天津工生所利用体外多酶系统实现纤维素的完全转化
体外多酶系统是模仿体内代谢途径，在体外组合一系列酶及辅酶构建复杂的生化反应网络，催化底物生成产物的新型生物制造平台。该体外生物合成途径可操作性强，产品得率高，反应速度快，已经被成功应用到利用淀粉生产氢气、生物电、稀少糖等领域。纤维素是地球上最丰富的可再生资源，被认为是生产生物燃料和生物基化学品的重要原料。纤维素每年的产量是淀粉的40倍以上，因此利用体外多酶系统将纤维素高效转化为高附加值的产品将成为非常重要的研究方向。 近日，中国科学院天津工业生物技术研究所体外合成生物中心研究员游淳带领的研究团队，设计了利用体外多酶系统将纤维素生物质进行化学计量转化的酶法磷酸解途径，用于制造生物化学品或生物燃料。该途径利用三个级联磷酸化酶（纤维多糖磷酸化酶（cellodextrin phosphorylase, CDP）、纤维二糖磷酸化酶（cellobiose phosphorylase, CBP）和多聚磷酸依赖型葡萄糖激酶（polypho......阅读全文
我国科学家利用体外多酶系统实现纤维素完全转化
近日，中国科学院天津工业生物技术研究所游淳研究员团队在ACS catalysis杂志（IF=11.384）在线发表了题为“Stoichiometric Conversion of Cellulosic Biomass by in Vitro Synthetic Enzymatic Biosyst
天津工生所利用体外多酶系统实现纤维素的完全转化
体外多酶系统是模仿体内代谢途径，在体外组合一系列酶及辅酶构建复杂的生化反应网络，催化底物生成产物的新型生物制造平台。该体外生物合成途径可操作性强，产品得率高，反应速度快，已经被成功应用到利用淀粉生产氢气、生物电、稀少糖等领域。纤维素是地球上最丰富的可再生资源，被认为是生产生物燃料和生物基化学品的
科学家发现催化纤维素生产生物燃料的体外多酶系统
纤维素是地球上最丰富的可再生资源，可以被用来生产生物燃料和生物基化学品。相对于传统微生物发酵法利用纤维素进行生物制造，体外多酶系统可操作性强、产品得率高、反应速度快，已经被成功应用到催化纤维素完全转化生产肌醇中。但在利用纤维素产电或产氢的体外多酶途径中，由于反应途径活化能高、关键酶比酶活低、下游
顶体酶系统的定义
顶体中含有顶体酶系统，它是一个复合酶系 ，在顶体反应过程中被释放出来。
关于多聚合纤维素的基本介绍
大连医科大学第一临床学院与中国科学院大连化学物理研究所（简称大连化物所）,历经多年合作完成的“多聚合纤维素预防组织粘连的基础与临床应用研究”研制成功一种可用来预防创作与手术后组织粘连的高科技新材料--多聚合纤维素,并在基础实验和临床应用研究中证明它具有良好的粘连效果。 如何使外科手术既能达到治
抗氧化酶系统的概述
和化学抗氧化剂的作用一样，有多种抗氧化酶相互作用所构成的网络能保护细胞免受氧化应激的损害。比如氧化磷酸化过程释放出的过氧化物首先被转变成过氧化氢，接着被还原成水。在这个解毒过程是多种酶协同作用的结果，第一步超氧化物转变成过氧化氢的过程是在超氧化物歧化酶的催化下完成的，接着由多个不同的过氧化物酶来
超滤法检测体外多胺结合蛋白的分析
实验概要本试验描述了使用大肠杆菌或酿酒酵母产生的鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白和放射性多胺来衡量多胺直接结合鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白的效率。实验原理多胺是所有活细胞内的脂质阳离子小分子化合物，以腐胺、精脒和精胺为主要代表。已揭示在某些重要的生物过程中，例如DNA、RNA和蛋白质的合成中，多胺可能具有一定的作用。但
顶体酶系统的组成及功能
顶体酶系统的组成及功能酶功能透明质酸酶溶解卵丘细胞间的透明质酸放射冠分散酶使放射冠的细胞松解顶体素溶解卵透明带芳基硫酸酯酶溶解卵黄膜酯酶基本代谢所需唾液酸苷酶基本代谢所需
顶体酶系统的组成及功能
