蛋白质含量测定法紫外可见分光光度法

本法系依据蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸,其在280nm波长处具最大吸光度,在一定范围内其吸光度大小与蛋白质浓度呈正比。 本法操作简便快速,适用于纯化蛋白质的检测,一般供试品浓度为0.2~2mg/ml。本法准确度较差,干扰物质多。测定法(2)适用于供试品溶液中存在核酸时的蛋白质测定。 对照品溶液与供试品溶液的制备 照各品种项下规定的方法制备。 测定法 (1)取供试品溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在280nm的波长处测定吸光度,以吸收系数法或对照品比较法计算供试品中蛋白质的含量。 (2)取供试品溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在280nm与260nm的波长处测定吸光度,按下式计算供试品中蛋白质的含量。 蛋白质浓度(mg/ml)=1.45×A280-0.74×A260......阅读全文

蛋白质含量测定法紫外可见分光光度法

  本法系依据蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸,其在280nm波长处具最大吸光度,在一定范围内其吸光度大小与蛋白质浓度呈正比。  本法操作简便快速,适用于纯化蛋白质的检测,一般供试品浓度为0.2~2mg/ml。本法准确度较差,干扰物质多。测定法(2)适用于供试品溶液中存在核酸时

紫外可见分光光度法测定法

  测定时,除另有规定外,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用1cm的石英吸收池,在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个点的吸收度,或由仪器在规定波长附近自动扫描测定,以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确,除另有规定外,吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内,并以吸光度最大的波长作为

紫外分光光度法测定蛋白质含量

考马斯亮兰G250与蛋白质结合,在0-1000ug/ml范围内,于波长595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比,可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250与蛋白质结合迅速,结合产物在室温下10分钟内较为稳定,是一种较好的蛋白质定量测定方法。 1. 实验部分 1.1 仪器与试剂: Labte

紫外分光光度法测定蛋白质含量

一、实验目的   1、 学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理;   2、 掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术;    3、 掌握UV-1700PC紫外-可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。    二、实验原理   紫外-可见吸收光谱法又称紫外-可见分光光度法,它是研究分子吸收1

紫外分光光度法测定DNA蛋白质含量

一、实验目的   学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理; 掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术; 掌握UV-1700紫外可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。  二、实验原理        紫外可见吸收光谱法又称紫外可见分光光度法,它是研究分子吸收190nm~750nm波长范

紫外分光光度法测定DNA蛋白质含量

一、实验目的   学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理; 掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术; 掌握UV-1700紫外可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。  二、实验原理    紫外可见吸收光谱法又称紫外可见分光光度法,它是研究分子吸收190nm~750nm波长范围内的吸

紫外可见分光光度法检测阿司匹林中水杨酸含量

紫外可见分光光度法检测阿司匹林中水杨酸和乙酰水杨酸的含量  阿司匹林是解热镇痛药,主要成分为乙酰水杨酸,摩尔质量180.16g/mol。阿司匹林少量水解成水杨酸,因而在阿司匹林样品中混有少量水杨酸。  测定阿司匹林中水杨酸和乙酰水杨酸的含量时采用双波长法和校正曲线法。水杨酸干扰阿司匹林的吸光度测 定

紫外分光光度法测定蛋白质含量实验设计

一、实验目的   1.学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理。   2.掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术。    3.掌握TU-1901紫外-可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理    1.紫外-可见分光光度法,是以溶液中物质的分子或离子对紫外和可见光谱区辐射能的

怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量

1、280nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收,在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克),但核酸在260 nm处的吸收更强,其吸收高峰在260

怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量

1、280nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收,在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克),但核酸在260 nm处的吸收更强,其吸收高峰在260

紫外可见分光光度法简介

  紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长

紫外可见分光光度法检测蔬果中维生素C含量

  利用紫外分光光度法测定维生素C的含量是基于维生素c在紫外光区有特征吸收,但是因为维生素C结构中具有不饱和键,具有还原性,不易稳定存在,直接测定误差较大。所以在利用紫外分光光度法测定时,维生素标准溶液和待测样的配制条件非常重要。曾国富,黄玉英研究发现,维生索C在CTAB-C5H11OH-H2O微乳

紫外可见分光光度法测定维生素B12含量

维生素[U1] B12是含钴的有机药物,为深红色结晶,又称为红色维生素B12或氰钴胺,是唯一含有主要矿物质的维生素。测定维生素B12片剂含量的传统方法是运用紫外可见分光光度计,以吸光系数法为测定含量依据,但是该方法对仪器精密度要求较高。标准曲线法是紫外可见分光光度法中最经典的方法,若认定一台仪器,固

紫外可见分光光度法测定苯酚

一、实验目的1、了解紫外可见分光光度计的结构、性能及使用方法2、熟悉定性、定量测定的方法二、实验原理紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry),又称紫外吸收光谱法( Ultraviolet Moleculor Absorption Spectrophtometry),

紫外可见分光光度法测定桂蒲肾清片中胆酸的含量

紫外-可见分光光度法测定桂蒲肾清片中胆酸的含量摘要:目的:建立桂蒲肾清片中胆酸的含量测定方法。方法:采用紫外分光光度法,以60%冰醋酸溶液为溶剂,对样品的提取检测波长为605nm。结果:桂蒲肾清片中胆酸的含量限度为不低于2.0mg/片,胆酸在6.93~41.60μg 范围内线性关系良好,r=0.99

紫外可见分光光度法检测维生素类药物及其制剂含量

 维生素B1分子中有共轭双键,在紫外-可见区有吸收。pH=2时,维生素B1在246nm处有最大吸收,吸收系数为421。《中国药典》2010年版采用紫外-可见分光光度法测定维生素B1片及注射液的含量。维生素A分子中有共多烯侧链,在325~328nm的波长范围内有最大吸收。1.维生素B1片的含量测定方法

