实验室分光光度计的显色反应
分光光度计的显色反应一般要求影响显色反应因素选择性好、灵敏度高,生成的有色化合物性质稳定,显色剂与有色物颜色反差大,显色反应要易于控制显色剂用量、反应液的酸碱度(pH)、反应温度、显色反应时间干扰离子的影响。1、显色反应一般要求(1)选择性好:显色剂zui好只与一种被测组分起显色反应;(2)灵敏度高:灵敏度高有笪微量组分的测定;(3)有色化合物性质稳定:确保前后测定准确.(4)显色剂与有色物颜色反差大:两者zui大吸收波长之差应大于60nm;(5)显色反应要易于控制:结果的确保实验再现性.2、影响显色反应的主要因素(1)显色剂用量:通过实验来确定zui适用量;(2)反应液的酸碱度(pH):溶液酸碱度直接影响金属离子与显色剂存在形式以及有色化合物组成的稳定性.(3)反应温度:不同的显色反应需要不同的反应温度,一般显色反应可在室温下完成.(4)显色反应时间:显色反应的速度有快有慢.(5)干扰离子的影响:应采用适当方法消除其影响.......阅读全文
显色剂的作用
显色剂是一种将生化反应后产生的复合物显色以达到实验目的的一种试剂。一般又称底物液。
显色实验的“捷径”
可见光吸收光谱法是利用测量有色物质对某一单色光的吸收程度来进行测量的,但许多化合物本身是无色的,它对可见光不发生吸收或吸收很弱,因而必须预先通过适当的化学反应,使它转变成有色化合物,然后再进行可见光吸收光谱测定。 一、显色反应 在光度分析中,将试样中被测组分转变成有色化合物的反应
显色剂的种类
通用显色剂和特效显色剂。根据被检物的化学组成是否遭受破坏,显色剂分为破坏性显色剂和非破坏性显色剂。
为什么分光光度法要进行显色反应
分光光度计分几种,有可见光、原子吸收、红外、紫外、荧光等,你所指为可见光的。可见光分光光度法的特点就是能【对有色溶液的色泽深度进行对比】,从而测定待测物的含量,理论基础是“朗伯-比尔定律”。这样做其实就是把过去只靠眼睛进行的“比色”进行精度提升。
实验室检验检测工具显色培养基
显色培养基(Chromogenic/Fluorogenic Culture Media)是一类利用微生物自身代谢产生的酶与相应显色底物反应显色的原理来检测微生物的新型培养基。显色培养基(Chromogenic/Fluorogenic Culture Media)是一类利用微生物自身代谢产生的酶与相应
分光光度计测定物质浓度时为什么要加显色剂
分光光度计测定物质浓度时为什么要加显色剂 所有物质都能吸收特定波长的光,不管是有色还是无色的。分光光度计就是发射该物质特征波长光,从发射光和透射光的关系中找浓度,加入显色剂是让被测物跟显色剂反应显色,根据颜色深浅来... 所有物质都能吸收特定波长的光,不管是有色还是无色的。分光光度计就是发射该物
凝胶电泳的显色
观察凝胶中DNA的最简便、最常用的方法就是利用荧光染料溴化乙锭进行染色。溴化乙锭是一种具有扁平分子的核酸染料,在高离子强度下,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。在DNA溴化乙锭复合物中,DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而结合的染料分子本身吸收302nm和399nm的光辐射,因此吸
TLC的通用显色方法
TLC的通用显色方法理想的显色希望灵敏度高,斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好,斑点的大小及颜色的深度与物质的量成正比,在样品组成并不完全已知的情况下,通用显色方法显得尤为重要,通用显色方法主要有:1)、紫外照射法:方便、不破坏样品;2)、碘蒸气法:通用性强,与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用;
显色培养基
显色培养基是一类利用微生物自身代谢产生的酶与相应显色底物反应显色的原理来检测微生物的新型培养基。这些相应的显示底物是由产色基团和微生物部分可代谢物质组成,在特异性酶的作用下,游离出产色基团显示一定颜色,直接观察菌落颜色即可对菌种作出鉴定。优点:将菌株分离,鉴定结合在一起,无需对菌株进行分离纯化和进一
TLC分析与显色
分析与显色由于被分离出的化学品可能是无色的,因此下列几种方法可用于让没有可见光吸收的斑点显色:通常在可使用少量的荧光化合物,如锰-活化的锌硅酸盐加入到吸附相当中,使得吸附物在黑光(UV254)下可以显色。固定相在荧光下本身显绿色,因此化合物的斑点可以掩盖掉荧光下的绿色从而达到显色目的。碘蒸气是对于大
如何优化淀粉碘化镉法检测微生物絮凝剂的显色反应?
