新冷泉港实验手册聚焦皮肤癌模拟方法
皮肤癌在美国是最常见的一种人类癌症。为了全面了解人类皮肤癌，科学家就必须利用模型生物如小鼠在实验室研究这种疾病。 这个月发布的新一期《冷泉港实验手册》包括了创造鳞状上皮细胞癌（SCC）小鼠模型的方法。SCC是一种最常见的皮肤癌类型。这个步骤包括给小鼠注射一种叫做DMBA的药物，这种药物能够突变并激活一种促肿瘤基因。使用的第二种药物TPA能够促进携带这种突变基因的细胞的增殖。最终，这些操作导致一个肿瘤的形成。 该实验的protocol可在以下网址免费获得：http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/2007/18/pdb.prot4837 ，内容包括如何监督和评估小鼠的肿瘤形成临床迹象。另外，还包括制备用于组织学分析的肿瘤组织，从而使研究人员能够在微观水平分析肿瘤特征。 这个protocol来自耶鲁大学医学院的Michael Girard博士研究组。该研究组利用这种步骤方法......阅读全文
MicroCT检测肿瘤小鼠模型实验报告（二）
实验（一）总结：实验中成功注射了Fenestra VC小动物造影剂，该造影剂的最大优点是可以在体内持续保持长时间造影效果。实验结果完全满足了本次模型制备情况监测的目的，发现了直径大约3mm，总体积为13.0107mm3的肿瘤。2. N小鼠（C57小鼠19.6 g）（1）成像前的准备11:46 对编
protocol：小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤1
1、一般培养：保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代2 、体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片）体外分化方法注：以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系，其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol，
protocol：小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤3
体外分化方法第1步：ES培养基在LIF存在的条件下维持细胞培养第2步：EB培养基使用细菌培养皿去除LIF后胚状体的形成需要4天。1、分散纯化细胞（参见上面的细胞传代部分）2、纯化 2小时后将细胞转入含有ES培养基的50ml Falcon管中，计数细胞取适量体积放入15ml管中离心3分钟。3、用2ml
protocol：小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤2
体外向心肌细胞方向分化胚胎干细胞在体外去除LIF情况下会自然向心肌细胞方向分化，小鼠的R1系一般在第7-8天自然出现搏动的心肌细胞，与胚胎发育时间线是完全一致的。培养基：EB 配制一20×不含DMEM，FBS，LIF的溶液（该溶液也能用于ES培养基--见前述）。分装在50ml 离心管中，（稀释为
RNA研究先驱Nature获piRNA突破性新发现
来自冷泉港实验室的科学家们取得重要进展，了解保护动物基因组防止称作转座子的潜在危险遗传元件这一过程的最早期步骤。如果失去控制，这些基因组寄生物可能会肆意泛滥，导致不育。 冷泉港实验室的Gregory J. Hannon教授和Leemor Joshua-Tor共同领导了这一研究。Hann
PNAS：小鼠模型须谨慎使用
小鼠被广泛用于模拟人类代谢、疾病和药物应答，是医学研究中的一个基本工具。然而斯坦福大学的研究团队指出，人类和小鼠的基因表达存在着惊人的差异，不论是蛋白编码基因还是非编码基因。这项研究发表在十一月十七日的美国国家科学院院刊PNAS杂志上。 Michael Snyder及其同事在15种组织中比较了
小鼠脑出血模型的建立
实验材料 小鼠试剂、试剂盒 戊巴比妥钠仪器、耗材 钻孔器注射器含抗凝血剂的试管鼠板缝合方针和线实验步骤 1．固定小鼠 a．用绳子将已麻醉的小鼠俯卧（背朝上）固定在鼠板上，绳子用活结，这样不易打滑。固定时要保持小鼠的两只前脚和两只后脚分别在一条直线上。 b．用棉花将小鼠的头微微垫高，这样方便切开皮肤。
小鼠脑出血模型的建立
