行的β折叠。   2、葡糖氧化酶的酶学性质:  高纯度GOD

生物酶学基础固定化酶载体的性质

载体树脂的性质强烈影响着固定化酶的催化性能,对于一个特定的酶催化反应,以下载体树脂的性质参数需要被严格选择和平衡。 功能基团树脂功能基团的活化类型、表观结构、分散度以及密度决定酶固定化效率、固定化酶活性和机械稳定性。创科生物科技有限公司提供各种不同功能团的树脂载体。 孔径和表面积通常情况下,大的载体

TGM2基因编码的功能和结构描述

转谷氨酰胺酶是通过epsilonγ-谷氨酰赖氨酸等肽键催化蛋白质交联的酶虽然转谷氨酰胺酶的一级结构并不保守,但它们的活性位点都具有相同的氨基酸序列,并且它们的活性是钙依赖性的。该基因编码的蛋白质作为单体,由维甲酸诱导,似乎参与了细胞凋亡最后,编码的蛋白质是与乳糜泻有关的自身抗原已经发现了两个编码不同

营养学词汇谷氨酰胺

谷氨酰胺是谷氨酸的酰胺,L-谷氨酰胺是蛋白质合成中的编码氨基酸,哺乳动物非必需氨基酸,在体内可以由葡萄糖转变而来。谷氨酰胺可用于治疗胃及十二指肠溃疡、胃炎及胃酸过多,也用于改善脑功能。密封通风处保存。白色结晶或晶性粉末,能溶于水,不溶于甲醇、乙醇、醚、苯、丙酮、氯仿和乙酸乙酯,无臭,稍有甜味。在中性

TGM2基因突变因子与药物介绍

转谷氨酰胺酶是通过epsilonγ-谷氨酰赖氨酸等肽键催化蛋白质交联的酶虽然转谷氨酰胺酶的一级结构并不保守,但它们的活性位点都具有相同的氨基酸序列,并且它们的活性是钙依赖性的。该基因编码的蛋白质作为单体,由维甲酸诱导,似乎参与了细胞凋亡最后,编码的蛋白质是与乳糜泻有关的自身抗原已经发现了两个编码不同

葡聚糖酶组成、来源及酶学性质

葡聚糖有a和β两种构象,它们都是D-葡萄糖的聚合物。有些葡聚糖是结构相对简单的线性葡聚糖,而另外一些是非线性和带支链的具有更加复杂结构的葡聚糖(Pitson et al.,1993;高雯等,2007)。a-葡聚糖和β-葡聚糖广泛存在于自然界中。葡聚糖酶降解的多聚体在自然界中以纤维素和半纤维素的形式大

甘露聚糖酶的酶学性质研究分享

甘露聚糖酶是一种半纤维素水解酶,以内切方式降解β-1,4糖苷键,降解产物的非还原末端为甘露糖,其作用底物包括葡萄甘露聚糖、半乳甘露聚糖及β-甘露聚糖等。它不仅能够降解肠道粘度,促进营养物质的消化和吸收,而且还可消除豆类中富含的β-甘露聚糖对葡萄糖吸收的干扰,极大提高饼粕尤其是豆粕的能量消化率;同时,

关于葡糖氧化酶的结构和酶学性质介绍

  1、酶的结构  GOD是同型二聚体分子,含有2个黄素腺嘌呤二核苷酸( FAD)结合位点。每个单体含有2个完全不同的区域:一个与部分FAD非共价但紧密结合,主要为β折叠;另一个与底物β-D-葡萄糖结合,由4个α-螺旋支撑1个反平行的β折叠。   2、酶学性质  高纯度GOD为淡黄色晶体,易溶于水,

葡萄糖氧化酶的结构和酶学性质

  1、酶的结构  GOD是同型二聚体分子,含有2个黄素腺嘌呤二核苷酸( FAD)结合位点。每个单体含有2个完全不同的区域:一个与部分FAD非共价但紧密结合,主要为β折叠;另一个与底物β-D-葡萄糖结合,由4个α-螺旋支撑1个反平行的β折叠。   2、酶学性质  高纯度GOD为淡黄色晶体,易溶于水,

β甘露聚糖酶的来源和酶学性质研究

β-甘露聚糖酶广泛存在于自然界中,在一些低等动物(如海洋软体动物Littorina brevicula)的肠道分泌液中、某些豆类植物(如长角豆、瓜儿豆等)发芽的种子中以及天南星科植物魔芋萌发的球茎中都发现了β-甘露聚糖酶酶活的存在。而微生物(包括真菌、细菌和放线菌等)则是饲用β-甘露聚糖酶的主要来源

β甘露聚糖酶的来源和酶学性质研究

  β-甘露聚糖酶广泛存在于自然界中,在一些低等动物(如海洋软体动物Littorina brevicula)的肠道分泌液中、某些豆类植物(如长角豆、瓜儿豆等)发芽的种子中以及天南星科植物魔芋萌发的球茎中都发现了β-甘露聚糖酶酶活的存在。而微生物(包括真菌、细菌和放线菌等)则是饲用β-甘露聚糖酶的主要