紫外一可见分光光度法测定酰胺类药物及其制剂的含量

对乙酰氮基酚结构中含有苯环,其0.4%氢氧化钠溶液于257nm波长处有最大吸收,可用于原料及其制剂的含量测定。药典采用吸收系数法,测定对乙酰氨基酚原料、片剂、咀嚼片、栓剂、胶囊剂及颗粒剂的含量。1.对乙酰氨基酚的含量测定 取本品约40mg,精密称定,置250ml量瓶中,加0.4%氢氧化钠溶液50ml

紫外可见分光光度法测定水中总氮含量实验的结果讨论

  总氮,简称为TN,水中的总氮含量是衡量水质的重要指标之一。总氮的定义是水中各种形态无机和有机氮的总量。包括NO3-、NO2-和NH4+等无机氮和蛋白质、氨基酸和有机胺等有机氮,以每升水含氮毫克数计算。常被用来表示水体受营养物质污染的程度。  水中的总氮含量是衡量水质的重要指标之一。其测定有助于评

紫外分光光度法测含量

    【实验目的】    1.学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理。    2.掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术。    3.掌握TU-1901紫外-可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。    【实验原理】    紫外-可见吸收光谱法又称紫外-可见分光光度法,它是研究分子吸

紫外可见分光光度法测定汉麻果胶中总皂苷的含量

紫外-可见分光光度法测定汉麻果胶中总皂苷的含量摘要:目的建立汉麻果胶中总皂苷含量的测定方法。方法以蕨麻苷Ⅱ号为对照品,5%香草隆冰醋酸和高氯酸的混合溶液为显色剂,采用紫外分光光度法在500衄处测定汉麻果胶总皂苷的含量。结果蕨麻苷Ⅱ号检测浓度在70~177ug与吸光度呈良好的线性关系(r=0.9993

紫外可见分光光度法测定人血白蛋白中的色氨酸含量

  本法系用紫外-可见分光光度法(通则0401吸收系数法)测定人血白蛋白供试品中的N-乙酰-DL-色氨酸含量。  测定法  用0.85%~0.90%氯化钠溶液将供试品蛋白质稀释至5%,即为供试品溶液。量取供试品溶液0.1ml,分别加入0.85%~0.90%氯化钠溶液0.3ml和0.3mol/L高氯酸

紫外可见分光光度法测定吩噻嗪类药物及其制剂的含量

 吩噻嗪类药物在紫外区有吸收,可用紫外-可见分光光度法测定原料及其制剂的含量。如,盐酸氯丙嗪盐酸溶液在254nm的波长处有最大吸收,在306nm的波长处有次最大吸收,但其原料及其制剂的含量测定均选用254nm的波长。奋乃静溶液在255nm的波长处有最大吸收。通过测定最大吸收波长处的吸光度,再结合吸收

紫外可见分光光度法测定喹诺酮类药物及其制剂的含量

本类药物分子结构中具有苯环或杂环共轭结构,在紫外光区有特征吸收,可用于定量。本法用于制剂的测定时,注意消除辅料的干扰。药典采用该法测定吡哌酸片剂、胶囊及诺氟沙星乳膏的含量。吡哌酸片的测定方法:取本品10片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于C14H17N5O3·3H2O  0.2g),置500m

紫外可见分光光度法测定水中总氮含量误差是怎么回事?

   在一些污水厂的化验报告数据中,有时候会发现同一个水样的总氮会低于氨氮。这种情况往往让管理者感到迷惑,这是什么情况?氨氮>总氮?怎么可能?一定是化验室的问题,但是化验室重复做,总还是会不断地出现这个问题?那么到底是怎么样的情况,造成了这种结果呢?今天我们就来聊聊化验室里氨氮高于总氮的情况。  

蛋白质的定量测定——紫外(UV)吸收测定法

实验原理蛋白质分子中所含酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质在280nm波长处有最大吸收值。在一定浓度范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量成正比关系,可用作定量测定。紫外线吸收法测定蛋白质含量的优点是迅速,简便,不消耗样品,低浓度盐类不干扰测定。因此,广泛应用在柱层析分离中蛋白

蛋白质含量测定法双缩脲法

  本法系依据蛋白质分子中含有的两个以上肽键在碱性溶液中与Cu2+形成紫红色络合物,在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。  本法快速、灵敏度低,测定范围通常可达1~10mg。本法干扰测定的物质主要有硫酸铵、三羟甲基氨基甲烷缓冲液

关于紫外可见分光光度法的简介

  紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长

使用紫外可见分光光度法鉴别布洛芬

(一)检验药品(1)检验药品的名称:布洛芬原料药。(2)检验药品的来源:市场购买或送检样品。(3)检验药品的规格、批号、包装及数量:根据药品包装确定,并记录有关情况,检验合格后方可使用。(二)质量标准(1)检验依据:《中国药典》(2010版)二部120页“布洛芬”:本品为a-甲基-4-(2-甲基丙基

紫外吸收法测定蛋白质含量

(一)原 理蛋白质分子中含有酪氨酸、色氨酸及苯丙氨酸等残基,它们的结构中具有共轭双键,对紫外光有吸收作用,其最大值在280nm波长处。在此波长附近,蛋白质溶液的光吸收值与其含量(范围是0.1~1.0mg/ml)成正比,因此,280nm的吸光度可用作蛋白质的定量测定。若将已知不同浓度的蛋白质标准溶液在

紫外吸收法测蛋白质含量

蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm 处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的