实验材料小鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠仪器、耗材钻孔器注射器含抗凝血剂的试管鼠板缝合方针和线实验步骤1．固定小鼠 a．用绳子将已麻醉的小鼠俯卧（背朝上）固定在鼠板上，绳子用活结，这样不易打滑。固定时要保持小鼠的两只前脚和两只后脚分别在一条直线上。 b．用棉花将小鼠的头微微垫高，这样方便切开皮肤。 2．钻
常见小鼠肿瘤模型特点概述
【干货】小鼠肿瘤模型那些事儿 嗨，小伙伴们晚上好啊！首先呢，小编想问大家一个问题，咱们天天挂在嘴边的小鼠肿瘤模型到底是怎么构建的呢？每种模型的特点是什么？最优秀的模型又属哪一个？.....其实吧，要说模型佼佼者，当然是越能体现人类疾病的发生和发展就越好，毕竟，“坚持以人为本”才是我们的
常见小鼠肿瘤模型特点概述
嗨，小伙伴们晚上好啊！首先呢，小编想问大家一个问题，咱们天天挂在嘴边的小鼠肿瘤模型到底是怎么构建的呢？每种模型的特点是什么？最优秀的模型又属哪一个？.....其实吧，要说模型佼佼者，当然是越能体现人类疾病的发生和发展就越好，毕竟，“坚持以人为本”才是我们的最终目的！但话说回来，每种模型都有其优劣，没
T迷宫实验手册
一、实验原理近半个世纪前，Kivy和Dember等人证明大鼠能辨别T-形迷宫（T-maze）两臂颜色的变化。他们发现，将雄性大鼠置于T-形迷宫的主干臂 15-30min，让其能看见、但不能进入黑白两臂。然后，改变其中一个臂的颜色，使两臂同为黑色或白色。让大鼠自由选择T-形臂。结果显示，大鼠总
“饿死”乳腺癌细胞的方法找到
当快速生长的乳腺癌细胞耗尽谷氨酰胺时，它们会转向另一条供应线。PHGDH（绿色）是该代谢途径中的关键酶。当乳腺癌细胞中的谷氨酰胺和PHGDH同时耗尽时，它们的生长就会受到阻碍。图片来源：冷泉港实验室美国冷泉港实验室研究人员找到了一种方法，可剥夺癌细胞的重要营养物质及其备用供应。在对乳腺癌细胞、患者衍
“饿死”乳腺癌细胞的方法找到
当快速生长的乳腺癌细胞耗尽谷氨酰胺时，它们会转向另一条供应线。PHGDH（绿色）是该代谢途径中的关键酶。当乳腺癌细胞中的谷氨酰胺和PHGDH同时耗尽时，它们的生长就会受到阻碍。图片来源：冷泉港实验室 美国冷泉港实验室研究人员找到了一种方法，可剥夺癌细胞的重要营养物质及其备用供应。在对乳腺癌细胞、患
新灵长类大脑图谱
长期以来，科学家们一直难以找到全面绘制灵长类大脑神经元之间连接结构的工具。来自冷泉港实验室的神经科学家在日本进行的新研究重建了狨猴大脑三维立体图像，以及整个大脑的神经连接，这是迄今为止最详细的灵长类大脑图谱，文章发表在《eLife》杂志。 该研究引入了结合实验和计算的新方法，有助于解释个体大脑
Western－Blot－Protocol实验步骤
一、提取抗原蛋白 将提取RNA途中留存的样品，加入150μl100%酒精充分混匀，静置5min(RT),2000×g,4℃离心5min,吸取上清至新管中,加入750μl异丙醇,混匀,静置10min(RT),12000×g,4℃离心10min,弃上清,加入1ml0.3mol/L盐酸胍/95%酒精重悬
Nature：全新抑癌基因网络
来自美国冷泉港实验室，加拿大麦吉尔大学等多处研究机构的研究人员发表了题为“A tumour suppressor network relying on the polyamineChypusine axis”的文章，报道了一种基于多胺hypusine轴(polyamineChypusine
小鼠肺癌模型的肿瘤在间歇性缺氧实验的应用
间歇性缺氧促进小鼠肺癌模型的肿瘤发展 阻塞性睡眠呼吸暂停（OS A）的特点是睡眠期间上气道反复闭塞导致慢性间歇性缺氧（CIH），阻塞性睡眠呼吸暂停综合症是一种非常普遍的睡眠障碍，涵盖至少3%至7%的成年人口。OSA与代谢综合征、系统性高血压、肺血管疾病、缺血性心脏病、充血性心力衰竭等疾病有关。
研究脑部机制的新型小鼠模型
美国犹他州立大学领衔的研究团队培养出一种新型遗传工程小鼠，该小鼠携带一个蛋白标记，在一定程度上改变了不同钙水平的荧光应答，这就为研究星形胶质细胞和小神经胶质细胞提供了新的途径。该研究成果于2014年8月14日发表在《神经元》（Neuron）杂志上。 炎症是多发性硬化、阿尔茨海默病等神经性疾病共
STM：人造抗氧化剂加速小鼠皮肤癌转移
近日，来自瑞典的科学家在国际学术期刊science translational medicine上发表了一项最新研究进展，他们指出一种用于帮助慢性阻塞性肺病（COPD）病人祛痰的人造抗氧化剂药物--N-乙酰半胱氨酸可能会加速小鼠皮肤癌的扩散，这一研究结果对该药物的安全性提出了新的质疑。 该药物
