紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点

紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点?受哪些因素的影响和限制?答:优点:方法操作简便、迅速、不需要复杂和昂贵的设备,不消耗样品,测定后仍能回收利用,低浓度的盐和大多数缓冲溶液不干扰测定。缺点:准确度和灵敏度差一点。干扰物质多;对于测定那些与标准蛋白质中铬氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质,有一定的误差。若样品中含有嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质,会产生较大干扰。干扰因素:主要受溶剂的影响。......阅读全文

常用的蛋白质含量测定方法有哪些

 ①凯氏定氮法  原理:蛋白质平均含氮量为16%。当样品与浓硫酸共热,蛋白氮转化为铵盐,在强碱性条件下将氨蒸出,用加有指示剂的硼酸吸收,最后用标准酸滴定硼酸,通过标准酸的用量即可求出蛋白质中的含氮量和蛋白质含量。  ②双缩脲法  原理:尿素在180℃下脱氨生成双缩脲,在碱性溶液中双缩脲可与Cu2+形

蛋白质的测定方法之紫外分光光度法

1 原理:pro及其降解产物的芳香环基 ,在紫外区内对某一波长具有一定的光选择吸收,在280nm下,光吸收与pro浓度(3~8mg/ml)成直线关系,因此,通过测定pro溶液的吸光度,并参照事先用K氏定氮法分析的标准样品,从标准曲线查出蛋白质的含量。2   试剂:(1) 0.1mol/l柠檬酸水溶液

紫外吸收法测定蛋白质含量

(一)原 理蛋白质分子中含有酪氨酸、色氨酸及苯丙氨酸等残基,它们的结构中具有共轭双键,对紫外光有吸收作用,其最大值在280nm波长处。在此波长附近,蛋白质溶液的光吸收值与其含量(范围是0.1~1.0mg/ml)成正比,因此,280nm的吸光度可用作蛋白质的定量测定。若将已知不同浓度的蛋白质标准溶液在

蛋白质含量测定法紫外可见分光光度法

  本法系依据蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸,其在280nm波长处具最大吸光度,在一定范围内其吸光度大小与蛋白质浓度呈正比。  本法操作简便快速,适用于纯化蛋白质的检测,一般供试品浓度为0.2~2mg/ml。本法准确度较差,干扰物质多。测定法(2)适用于供试品溶液中存在核酸时

叶绿素含量测定仪有何作用?

    叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,通过叶绿素含量测定仪检测叶绿素含量的变化,我们可以得知植物的营养情况,然后根据植物是否缺少营养进行调整。因此,叶绿素含量测定仪的诞生是具有重要意义的,其在农作物长势检测和估产、营养诊断与施肥等应用中有着非常重要的意义。    叶绿素含量测定仪在农业生产中起

常用来测定蛋白质含量的方法有哪些

1、凯氏定氮法凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是

常用来测定蛋白质含量的方法有哪些

  ①凯氏定氮法  原理:蛋白质平均含氮量为16%。当样品与浓硫酸共热,蛋白氮转化为铵盐,在强碱性条件下将氨蒸出,用加有指示剂的硼酸吸收,最后用标准酸滴定硼酸,通过标准酸的用量即可求出蛋白质中的含氮量和蛋白质含量。  ②双缩脲法  原理:尿素在180℃下脱氨生成双缩脲,在碱性溶液中双缩脲可与Cu2+

常用来测定蛋白质含量的方法有哪些

1、凯氏定氮法凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是

紫外分光光度法测定蛋白质

  1 原理:  pro及其降解产物的芳香环基 ,在紫外区内对某一波长具有一定的光选择吸收,在280nm下,光吸收与pro浓度(3~8mg/ml)成直线关系,因此,通过测定pro溶液的吸光度,并参照事先用K氏定氮法分析的标准样品,从标准曲线查出蛋白质的含量。  2 试剂:  (1) 0.1mol/l

分光光度法和紫外分光光度法有何区别

分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的光吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。 1. 基本原理 单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,即朗伯 - 比尔定律,这是吸收光谱法定量的理论依据,其关系式如式 3-1 : A = E

紫外吸收法与双缩脲法测蛋白质含量相比,有什么优缺点

1.蛋白质测定的Folin-酚比色法(即Lowry法)的定量范围为5~100μg蛋白质,灵敏度高;但操作要费较长时间,且Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用;不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度也稍有不同.紫外吸收法测

紫外吸收法与双缩脲法测蛋白质含量相比,有什么优缺点

1.蛋白质测定的Folin-酚比色法(即Lowry法)的定量范围为5~100μg蛋白质,灵敏度高;但操作要费较长时间,且Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用;不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度也稍有不同.紫外吸收法测

紫外分光光度法测定氧氟沙星胶囊的含量

紫外分光光度法测定氧氟沙星胶囊的含量 近期文献报道采用紫外分光光度法测定氧氟沙星原料的含量,现对采用紫外分光光度法测定氧氟沙星胶囊的含量进行了研究,确定了较好的分析条件,方法简便、快速、无干扰,结果准确。 1 仪器与材料 1.1 材料:药品原材料(南京益同药品有限公司,含量99.95%):批号:

紫外分光光度法测定胡椒碱的含量

摘要:本文研究了胡椒碱的乙醇溶液在紫外光谱区有一个灵敏的吸收峰,其最大吸收波长为342mm,据此建立了一个简单、快速、选择性好的测定胡椒中胡椒碱含量的新的紫外分析法。本法胡椒碱浓度在0~70μg/ml范围内服从比耳定律。       目前,市售胡椒粉掺杂使假者较多,其测定方法多为定性方

紫外分光光度法测定氧氟沙星胶囊的含量

采用紫外分光光度法测定氧氟沙星原料的含量,现对采用紫外分光光度法测定氧氟沙星胶囊的含量进行了研究,确定了较好的分析条件,方法简便、快速、无干扰,结果准确。  1 仪器与材料 1.1 材料:药品原材料(南京益同药品有限公司,含量99.95%):批号:040112。试剂:盐酸(分析纯)O.

