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你想要知道的数字PCR应用及前景

一. PCR的发展历史 PCR技术自问世以来,在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。第一代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展,1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR) 应运而生。qPCR是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质荧光强度来测定每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以Ct值也就成为定量的依据。基于荧光探针或染料的第二代 PCR 技术随后逐渐发展为检测核酸目标片段的主流分子诊断学技术。 在实时定量 PCR(qPCR) 过程中,荧光信号随着扩增产物的积累而增强。qPCR 能够实时获得模板扩增的荧光值,然后根据DNA ......阅读全文

2014年测序、克隆、细胞分析等技术展望

  新一代测序   新一代测序(NGS)技术一路走来,逐渐褪下其神秘面纱,进入越来越多的实验室。随着时间的推移,NGS系统从“高端大气上档次”的大型平台演化成满足个性化需求的台式测序仪。MiSeq、Ion Torrent和454 GS Junior这些仪器的上市,也推动了测序平台的普及。同

分子诊断与细胞分析市场热度持续攀升

  20世纪80年代初,曾经有人预言:“21世纪将是生物学的世纪”。这一预言如今已经成为现实,美国《科学》周刊评选的2014年全世界十大科技突破中,一半的成果都来自生命科学领域。  国内生物产业近年成为政策与资金关注的焦点,也给生命科学仪器带来巨大的市场机会。2014年,全球生命科学仪器市场销售额超

盘点2014年度十大改变世界的革命性技术

  基因编辑更快更准更简单  1973年,斯坦利•N•科恩(Stanley N. Cohen)和赫伯特•W•博耶(Herbert W. Boyer)找到了改变生物体基因组的方法,成功将蛙的DNA插入到细菌中。20世纪70年代末,博耶的基因泰克(Genetech)公司对大肠杆菌进行基因改造,使其带有一

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用(二)

1.3定量方法在real-timeQ-PCR中,模板定量有两种策略:相对定t和绝对定。相对定t指的是在一定样本中靶序列相对于另一参照样本的f的变化。绝对定t指的是用已知的标准曲线来推算未知的样本的to1.3.1标准曲线法的相对定f由于在此方法中f的表达是相对于某个参照物的f而官的,因此相对定f的标准

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用(二)

1.3 定量方法 在real-time Q-PCR中,模板定量有两种策略;相对定量和绝对定量。相对定量指的是在一定样本中靶序列相对于另一参照样本的量的变化。绝对定量指的是用已知的标准曲线来推算未知的样本的量。 1.3.1 标准曲线的法的相对定量 由于在此方法中量的表达是相对于某个参照物的量而言的

Nat Rev Genetics | 环状RNA的合成与功能

  环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种新兴的内源性非编码RNA(noncoding RNA,ncRNA),是继microRNA (miRNA)以及long noncoding RNA (IncRNA)后非编码RNA家族中极具研究潜力的新成员。越来越多的研究表明,环状RNA具

Nacia数字PCR在基因表达分析中的应用

华盛顿大学医学院儿科和加利福尼亚大学圣地亚哥分校医学院儿科的研究人员建立了一个稳定可靠的基于RNA磁珠提取和数字PCR的方法,可从粪便样本中检测与EE(热带肠病)关联的人mRNA,灵敏度可达20拷贝GAPDH mRNA/200mg粪便样本。已有报道表明病人粪便中存在人mRNA,可作为反应病人消化道病

神通广大的数字PCR,到底有多厉害?

   什么是数字PCR?  提起PCR,在生物及其相关行业内可谓无人不知无人不晓,半个世纪以来分子诊断的高速发展离不开分子生物学技术特别是PCR技术日新月异的进步。1983年由美国Mullis首先提出设想,1985年发明了聚合酶链反应,即简易DNA扩增法,标志着PCR技术的真正诞生。1999 年,美

中国仪器仪表学会分析仪器分会年会在京召开(一)

——暨中国分析仪器30年回顾   2009年11月21日上午8时30分,中国仪器仪表学会分析仪器分会年会暨七届二次理事会全体会议在北京北科大厦隆重召开。本次会议由中国仪器仪表学会分析仪器分会主办、创新方法研究会科学工具专业委员会协办、北京理化分析测试中心学会秘书处承办。石油化工科学研究院陆婉珍