Western－Blot－Protocol实验操作步骤
一、提取抗原蛋白 将提取RNA途中留存的样品，加入150μl100%酒精充分混匀，静置 5min(RT),2000×g,4℃离心5min,吸取上清至新管中,加入750μl异丙醇,混匀,静置10min(RT),12000×g,4℃离心 10min,弃上清,加入1ml0.3mol/L盐酸胍/95%酒
PNAS：癌症免疫应答的非侵入式研究新方法
来自美国Whitehead生物医学研究所，麻省理工等处的研究人员研发出了一种观察癌症免疫应答过程的新工具：将正电子发射断层成像（PET），以及对位于免疫细胞的细胞表面蛋白具有特异性的抗体片段结合在一起，就能帮助研究人员观察到小鼠癌症模型中的肿瘤生长免疫应答过程。 这一研究成果公布在4月20日的
慢性压力助长癌症转移原因找到
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/2/517967.shtm ?图为小鼠的肺癌转移图。该小鼠接受了旨在模拟癌症患者所经历的压力的实验。图片来源：埃格布拉德实验室/冷泉港实验室科技日报讯 （记者张梦然）压力是不可避免的，但压力过大则可
RNAi基因沉默方法
大约在十年前，2006年诺贝尔生理/医学奖得主CraigMello和AndrewFire发现，他们能够将短RNA 分子插入到线虫中并沉默特定基因的表达。今天，研究人员也常常使用这种强大的RNA 干扰方法来研究哺乳动物系统中的特定基因功能。为了进行这种基因沉默实验，研究人员通常需要依赖化学合成的RNA
转基因小鼠模型的建立(SOP)6
[洗卵管制作]1） 点燃酒精灯，调节火焰到最佳。捏持玻璃毛细吸管或巴氏移液管在火焰上焰旋转过火。2） 当吸管开始变软，快速撤离火焰，向外急剧扯拉使吸管变长，形成口径大约200?l的吸管。注意制备过程中离开火焰的时间以及扯拉的力度，尽量保证制备吸管的一致性。3） 为吸管评分，轻柔地折断吸管，辨别
转基因小鼠模型的建立(SOP)4
（6） 为保暖包裹小鼠于纱布中或将其放置于热垫内使其苏醒，处于麻醉状态下的小鼠应该严格监护直到其完全苏醒。手术后小鼠饲养2周后确定手术是否成功。（7） 实验性饲养：将1-2只母鼠与输精管切除小鼠合笼饲养，次晨进行阴道栓检查。有阴道栓的母鼠，用磷酸缓冲液处理后24小时，其输卵管潮红。卵细胞应该处于单
转基因小鼠模型的建立(SOP)7
10） 移卵操作完成后，撤回移卵管，去除器械，按原本位置将各器官重置于腹腔内。10）缝合切口，用小夹夹持皮肤。常用自动小夹代替缝线，这样可以避免小鼠啃嘶缝线，切口裂开。11）若进行双侧手术，则于另一侧子宫角重复上述操作。12）手术完成后，安置小鼠于清洁的笼中。麻醉状态下，小型哺乳动物无法有效维持机
用肝癌小鼠模型研究人类HCC，why？
近日，来自美国贝勒医学院的研究人员在国际期刊nature communication发表一项最新研究成果，他们发现核外源性受体CAR与β catenin共同激活能够诱导小鼠已分化肝脏细胞的增殖，导致细胞增殖失控，发生肝癌。这项研究成果证明了肝癌小鼠模型与人类HCC具有直接关系，因此利用肝癌小鼠模
转基因小鼠模型的建立(SOP)8
（1） RNA的分离：根据实验者的需要从转基因小鼠组织或细胞中提取总RNA或mRNA。分离总RNA比较简单，且适合做基因做基因转录分析。实验操作参见第一章的第四节。（2） Northern 印迹分析：该技术用于定性检测转基因动物组织或细胞中转基因转录的相对水平。其实验操作参见第一章的第九节。（3
转基因小鼠模型的建立(SOP)3
（2）受体母鼠的准备输卵管转移的受体鼠应该为4-6周龄大小，体重在20-25克左右，严禁用低体重以及超重母鼠，若体重较低，其体能不足以维持妊娠，可能导致受精卵的重新吸收；若体重较重，麻醉剂被吸收入脂肪组织，降低麻醉效果，可能使手术困难，而且脂肪组织的存在意味着静脉的存在，所以手术时切掉脂肪组织可能导
转基因小鼠模型的建立(SOP)5
4．显微注射（1）导入DNA的制备：显微注射首先涉及导入DNA的制备，显微注射的转入基因通常为去除载体序列的线状DNA，转基因所用载体是真核表达载体，即含有在哺乳动物细胞内表达的真核启动子。所谓组织特异性的实现多是通过组织特异性启动子来实现组织特异性表达的。制备转基因小鼠，必须对待导入DNA进行分离