紫外分光光度法对阿司匹林的含量测定

紫外分光光度法对阿司匹林的含量测定   仪器类型有:单波长单光束直读式分光光度计,单波长双光束自动记录式分光光度计和双波长双光束分光光度计。   应用范围包括:①定量分析,广泛用于各种物料中微量、超微量和常量的无机和有机物质的测定。②定性和结构分析,紫外吸收光谱还可用于推断空间阻碍效应、氢键的强度、

紫外分光光度法测定垃圾渗滤液中DEHP含量的方法

 摘要[目的]建立紫外分光光度法测定垃圾渗滤液中DEHP含量的方法。[方法]以三氯甲烷为溶剂萃取50ml垃圾渗滤液样品中的DEHP,然后利用紫外分光光度法进行测定。[结果]DEHP浓度的线性范围为30~100mg/L,其标准曲线方程y=0.003x+0.0151,相关系数r2=0.9988,加标回收

紫外分光光度法优缺点

优点:有一定专属性,应用范围广,使用频率高。缺点:准确度不高。在实际测量中,采用在另一等同的吸收池中放入溶剂与被分析溶液的透射强度进行比较,即:A = lg( I溶剂/ I溶液) ≈ lg ( I 0/ I )吸光度具有加和性:A总λ= A1λ+ A2λ+ …Anλ比尔定律应用的局限性:只适用于稀溶

紫外分光光度法优缺点

优点:有一定专属性,应用范围广,使用频率高。缺点:准确度不高。在实际测量中,采用在另一等同的吸收池中放入溶剂与被分析溶液的透射强度进行比较,即:A = lg( I溶剂/ I溶液) ≈ lg ( I 0/ I )吸光度具有加和性:A总λ= A1λ+ A2λ+ …Anλ比尔定律应用的局限性:只适用于稀溶

紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同

1、测量的范围不同: (1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。2、所用的灯不同: (1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常采用钨灯或卤钨灯。3、原理不同: (1)紫外分光光

紫外分光光度法测定白酒中的DEHP含量

本文建立了紫外分光光度法测定白酒中DEHP含量的方法。方法:利用邻苯二甲酸二己酯(DEHP)的热稳定性进行加热去除白酒中的干扰物质,以三氯甲烷为溶剂定容,采用紫外分光光度法进行定量检测,测定波长为237nm,狭缝宽度为5mm。方法的线性范围为0.04~2.00µg/ml,标准曲线回归方程为y=

紫外分光光度法测定维生素A的含量

1.原理维生素A的异丙醇溶液在325 nm波长下有最大吸收峰,其吸光度与维生素A的含量成正比。本法的灵敏度较比色法高,可测定维生素A含量低于5µg/g的样品。主要缺点是在维生素A最大吸收波长325 nm附近许多其他化合物也有吸收,干扰测定,故本法适用于透明鱼油,维生素A的浓缩物等纯度较高的样品。对于

紫外分光光度法测定维生素A含量

维生素A(vitaminA)又称视黄醇(其醛衍生物视黄醛)是一个具有酯环的不饱和一元醇,包括维生素A 1、A2 两种。维生素A1 和A2 结构相似)1.原理  维生素A的异丙醇溶液在325nm波长下有最大吸收峰,吸光度与维生素A的含量成正比。2.试剂(1)维生素A标准溶液:同比色法试剂      

蛋白质含量的测定方法(一)

实验原理:蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法、双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法,即考马斯亮蓝法(Bradford法)。其中Bradford法

蛋白质含量的测定方法(二)

(二)试剂与器材1.试剂(1)试剂甲:(A) 10克Na2CO3,2克NaOH和0.25克酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸馏水中。(B) 0.5克硫酸铜(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸馏水中,每次使用前,将50份(A)与1份(B)混合,即为试剂甲。(2)试剂乙

蛋白质含量的测定方法(三)

(二)Bradford法的优缺点1、Bradford法的突出优点是:(1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1g。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。(2)测定快速、简便,

何谓喷雾干燥?有何优缺点

喷雾干燥是系统化技术应用于物料干燥的一种方法。于干燥室中将稀料经雾化后,在与热空气的接触中,水分迅速汽化,即得到干燥产品。该法能直接使溶液、乳浊液干燥成粉状或颗粒状制品,可省去蒸发、粉碎等工序。优点1.干燥过程非常迅速。2.可直接干燥成粉末。3.易改变干燥条件,调整产品质量标准。4由于瞬间蒸发,设备

琼脂糖电泳有何优缺点

琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。  琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段,其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低,但它制备容易,分离范围广,尤其适于分离大片段DNA。普通琼脂糖凝胶分离DNA

平板菌落计数法有何优缺点

一、平板划线分离法 由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落。 二、稀释倒平板法 先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀

怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量

1、280nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收,在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克),但核酸在260 nm处的吸收更强,其吸收高峰在260