顶体酶系统的组成及功能酶功能透明质酸酶溶解卵丘细胞间的透明质酸放射冠分散酶使放射冠的细胞松解顶体素溶解卵透明带芳基硫酸酯酶溶解卵黄膜酯酶基本代谢所需唾液酸苷酶基本代谢所需顶体反应的调节
关于抗氧化酶系统的基本介绍
和化学抗氧化剂的作用一样，有多种抗氧化酶相互作用所构成的网络能保护细胞免受氧化应激的损害。比如氧化磷酸化过程释放出的过氧化物首先被转变成过氧化氢，接着被还原成水。在这个解毒过程是多种酶协同作用的结果，第一步超氧化物转变成过氧化氢的过程是在超氧化物歧化酶的催化下完成的，接着由多个不同的过氧化物酶来
帕金森体外模型帕金森体外模型
体外培养的中脑多巴胺能神经元MPTP损伤模型l实验操作：实验采用胚胎龄14一16天的大鼠，剖子宫取胎，取胎鼠中脑腹侧区。可将多个胚胎来源的组织收集在一起，置Fl2培养基（Gibco）至35mm的培养皿中，以细剪刀剪碎。将2ml含0.125％的胰酶的F12加入到组织中，该混合物于37oC孵育10分钟后
T7RNA聚合酶系统基因表达实验
两种重组痘苗病毒共感染细胞 单病毒感染OST7-1细胞 利用VOTE系统 实验方法原理 含有 pT7 控制的外源基因（「痘苗病毒系统基
T7RNA聚合酶系统基因表达实验
实验方法原理 含有 pT7 控制的外源基因（「痘苗病毒系统基因表达实验」中「重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染」）的重组质粒，通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此病毒储液与 vTF7-3 共同感染贴壁或悬浮细胞，在培养过程中，外源基因被高效的 T7 RNA
体外诊断试剂研发过程中的多指标正交实验
一、正交试验 通过筛选不同的工艺方案、反应体系条件，使得产品能够满足有关性能要求、提高效率和物料的利用率等等，包括后期工艺的优化革新需要改进相应的工艺条件，由于客观影响因素较多，往往需要通过试验来增加我们对工艺的客观认知并摸清其中的影响规律。 科学地安排试验可以减少试验次数，在进行较少次数试验的基础
T7RNA聚合酶系统基因表达实验（一）
本节介绍依赖于在哺乳动物细胞质合成噬菌体T7 RNA聚合酶的瞬时细胞质表达系统。首先，将感兴趣的基因插入质粒中，使其位于T7 RNA聚合酶启动子（PT7）的控制下。在培养过程中，外源基因被高效的 T7 RNA聚合酶转录。这种转染方案适用于分析的目的，因为不需要构建新的重组病毒，所以比较简单。对于大规
T7RNA聚合酶系统基因表达实验（二）
单病毒感染OST7-1细胞实验方法原理OST7-1 细胞来源于鼠 L929 细胞，能在细胞质中持续表达噬菌体 T7 RNA 聚合酶，因此，应用此细胞系无需用 vTF7-3 感染细胞。实验材料贴壁培养的单层 OST7-1 细胞含有 pT7 控制的外源基因的重组病毒储液试剂、试剂盒完全 MEM-2.5
T7RNA聚合酶系统基因表达实验（三）
实验方法原理VOTE是最近发展的痘苗病毒/T7 RNA聚合酶混合表达系统，将外源基因克隆到质粒 pVOTE. 1或 pVOTE. 2 中，通过同源重组将其整合到痘苗病毒 vT7lacOI 基因组中，制备重组病毒储液。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）存在的条件下，用重组病毒感染细胞，外源基因
体外转录
· In Vitro RNA Transcription (Promega)For in vitro preparation single-stranded RNA probes or microgram quantities of defined RNA transcripts f
纤维素酶能否酶解纤维素
成熟棉纤维的主要成分是纤维素，纤维素是天然高分子化合物，由葡萄糖分子按β-1，4糖苷键连接而成。棉纤维中大分子的排列比较复杂，纤维内某些区域由于大分子的横向吸引使大分子排列比较整齐密实，缝隙孔洞较少，这称为结晶区。相反，另一些区域大分子排列比较紊乱，堆砌比较疏松，其中有较多的缝隙孔洞，密度较低，这称
一例体外受精－胚胎移植长方案降调节过程中多卵泡...