以下是一些优化淀粉 - 碘化镉法检测微生物絮凝剂显色反应的方法:控制反应条件进行温度优化实验,确定最佳的反应温度,并在检测过程中使用恒温设备保持温度恒定。通过预实验确定合适的反应时间,确保显色充分且稳定。精确调节反应溶液的 pH 值,使用缓冲溶液维持稳定的酸碱度。提高试剂质量选择高纯度的淀粉、碘化镉
糖的显色剂有哪些
苯胺-邻苯二甲酸盐试剂茴香醛-硫酸试剂过碘酸-联苯胺试剂三苯四氮唑盐试剂1,3-二羟基萘酚-硫酸试剂
Western-Blot显色的方法介绍
Western Blot显色的方法主要有以下几种:i. 放射自显影ii. 底物化学发光ECLiii. 底物荧光ECFiv. 底物DAB呈色现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色,体同水平和实验条件的是用第一种方法,发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行,操作也比较简单,原理
吖啶橙的显色过程
在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由
吖啶橙的显色过程
在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由
糖的显色剂有哪些
苯胺-邻苯二甲酸盐试剂茴香醛-硫酸试剂过碘酸-联苯胺试剂三苯四氮唑盐试剂1,3-二羟基萘酚-硫酸试剂
吖啶橙的显色过程
在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由
常用的显色剂有哪些
显色试剂大体上有两个分类,第一类是通用的显色剂,主要用来检查一般常见的有机化合物。第二类是按照化合物的详细类别或者比较特殊的功能,量身定做的专属性显色剂。经过全面的分析和统计,显色试剂类别多种多样,数量繁多,现只就通用显色剂的具体类目来简单介绍下。一般的通用显色剂:第一个就是硫酸的溶液了,硫酸与水、
凝胶电泳的显色效果
观察凝胶中DNA的最简便、最常用的方法就是利用荧光染料溴化乙锭进行染色。溴化乙锭是一种具有扁平分子的核酸染料,在高离子强度下,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。在DNA溴化乙锭复合物中,DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而结合的染料分子本身吸收302nm和399nm的光辐射,因此吸
淀粉碘化镉法检测微生物絮凝剂的显色反应原理是什么?
淀粉 - 碘化镉法检测微生物絮凝剂的显色反应原理是:微生物絮凝剂中的某些官能团(通常是酰胺基)首先被溴水氧化,过量的溴用甲酸钠还原。氧化产物能将碘离子(I⁻)氧化为碘单质(I₂),生成的碘单质与淀粉和碘化镉形成蓝色的络合物。通过分光光度计测定该络合物在特定波长下的吸光度,从而实现对微生物絮凝剂的定量
DAB显色时间如何把握
2. �0�2DAB显色时间很短(如几秒或几十秒)就出现很深的棕褐色,这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长,需要下调抗体浓度或缩短你的抗体孵育时间。 3. �0�2此外,若很短时间就出现背景很深,还有可能你前面的封闭非特异性蛋白不全,需要延长封闭时间。
显色培养基原理
显色培养检测基本原理:利用不同种属细菌代谢所产生的酶的特异性,在培养基中加入相应的特异性酶底物和抑制剂,当具有某特异酶的细菌与酶底物作用时,使显色基团游离出来附着于菌落上,形成颜色独特的菌落。根据菌落的颜色直接对菌属(种)作出鉴定。 快速、简便、节省时间-大多数显色培养基只需在样品增菌后,分离
DAB显色时间如何把握?
(1)DAB显色时间不是固定的,主要由显微镜下控制显色时间,到出现浅棕色本底时即可冲洗; (2)DAB显色时间很短(如几秒或几十秒)就出现很深的棕褐色,这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长,需要下调抗体浓度或缩短你的抗体孵育时间; (3)此外,若很短时间就出现背景很深,
显示细胞色素的显色方法介绍
1. 金属沉淀法:利用金属化合物在反应过程中生成有色沉淀,借以辨认所检查的物质或酶活性。如磷酸酶分解磷酸酯底物后,反应产物最终生成CoS 或PbS有色沉淀,而显示出酶活性。2. 偶氮偶联法:酚类化合物与偶氮染料结合后可以形成耐晒染料。3. Schiff 反应:细胞中的醛基可使Schiff 试剂中的无
根际pH的显色测定实验
实验方法原理本方法是利用pH指示剂在不同酸碱度条件下变色的特点,测试根际pH的变化。将pH指示剂加入到具有一定营养条件下的琼脂溶胶中,组成琼脂-指示剂混合液。植物根系可直接利用其作为介质生长。由于根系的吸收和溢泌等生理活动,使根际pH不同于原介质,由此产生不同的显色反应。对照标准pH变色范围,可以确
根际pH的显色测定实验
实验方法原理 本方法是利用pH指示剂在不同酸碱度条件下变色的特点,测试根际pH的变化。将pH指示剂加入到具有一定营养条件下的琼脂溶胶中,组成琼脂-指示剂混合液。植物根系可直接利用其作为介质生长。由于根系的吸收和溢泌等生理活动,使根际pH不同于原介质,由此产生不同的显色反应。对照标准pH变色范围,可以
根际pH的显色测定实验
实验方法原理本方法是利用pH指示剂在不同酸碱度条件下变色的特点,测试根际pH的变化。将pH指示剂加入到具有一定营养条件下的琼脂溶胶中,组成琼脂-指示剂混合液。植物根系可直接利用其作为介质生长。由于根系的吸收和溢泌等生理活动,使根际pH不同于原介质,由此产生不同的显色反应。对照标准pH变色范围,可以确
淀粉碘化镉法检测微生物絮凝剂的显色反应有何优缺点?
淀粉 - 碘化镉法检测微生物絮凝剂显色反应的优点:显色明显:形成的蓝色络合物颜色较为鲜明,易于观察和判断。相对灵敏:对于一定浓度范围内的微生物絮凝剂能够产生较明显的信号响应。缺点:易受干扰:容易受到样品中其他物质的干扰,导致结果不准确。操作要求高:对反应条件(如温度、时间、pH 等)的控制要求较为严
分光光度计的应用
分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。蛋白质的直接定量(UV法):比色法蛋白质定量,蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成
薄层色谱的TLC的通用显色方法
理想的显色希望灵敏度高、斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好、斑点的大小及颜色的深度与物质的量成正比。在样品组成并不完全已知的情况下,通用显色方法显得成尤为重要。通用显色法主要有: (1)、紫外照射法:方便,不破坏样品; (2)、碘蒸气法:通用性强,与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用