TLC的点样步骤
点样 (1)样品溶液一般用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等挥发性有机溶剂,最好用与展开剂极性相似的溶剂溶解试样,配成0.5%~1%的试液。 (2)点样量:点样量的多少与薄层的性能、厚薄及显色剂的灵敏度有关。一般来说,样品量最小为几ng,常用量为几至几十µg,制备型的分离可以点样到mg量。总之点样量随分离目的而定。 (3)点样方式:最好是直径3—5mm的圆点。常用点样方式包括a.一般点样,b.径向点样,c.条状点样,d.线形小孔点样,e.样品填入沟槽。 (4)点样容器:定容毛细管、微量注射器、点样器。......阅读全文
芯片点样仪目前的使用现状
芯片点样仪的机械结构大致都是由三维运动组成的,但具体实现的手段却有着较大的差别。这差别不仅来自于不同设计者构思的差异,更来自于不同的使用者不尽相同的需求。大凡研究单位是不会象基因芯片的生产商那样追求产片的高速度,即载片数量大、运动速度快。但为了提高科研的效率,更希望在单个玻片上载入尽可能多的信息
生物芯片技术的点样法
点样法在多聚物的设计方面与原位合成技术相似。只是合成工作用传统的DNA、多肽合成仪或PCR扩增或体内克隆等方法完成。大量制备好的核酸探针、多肽、蛋白等生物大分子再用特殊的自动化微量点样装置将其以较高密度互不干扰地印点于经过特殊处理的玻片、尼龙膜、硝酸纤维素膜上,并使其与支持物牢固结合。支持物需预先经
生物芯片技术的点样法
点样法在多聚物的设计方面与原位合成技术相似。只是合成工作用传统的DNA、多肽合成仪或PCR扩增或体内克隆等方法完成。大量制备好的核酸探针、多肽、蛋白等生物大分子再用特殊的自动化微量点样装置将其以较高密度互不干扰地印点于经过特殊处理的玻片、尼龙膜、硝酸纤维素膜上,并使其与支持物牢固结合。支持物需预先经
常见的芯片点样仪有哪些?
1、Genemachine公司生产的芯片点样仪 美国的Genemachine公司生产的GeneMachines芯片点样仪,其机械结构以一个现成的光学平台为基础。载片台安装在可前后运动的导轨平台的移动滑块上,而前后运动的导轨平台则被紧固在光学平台上。点样头可以和小导轨平台的滑块一起做垂直上下运动
简单介绍芯片点样仪的结构
芯片点样仪是将生物样品(核酸或蛋白)以一定的阵列方式快速、准确地点在载玻片或薄膜上,形成生物样品为阵列的仪器,也是从事生物芯片研发和生产的必备仪器。 从点样过程的要求来看,芯片点样仪一般应由以下几部分组成。 ①机械部分:系统应具有三个自由度,使点样头可运动到工作空间的任意位置。 ②控制部分
直接点样的芯片制备技术
直接点样法最早由Stanford大学Brown实验室发展而来,是将微量的寡聚核苷酸片段、cDNA或蛋白质等通过特定的高速点样机器人直接排列到玻片等介质上,生物大分子探针通过共价键或离子键与特殊处理的玻片相连,从而制备成芯片。直接点样法主要包括3个重要的环节:探针的准备,载体的表面修饰和点样。
全自动点样仪的功能介绍
一、具有两种(接触式和非接触喷雾式)点样方式,可点点状、带状及方形。根据不同的薄层板选择不同的点样方式,如点软板(手铺板)时,可选择接触式,因为若选用喷雾方式可能会将硅胶吹走。二、具有加热功能。当点样量较大时,或是溶剂较难挥发(如水溶液),可选择加热方式点样,减少斑点扩散。三、点样台的高度可以调节,
简单介绍芯片点样仪的原理
接触式芯片点样仪:即点样针直接与固相支持物表面接触,将DNA样品留在固相支持物上,此种点样方式适合一次取样点50张芯片以下的情况;其二为非接触式点样,即喷点,它是以压电原理将DNA样品通过毛细管直接喷至固相支持物表面,此种点样方式适合一次取样点50张芯片以上的情况,并且非接触式点样的密度不如接触
芯片点样仪的使用方法