一例体外受精－胚胎移植长方案降调节过程中多卵泡发育病例报告1 病例报告 患者， 35 岁，继发不孕 4 年于 2016 年 1 月 25 日就诊于本 院。患者平素月经不规律，经期 3～4 天，周期 30～45 天，量少， 无痛经，既往体健。自然周期监测示双侧卵巢内各有窦卵泡 12～13 个。
体外受精一胚胎移植长方案降调节过程中多卵泡发育...
体外受精一胚胎移植长方案降调节过程中多卵泡发育病例报告1病例报告 患者，35岁，继发不孕4年于2016年1月25日就诊于本院。患者平素月经不规律，经期3—4天，周期30—45天，量 少，无痛经，既往体健。自然周期监测示双侧卵巢内各有窦卵 泡12—13个。男方梗阻性无精子症，拟行卵母细胞胞浆内
“一种特异性重组酶系统及其应用”获发明ZL
此前，中国科学院华南植物园研究员区永祥带领的团队建立了一套由重组酶介导的基因定点叠加系统以提高多基因分子育种的效率（Hou et al., 2014 Molecular plant 7: 1756 -1765）。在这套系统中，Cre重组酶扮演着重要的角色——在每一轮的基因叠加后，删除不再需要的外
siRNA体外转染——GenMuteTM－siRNA体外转染的优化
GenMuteTM siRNA转染试剂（Cat#SL100568）是市场上最有力的siRNA传递工具之一。最佳的siRNA浓度范围是1.0nM到10nM，过多的siRNA可能导致沉默效果差的“洪水效应”。我们实验室已经使用GenMuteTM转染试剂成功敲除了内源表达的生长因子。以24孔板为例，如下步
体外重组的定义
中文名称体外重组英文名称in vitro recombination定 义在体外对生物的遗传物质或人工合成的基因进行改造或重新组合形成新的核酸分子或新的基因的手段。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
体外重组（in－vitro－recombination）
载体与外源DNA分子体外重组时，如何选择优化连接条件以达到最高的重组率。因此有必要根据影响连接效率的因素综合考虑连接条件。影响连接效率的因素很多，如反应温度、插入片段和载体之间的摩尔比、DNA末端性质、反应时间、ATP浓度等。1. 反应温度是比较重要的影响因素。因为连接酶的最适反应温度为37℃，
体外培养的概念
中文名称体外培养英文名称in vitro culture定 义将活体结构成分（如活体组织、活体细胞、活体器官等）甚至活的个体从体内或其寄生体内取出，置于类似于体内生存环境的体外环境中生长和发育的方法。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
什么体外消化试验？
体外消化试验即是在实验室模拟某些动物体消化道环境，用待测酶制剂进行体外消化饲料等动物食品，并测定消化前后各营养成分(干物质、蛋白质、氨基酸、有机物质、淀粉及纤维素等)的消化率，以判定酶制剂的消化效果。进行体外消化试验有一定的难度，因为动物消化道内环境是一个动态变化的复杂环境，它受到很多因素(包括动物
体外转录合成单链RNA探针:体外转录法
体外转录法l 体外转录合成单链RNA探针1. 用适当的限制酶消化超螺旋质粒DNA制备5 pmol的线性模板DNA。取一小份消化的DNA（100ng）进行琼脂糖凝胶电泳分析。如有必要，再补加限制性酶进行温育，直至不再残存痕量的未消化DNA。2. 如必须用产生3’突出端
天津工生所在体外多酶合成维生素B12方面取得进展
维生素B12是自然界中天然合成的最复杂的小分子化合物之一，也是高等动植物生理活动必需的化合物。它以辅酶形式，在DNA合成、甲基化和线粒体代谢中发挥重要作用。目前，维生素B12的工业生产主要依赖微生物发酵来实现。然而，以微生物为底盘合成维生素B12的方法，存在菌种改造困难、发酵周期长、合成途径的瓶
体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
实验材料 质粒 DNA 模板 试剂、试剂盒 无核酸酶污染的水 [35S] 标记的甲硫氧酸 TN