Ion Torrent新一代测序仪介绍

引言      整个或部分基因组测序的研究问题已解决,研究者的研究重点向着遗传密码如何编码调控细胞功能方向转移。同样,在分子水平了解人类健康状况,基因序列数据则显得更加重要。大多数的测序都是针对部分基因序列或是一段目标区域,提供必需的数据来解释给定假说。利用P

群贤云集 新品闪耀 标记免疫2018学术峰会新品发布会开幕

  分析测试百科网讯 2018年6月29日-7月1日,由中国分析测试协会标记免疫分析专业委员会主办,中国人民解放军总医院医学检验中心生化科承办,江苏省医学会检验学分会、中国生物医学工程学会临床医学工程分会协办的中国分析测试协会标记免疫分析专业委员会2018年学术峰会在江苏宜兴举办。  会议围绕“跨界

一管血检测8种癌症 液态活检助力反映肿瘤基因图谱

  约翰霍普金斯大学医学院的科研人员1月18日在《Science》上发表了一篇文章,报道了一种名叫“CancerSEEK”的癌症早期筛查新方法,只需要从检测对象体内抽取一管血,便可检测出8种癌症。这一消息迅速“刷屏”,包括新浪医药在内的广大媒体纷纷转发。  首先得说,“CancerSEEK”作为液体

上交大博士自述开挂人生路:博士学位真的那么重要吗?

  知乎的这个问题下面,高赞回答TOP1,来自上海交通大学 微电子学与固体电子学博士@时间规划局。  他讲述了自己从几乎抑郁到爱上科研、从决定读博到放弃留校,从进入公司到辞职创业的亲身经历。  短短几年里,人生方向换了好多次,但他坚定地说——  “如果让我选出人生中最幸福的两件事,第一件,是在大学的

蛋白质微阵列技术

微阵列技术在单个实验中能同时分析数千个参数。捕获分子微点在固体支持物上固定成行列并暴露在含相应结合分子的样品中。基于荧光、化学发光、质谱、放射性或电化学的读出系统能检测每个微点形成的复合物。这些微小化和平行的结合分析高度灵敏,方法的分析能力又能被微阵列基因表达分析所放大。在这些系统中,检测固定的DN

Nat Methods: 2014年值得关注的技术

  单细胞测序被评为2013年年度技术   2014 年首刊,《Nature Methods》杂志将2013年度技术(Method of the Year 2013)授予了单细胞测序(single-cell sequencing)。同时,杂志还介绍了2014年值得关注的技术,包括

食品检测方面生物技术的应用

摘要:随着食品工业持续、快速地发展,传统的方法已经不能够 满足当前对食品检测的更高要求了,人们要求更为简便快捷、灵活 性强、特异性高的先进的检测方法,而现代的生物技术的快速发展 使食品的检测方法更加多样、准确、迅速及安全,也就是说生物技 术的应用满足了现代食品检测的更高要求。 关键词:食品检测;生物

生物芯片开辟个性化诊治前景

    盲区一:不知道乙肝病毒的局部点突变。临床上同样是乙肝,却可以有不同的病毒点突变,找到不同的突变从而选择不同的治疗是生物芯片——乙肝病毒基因突变检测体系的优势所在。乙肝病毒DNA有四个开放读码框,分别称为S区、C区、X区和P区,不同区域的突变直接影响着治疗方式的选

基因检测:NGS在病原微生物检测中的应用

文章导读  感染性疾病是当今世界严重威胁人类健康的重大疾病。目前,全球感染性疾病的发病率有所上升,病原体呈现多样化和复杂化的发展趋势。近年来快速发展的NGS技术因其不依赖于已知核酸序列,无需特殊探针设计,可直接对未知病原微生物进行检测,打破了传统微生物检验的局限性,在临床微生物领域展现了广阔的前景。

科技日报报道邹明强微纳传感器技术

  中国检验检疫科学研究院研究团队正在进行项目研讨  近年来,我国的食品安全突发事件层出不穷。而这些食品安全问题大多源于食源性致病菌的污染和食品生产、加工过程中对农药、兽药、添加剂等的不科学使用,甚至是违用、滥用等违法、违规行为所致。要从根本上解决食品安全问题,就必须对食品的生产、加工、流通和销售等