1、点制芯片前半小时,将GMP内空调温度设置为室温; 2、点样开始前,检查加湿器和系统内的水位,不足时补充离子水,废液桶内水满时应及时倒去; 3、进入操作系统后,进入点样仪操作程序,初始化芯片点样仪; 4、检查芯片点样仪针头及与针头相连的导管中是否有气泡,如有气泡应反复排空,待导管完全排空
薄层色谱的使用及注意事项
1、 怎样提高点样效率? 点样是造成TLC定量误差的主要来源。实验证明:定量毛细管更适合较小体积的点样;微量注射器更适合较大体积的点样。这主要是因为微量注射器受小气泡、溶液回爬现象的影响较大。为避免不同定量毛细管间的点样误差、建议一块薄层板上最好用同一只定量毛细管。但应注意更换样品时,应将毛细管用超
TLC展开剂的选择
TLC与HPLC相比,一个突出的优点就是流动相的选择具有更大的灵活性,流动相的选择的目的是使绝大部分样品的Rf值位于0.1-0.7之间并达到较好的分离,与此对应的是流动相要有适当的强度和组成。流动相强度越大,溶质Rf值越大,但很可能降低分离能力;另外单一溶剂很难分离较复杂的混合物、根据相似相溶原理,
原位TLCFTIR法
该方法是采用红外漫反射光谱(DRIFTS)测定法对TLC板上的色谱斑点进行直接检测,最初是在1975年由Percival和Griffiths报道的。傅里叶红外光谱仪的漫反射装置见图11-6-25。一般在未点样前先测得薄层板背景光谱图,点样层析后再测得同样位置的分离谱带的红外光谱图,前后谱图经差谱可得
薄层色谱小知识
1、怎样提高点样效率? 点样是造成TLC定量误差的主要来源。实验证明:定量毛细管更适合较小体积的点样;微量注射器更适合较大体积的点样。这主要是因为微量注射器受小气泡、溶液回爬现象的影响较大。为避免不同定量毛细管理体制的占样误差,建议一块薄层板上最好用同一只定量毛细管。但应注意更换样品时,应将毛
肽中磷酸化氨基酸位置测定实验
基本方案 手工EDMAN降解法 实验方法原理 磷酸丝氨酸或磷酸苏氨酸降解后释放出丝氨酸或苏氨酸和自由磷酸盐,而磷酸酪氨酸降
肽中磷酸化氨基酸位置测定实验
实验方法原理 磷酸丝氨酸或磷酸苏氨酸降解后释放出丝氨酸或苏氨酸和自由磷酸盐,而磷酸酪氨酸降解后释放出磷酸酪氨酸的衍生物——苯胺基噻唑啉酮。实验材料 洗脱的磷酸肽(见辅助方案 1)试剂、试剂盒 5%(V/V)异硫氰酸苯酯(PLTC)溶于吡啶中10:1(V/V)庚烷/乙酸乙酯-10 份庚烷与 1 份
肽中磷酸化氨基酸位置测定实验
实验方法原理磷酸丝氨酸或磷酸苏氨酸降解后释放出丝氨酸或苏氨酸和自由磷酸盐,而磷酸酪氨酸降解后释放出磷酸酪氨酸的衍生物——苯胺基噻唑啉酮。实验材料洗脱的磷酸肽(见辅助方案 1)试剂、试剂盒5%(V/V)异硫氰酸苯酯(PLTC)溶于吡啶中10:1(V/V)庚烷/乙酸乙酯-10 份庚烷与 1 份乙酸乙酯混
全自动点样仪标准参数
1.点样方式及形状:接触式点状点样,喷雾式带状、方形点样;2.不同厚度的薄层板,最大至4mm;3.进样针规格:10ul/25ul/100ul; ;4.(10ul/25ul/100ul进样针);5.进样针驱动:100nL/960/384/96步(10ul/25ul/100ul)
生物芯片制备点样仪
生物芯片制备点样仪是一种用于基础医学领域的医学科研仪器,于2007年4月3日启用。 技术指标 1、一次可放50块标准玻片或6块标准多孔板,3块样品板(96或384孔样品板)2、标准玻片最多可点探针40,000个,48个亚矩阵;3、点与点间距150μm,每个点直径为100-200μm,每个点样
生物芯片技术点样法
点样法在多聚物的设计方面与原位合成技术相似。只是合成工作用传统的DNA、多肽合成仪或PCR扩增或体内克隆等方法完成。大量制备好的核酸探针、多肽、蛋白等生物大分子再用特殊的自动化微量点样装置将其以较高密度互不干扰地印点于经过特殊处理的玻片、尼龙膜、硝酸纤维素膜上,并使其与支持物牢固结合。支持物需预先经
仪器介绍/全自动点样仪