酶制剂在肉品加工中的应用

一、 转谷氨酰胺酶  目前欧美生产较多,亚洲有日本的味之素株式会社,我国江苏等地也有生产。转谷氨酰胺酶能利用肉制品蛋白质肽链上的谷氨酰胺残基的--甲酰胺基为供体,赖氨酸残基的--氨基为受体,催化转氨基反应,从而使蛋白质分子内或分子间发生交联。据报道谷;氨酰胺酶催化酪蛋白与鸡球蛋白比催化大豆(4780

酶制剂在肉品加工中的应用

一、 转谷氨酰胺酶  目前欧美生产较多,亚洲有日本的味之素株式会社,我国江苏等地也有生产。转谷氨酰胺酶能利用肉制品蛋白质肽链上的谷氨酰胺残基的--甲酰胺基为供体,赖氨酸残基的--氨基为受体,催化转氨基反应,从而使蛋白质分子内或分子间发生交联。据报道谷;氨酰胺酶催化酪蛋白与鸡球蛋白比催化大豆(4780

关于纤维蛋白形成的介绍

  凝血酶的作用下,纤维蛋白原转变成纤维蛋白凝块的过程。由于凝血酶的作用,纤维蛋白原分子中α键与β键间的精氨酸-甘氨酸键被断裂,并释放纤维蛋白肽A和B,生成纤维蛋白单体(fibrinmon-omer)。纤维蛋白单体聚合成为纤维蛋白多聚体,受凝血酶和钙离子的作用而活化的第VIII因子(转谷氨酰胺酶)再

饲料用酶制剂中木聚糖酶酶学性质

目前国内外关于木聚糖酶的生产条件及其生产菌株的特性报道较多。为了掌握常用饲用酶制剂中木聚糖酶的酶学性质,我们对某商品复合酶制剂中所含的木聚糖酶进行了热稳定性、最适pH值、最适反应温度、底物针对性、不同金属离子对其酶活的影响、反应进程曲线及其酶反应的未氏常数Km值等的测定,以期对常用的木聚糖酶的酶活测

酶的纯化方法

在食品加工过程中使用的酶究竟要达到怎样的纯度主要取决于这样的考虑:一种酶制剂是否含有其他的酶或组分。一种食品级酶制剂必须符合食品法规,但不要求是纯酶,它可以含有其他的杂酶,当然还含有各种非酶的组分。这些杂酶和非酶组分对于食品加工可能会带来有益的或有害的作用。例如,用于澄清果汁的果胶酶往往是从霉菌粗提

酶的纯化介绍

在食品加工过程中使用的酶究竟要达到怎样的纯度主要取决于这样的考虑:一种酶制剂是否含有其他的酶或组分。一种食品级酶制剂必须符合食品法规,但不要求是纯酶,它可以含有其他的杂酶,当然还含有各种非酶的组分。这些杂酶和非酶组分对于食品加工可能会带来有益的或有害的作用。例如,用于澄清果汁的果胶酶往往是从霉菌粗提

谷氨酰胺转氨酶(TG酶)应用专题概述

谷氨酰胺转胺酶又称转谷氨酰胺酶(简称TG),是一种催化酰基转移反应的转移酶,可催化其中的蛋白质分子之间发生交联,将蛋白质分子粘合起来。其作用于各种底物蛋白质,如酪蛋白、大豆蛋白、谷蛋白、肌球蛋白等,通过交联反应,改善蛋白质的凝胶性、乳化性等功能特性。可用于牛肉、猪肉、鸡肉等肉制品的粘合,改善其口感、

谷氨酰胺转氨酶(TG酶)应用研究

谷氨酰胺转胺酶又称转谷氨酰胺酶(简称TG),是一种催化酰基转移反应的转移酶,可催化其中的蛋白质分子之间发生交联,将蛋白质分子粘合起来。其作用于各种底物蛋白质,如酪蛋白、大豆蛋白、谷蛋白、肌球蛋白等,通过交联反应,改善蛋白质的凝胶性、乳化性等功能特性。可用于牛肉、猪肉、鸡肉等肉制品的粘合,改善其口感、

组织激肽释放酶的生物学性质和作用机制

  人体内的激肽释放酶包括血浆激肽释放酶和组织激肽释放酶,二者分别由前激肽释放酶(prekalikrein)和激肽释放酶原(prokallikrein)转换而来。血浆激肽释放酶催化高分子激肽原水解,生成缓激肽(bradykinin)和胰激肽(kallidin)。在人体内,组织激肽释放酶又称为胰/肾激

常用试剂的性质与制备纯化

常用试剂的性质与制备纯化有机化学实验经常用到大量的试剂,包括无机试剂和有机试剂,市售的试剂有分析纯(A.R)、化学纯(C.P)、工业级(T.P)等级别,其中分析纯的纯度较高,工业级则带有较多的杂质。在某些有机反应中,对试剂或溶剂的要求较高,即使微量的杂质或水分的存在,也会对反应的速率、产率和产品纯度