基因测序路在何方——专访Life Technologies销售总监柴映爽

  近年来,基因测序技术飞速发展,使得几十个甚至上百个基因的测序能够在几天之内完成,测序的成本也下降到普通百姓可以承受的范围,这使得基因测序的临床应用成为可能。在临床研究方面,外显子组甚至全基因组的基因测序大大加速了疾病分子标志物的寻找,使得多种疾病病因的诊断与分型与以往相比更加精确,在用药时也能更

液体活检在CTCs检测的应用

2015年,液体活检被《麻省理工大学科技评论》评选为年度十大突破技术,据Piper Jaffray预测,2026年广义液体活检全球市场总容量约326亿美元,包括癌症领域286亿美元、无创产前诊断(NIPT)20亿美元、器官移植20亿美元。在众多应用场景中,液体活检在癌症领域的应用占据超过85%的

新型超分辨显微技术的最新研究进展

从17世纪开始,现代生物学的发展就与显微成像技术紧密相关。然而,由于受光学衍射极限的影响,传统光学显微成像分辨率最小约为入射光波长的一半。因此,科学家们一直在不断努力,试图寻找突破光学显微镜分辨极限的方法。 在超分辨显微技术飞速发展的同时,现有成像技术的缺陷也日益显现,例如成像分辨率和成像时间不

5分钟快速释疑新冠病毒检测法:核酸还是CT好?

试剂盒检测结果不仅与试剂盒质量有关,还与新冠病毒自身的特点、采样部位、采样量、运输和储存环节,以及实验室检测条件和人员操作有关2020年2月3日,武汉大学中南医院影像科副主任张笑春发了一条朋友圈:“别迷信核酸检测了,强烈推荐 CT 影像作为目前 2019-nCoV 肺炎主要依据”,并称这是“一个一线

荧光原位杂交及其在人类基因组研究中的应用(三)

3.FISH在人类基因组研究中的应用   FISH作为确定基因片段在染色体上位置最直接的方法,在人类基因组研究中的应用日益广泛深入。所研究的基因片段通常克隆在质粒,phage,cosmid核YAC中,可以用FISH技术知道其在分带染色体上的位置,也可以以次手段进行某种遗传病的诊断。3. 1

访公利医院陈晓平教授:新生儿耳聋基因筛查意义非凡

  浦东新区医学会耳鼻咽喉头颈外科专委会”成立大会日前在上海市公利医院隆重召开,来自上海市耳鼻咽喉头颈外科相关领域领导、专家学者、大腕们聚集一堂,共同见证这一重要时刻。转化医学网有幸到专委会主任委员陈晓平教授所在公利医院对其进行访谈,以下是访谈具体内容:  我国耳聋的发病情况及发病原因  耳聋是一种

PerkinElmer成功收购上海浩源生物 扩展中国分子诊断市场

  发布会最后安排了媒体问答环节,珀金埃尔默诊断事业部副总裁、亚太地区诊断部总经理张晟先生,上海浩源生物技术有限公司技术总监杨国翠女士共同回答了各家媒体的问题,并一一进行了解答。以下为媒体问答实录:  收购完成后对浩源技术、产品的整合  问:PerkinElmer并购浩源生物主要是基于哪些

25 个引物相关的问题

1.      引物是如何合成的?目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,而Bioneer自行研制的专利384并行高通量DNA合成仪,可实现99%的高合成率。无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主要差别在于合

GEN:展望微流控芯片在生命科学领域的应用

  微流控技术,也被称作“芯片实验室”(LOAC),在欧洲被称为“微整合分析芯片”(micrototal analytical systems),它是微流控技术(Microfluidics)实现的主要平台,可以把生物、化学、医学分析过程的样品制备、反应、分离、检测等基本操作单元集成到一块微米尺度的芯

如何鉴定转基因成分?

  转基因生物(Genetically Modified Organism,简称 GMO),是利用现代分子生物学技术改变基因组构成的生物,而非传统的选择育种,一般包括转基因植物、 动物和微生物。转基因食品就是利用上述的转基因生物(包括植物、动物和微生物)加工而成的食品或食品添加剂。目前最受关注的绝大

盘点:分子诊断常用技术50年的沿革与进步

  一、基于分子杂交的分子诊断技术  上世纪60年代至80年代是分子杂交技术发展最为迅猛的20年,由于当时尚无法对样本中靶基因进行人为扩增,人们只能通过已知基因序列的探针对靶序列进行捕获检测。其中液相和固相杂交基础理论、探针固定包被技术与cDNA探针人工合成的出现,为基于分子杂交的体外诊断方法进行了