TLC的点样步骤
点样 (1)样品溶液一般用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等挥发性有机溶剂,最好用与展开剂极性相似的溶剂溶解试样,配成0.5%~1%的试液。 (2)点样量:点样量的多少与薄层的性能、厚薄及显色剂的灵敏度有关。一般来说,样品量最小为几ng,常用量为几至几十µg,制备型的分离可以点样到mg量。总之点样量随分离目的而定。 (3)点样方式:最好是直径3—5mm的圆点。常用点样方式包括a.一般点样,b.径向点样,c.条状点样,d.线形小孔点样,e.样品填入沟槽。 (4)点样容器:定容毛细管、微量注射器、点样器。......阅读全文
TLC的通用显色方法
TLC的通用显色方法理想的显色希望灵敏度高,斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好,斑点的大小及颜色的深度与物质的量成正比,在样品组成并不完全已知的情况下,通用显色方法显得尤为重要,通用显色方法主要有:1)、紫外照射法:方便、不破坏样品;2)、碘蒸气法:通用性强,与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用;
TLC薄层板的选用
薄层板的选用目前实验室已普遍采用市售高效薄层板,以硅胶G型板最为常见,相对于自制薄层板来说分离效果更好。由于硅胶表面的pH值约为5,比较适合于酸性和中性物质的分离,如有机酸、酚类、醛类等。碱性物质能与硅胶作用,展开时易被吸附于原点不动或出现斑点拖尾现象。在自制薄层板时可用稀碱溶液制备薄层使其变为碱性
高通量基因点样仪
高通量基因点样仪是一种用于基础医学领域的医学科研仪器,于2016年11月17日启用。 技术指标 1.X 轴移动速度:50-250mm/s;Y 轴移动速度:100mm/s;Z 轴移动速度:100mm/s;X,Y,Z轴移动精度:± 0.2mm;划线头定位精度:± 0.2mm。2.划头最小间距:
半自动点样仪概述
·使用 winCATS软件控制操作,仪器完全通过 "winCATS – 薄层色谱统一谱管理系统"软件控制,薄层板尺寸、轨道数目和间距以及每条轨道上的样品名称和点样体积都可非常方便地进行编程并保存在 winCATS中。仅在更换样品时(清洗、吸样和插入点样针)需手动。 把样品以条带状喷射在TLC/
关于薄层色谱法点样的方式介绍
分为手动点样和自动点样。手动点样主要器具为微量毛细管、微量注射器等。自动点样采用半自动点样仪或全自动点样仪,按预设程序自动点样。手动点样灵活方便,常用于各种TLC鉴别中,器具以微量毛细管最常用。仪器的自动点样准确性好,常用于薄层扫描法的含量测定。
薄层色谱分析步骤及注意事项
薄层色谱法(thin layer chromatography简写TLC)是一种物理化学的分离技术,常用于药物的分离与分析。现对此方法的分析步骤及注意事项提点建议。 完成TLC分析通常需经制板、点样、展开、检出4步操作。⑴制板 在一平面支持物(通常为玻璃)上,均匀地涂制硅胶、氧化铝或其他
怎样提高薄层色谱的点样效率?