一、具有两种(接触式和非接触喷雾式)点样方式,可点点状、带状及方形。根据不同的薄层板选择不同的点样方式,如点软板(手铺板)时,可选择接触式,因为若选用喷雾方式可能会将硅胶吹走。二、具有加热功能。当点样量较大时,或是溶剂较难挥发(如水溶液),可选择加热方式点样,减少斑点扩散。三、点样台的高度可以调节,
芯片点样仪有哪些优点
生物芯片的制作主要有光引导原位合成法、电喷射原位合成法、接触式点涂法和非接触喷射法(通过压电晶体或其他推进形式)四种,前两种方法都是在芯片上直接合成探针,后两种方法是把事先已制备好的探针样品(如通PCR方法)移植固定在玻璃或硅片上,通常通过电脑自动化操作呈阵列状分布。其中最经济高效的还是后两种方
介绍生物芯片点样仪
生物芯片点样仪 型号:SM100 SM100功能生物芯片点样仪采用非接触式压电振荡技术开发,通过压电元件将电脉冲转换为压电元件的位移改变,从而使毛细管点样针喷出微小液滴,可用于nL级的液体微量点样,且毛细管点样针可单独更换,确保为不同应用领域的客户提供解决方案。 技术指标 喷头 点样方式
简述生物芯片点样仪
SM100功能生物芯片点样仪采用非接触式压电振荡技术开发,通过压电元件将电脉冲转换为压电元件的位移改变,从而使毛细管点样针喷出微小液滴,可用于nL级的液体微量点样,且毛细管点样针可单独更换,确保为不同应用领域的客户提供解决方案。 技术指标 喷头 点样方式:非接触式 驱动方式:压电振荡 点样体
薄层色谱法点样方法
点样方式:分为手动点样和自动点样。手动点样主要器具为微量毛细管、微量注射器等。自动点样采用半自动点样仪或全自动点样仪,按预设程序自动点样。手动点样灵活方便,常用于各种TCL鉴别中,器具以微量毛细管最常用。仪器的自动点样准确性好,常用于薄层扫描法的含量测定。
TLC中手工自制板
手工自制板1)、玻璃板的要求:用于制备薄层板的玻璃板要求表面光洁、平整,最好使用厚薄1~2mm的优质平板玻璃,普通窗玻璃一般不宜用于制作薄层板,玻璃板需洗净至不挂水,晾干,贮存于干燥洁净处备用。玻璃板反复使用时,应注意经常用洗液及碱液清洗,保持玻璃板面的光洁是保证薄层板质量的最基本要求。2)、制作方
TLC薄层色谱法
薄层色谱法,又简写为TLC,常用于中药成方制剂中有效成分的定性鉴别。由于该方法鉴别专属性强,使用设备简单,易于操作,故应用广泛,在目前的药品质量标准定性鉴别中(如中国药典和食品药品监督管理局标准),已大大地超过了显微鉴别、理化鉴别和光谱鉴别。
TLC中干法装柱
干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧(湿法也要敲的,效果好点),至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装的很结实(一般柱子不敢用油泵抽,怕把柱子抽裂了)。接着是用淋洗剂"走柱子",一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一
TLC操作过程
操作过程点样:将试样溶液用毛细管在层析板上距离板底部约1.5厘米的位置点若干下(次数根据样品浓度而定),并静置顷刻(或加热)以使溶剂完全蒸发。若溶剂难以挥发,则点样之后需要将板放于真空容器中干燥后再使用。溶剂的蒸发是必须的,否则残留的溶剂会与流动相作用,降低流动相的均一性,导致分离效果变差。将少量合
TLC照相操作规程
TLC照相操作规程1 安装近摄镜、外快门线。2 固定相机,使镜头与薄层板距离约30cm。3 打开开关“ON”。4 光圈调在 f3.5。5 调节快门档,荧光照相置“ B”档,日光照相观察自动显示的速度,一般在1/30或 l/15秒档。6 打开摄影架的电源开关及日光灯。7 放置需拍摄的 TLC板,调节变
TLC中湿法装柱
湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压(土方法可以用养鱼的氧气泵加压或是用氮气,当然不加压也可以)用淋洗剂"走柱子",本法最大的优点是一般柱子装的比较结实,没有气泡。 (我一般都用湿法装柱)