点样是造成TLC定量误差的主要来源。实验证明:定量毛细管更适合较小体积的点样;微量注射器更适合较大体积的点样。这主要是因为微量注射器受小气泡、溶液回爬现象的影响较大。为避免不同定量毛细管间的点样误差、建议一块薄层板上最好用同一只定量毛细管。但应注意更换样品时,应将毛细管用超声波或不同极性溶剂清
薄层色谱系列仪器培训
為了用戶更好地了解Camag儀器的操作及维护,力揚定期為客戶提供培訓。 薄层色谱系列仪器及应用培训安排的時間表如下:时间内容12月6号9:00~11:30 报告:薄层色谱标准化及其在中药检验的应用11:30~13:30午餐13:30~15:30报告:薄层色谱在中国药典的使用及发展
TLC点板,产物极性忽大忽小,原来是这个原因
TLC可以说是我们合成人的眼睛,我们用它判断反应是否发生,用它判断反应体系是否干净。小编最近遇到一个现象,同一个反应体系,小编分别用乙酸乙酯/石油醚与二氯甲烷/石油醚两种不同的展开剂进行TLC点板,发现两个点在不同的展开剂中极性出现了反转,不知道大家有没有遇到过。小编也以查了一些资料,与大家分享
全自动点样仪的功能介绍
一、具有两种(接触式和非接触喷雾式)点样方式,可点点状、带状及方形。根据不同的薄层板选择不同的点样方式,如点软板(手铺板)时,可选择接触式,因为若选用喷雾方式可能会将硅胶吹走。二、具有加热功能。当点样量较大时,或是溶剂较难挥发(如水溶液),可选择加热方式点样,减少斑点扩散。三、点样台的高度可以调节,
简单介绍芯片点样仪的结构
芯片点样仪是将生物样品(核酸或蛋白)以一定的阵列方式快速、准确地点在载玻片或薄膜上,形成生物样品为阵列的仪器,也是从事生物芯片研发和生产的必备仪器。 从点样过程的要求来看,芯片点样仪一般应由以下几部分组成。 ①机械部分:系统应具有三个自由度,使点样头可运动到工作空间的任意位置。 ②控制部分
常见的芯片点样仪有哪些?
1、Genemachine公司生产的芯片点样仪 美国的Genemachine公司生产的GeneMachines芯片点样仪,其机械结构以一个现成的光学平台为基础。载片台安装在可前后运动的导轨平台的移动滑块上,而前后运动的导轨平台则被紧固在光学平台上。点样头可以和小导轨平台的滑块一起做垂直上下运动
芯片点样仪的使用方法
1、点制芯片前半小时,将GMP内空调温度设置为室温; 2、点样开始前,检查加湿器和系统内的水位,不足时补充离子水,废液桶内水满时应及时倒去; 3、进入操作系统后,进入点样仪操作程序,初始化芯片点样仪; 4、检查芯片点样仪针头及与针头相连的导管中是否有气泡,如有气泡应反复排空,待导管完全排空
简单介绍芯片点样仪的原理
接触式芯片点样仪:即点样针直接与固相支持物表面接触,将DNA样品留在固相支持物上,此种点样方式适合一次取样点50张芯片以下的情况;其二为非接触式点样,即喷点,它是以压电原理将DNA样品通过毛细管直接喷至固相支持物表面,此种点样方式适合一次取样点50张芯片以上的情况,并且非接触式点样的密度不如接触
芯片点样仪的发展趋势
目前的芯片点样仪已经很成熟,功能完备,软件操作灵活方便,可以满足绝大部分使用者的需要。虽然芯片点样仪将继续在市场和实验室中占有很大的份额,但由于它体积大而且只是作为生物芯片应用的一个环节存在,这样当它和样品制备、试验检测等等一起使用时总体上不易得到很好的一致性,所以芯片点样仪的小型化、集成化、自
生物芯片技术的点样法
点样法在多聚物的设计方面与原位合成技术相似。只是合成工作用传统的DNA、多肽合成仪或PCR扩增或体内克隆等方法完成。大量制备好的核酸探针、多肽、蛋白等生物大分子再用特殊的自动化微量点样装置将其以较高密度互不干扰地印点于经过特殊处理的玻片、尼龙膜、硝酸纤维素膜上,并使其与支持物牢固结合。支持物需预先经
芯片点样仪目前的使用现状
芯片点样仪的机械结构大致都是由三维运动组成的,但具体实现的手段却有着较大的差别。这差别不仅来自于不同设计者构思的差异,更来自于不同的使用者不尽相同的需求。大凡研究单位是不会象基因芯片的生产商那样追求产片的高速度,即载片数量大、运动速度快。但为了提高科研的效率,更希望在单个玻片上载入尽可能多的信息
直接点样的芯片制备技术
直接点样法最早由Stanford大学Brown实验室发展而来,是将微量的寡聚核苷酸片段、cDNA或蛋白质等通过特定的高速点样机器人直接排列到玻片等介质上,生物大分子探针通过共价键或离子键与特殊处理的玻片相连,从而制备成芯片。直接点样法主要包括3个重要的环节:探针的准备,载体的表面修饰和点样。
生物芯片技术的点样法
点样法在多聚物的设计方面与原位合成技术相似。只是合成工作用传统的DNA、多肽合成仪或PCR扩增或体内克隆等方法完成。大量制备好的核酸探针、多肽、蛋白等生物大分子再用特殊的自动化微量点样装置将其以较高密度互不干扰地印点于经过特殊处理的玻片、尼龙膜、硝酸纤维素膜上,并使其与支持物牢固结合。支持物需预先经
薄层层析的操作步骤
1.点样: ⑴ 样品的溶解:将样品溶于展开剂极性相近、挥发性高的有机溶剂。 ⑵ 薄层点样:用毛细管(0.5mm以下)或用专业点样器进行点样。 点样的要求:样点位置应在距离底边1-1.5cm处;点样量适当;样点直径小于2-3mm;间隔反复点样;多个样点时,间隔为2cm且处于同一条直线上。
TLC念珠状斑点
念珠状斑点念珠状斑点是指化合物斑点之间距离小,相互连接呈念珠状。原因及解决办法样品中成分过多,在一定长度的薄层板上,排布不开,彼此重叠。可适当增加层析板长度,使斑点距离加大或采用双向层析,使所含成分向两个方向展开可以避免念珠状斑点的出现。多次点样时,点样中心不重合,形成复斑。应以适当浓度供试液一次点
TLC检视与记录
检视与记录薄层图谱应及时进行检视和记录,以避免图谱因环境因素发生变化。尽可能用摄像设备拍摄,以光学照片或电子图像的形式保存。紫外光下拍摄图谱时,应使用滤光片滤除紫外光以免图谱与肉眼观察间存在色差,确保记录的真实完整。
薄层色谱(TLC)定义
定义薄层色谱又叫薄板层析,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,是近来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法。
TLC应用与实例
应用与实例在有机化学中,有机反应可通过TLC进行定性的检测。使用毛细管将样品点于TLC板上:一个点表示起始原料,一个点表示反应体系,一个点表示两者“混合点”。一个小型TLC板(3X7cm)只需几分钟就可以完全展开。整个分析过程是定性的,它可显示起始原料是否消失即是否反应已经完成;是否有产物出现以及产
薄层色谱(TLC)定义
薄层色谱(TLC)是一种非常有用的跟踪反应的手段,还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶,它们是极性很大(标准)或者是非极性的(反相)。流动相则是一种极性待选的溶剂。在5.301中以及大多数实验室实验中,都将使用标准硅胶板。将溶液中的反应混合物点在薄板上,然后利用毛
什么是TLC检测
薄层色谱法(TLC),系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,也用于跟踪反应进程。
TLC是什么色谱
薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。一方面适用于小量样品(几到几十微克,甚至0.01μg)的分离;另一方面若在制作薄层板时,把吸附层加厚,将样品点
TLC中上样差别
上样上样也有干法和湿法之分:干法(也称硅胶制沙)就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。(我一般喜欢用这种方法,除非不能用)湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以
什么是TLC检测
薄层色谱法(TLC),系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,也用于跟踪反应进程。
TLC操作方法
操作方法 (1) 薄层板制备 除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的气泡后,倒入涂布器中,在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布(厚度为0.2~0.3mm),取下涂好薄层的玻板,置水平台上于室温下晾干,后在110℃烘30分钟,即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度(