糖基化与免疫

蛋白糖基化是真核生物常见的蛋白质翻译后修饰过程,合成后的或正在合成的蛋白质在糖基转移酶的作用下,将活化的单糖加到肽链上。根据糖与肽链中氨基酸的连接方式不同,可将糖基化修饰分为三种形式:N-糖苷(N-glycan)、O-糖苷(O-gly-can)、糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinos-itol,GPI)。蛋白质经糖基化修饰后产生数千种具有独特生物活性糖蛋白,参与到机体生命活动的各个领域中。其中,蛋白糖基化与机体的免疫反应息息相关,如人类的ABO(H)血型系统就是由于人红细胞表面H抗原的糖基化方式不同而形成的,H抗原上添加GalNAc残基则转化成A抗原,添加半乳糖残基则转化成B抗原,而未经修饰的H抗原就是O型血红细胞表面抗原。几乎所有参与天然免疫和应答免疫中的免疫分子,如免疫球蛋白、细胞因子、补体、黏附分子和主要组织相容性复合物分子均属于糖蛋白。蛋白糖基化影响免疫分子的结构和功能,从而影响机体对抗原......阅读全文

糖基化与免疫

   蛋白糖基化是真核生物常见的蛋白质翻译后修饰过程,合成后的或正在合成的蛋白质在糖基转移酶的作用下,将活化的单糖加到肽链上。根据糖与肽链中氨基酸的连接方式不同,可将糖基化修饰分为三种形式:N-糖苷(N-glycan)、O-糖苷(O-gly-can)、糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphat

糖蛋白糖基化

  已上市的蛋白药物中,治疗性糖蛋白药物数量众多,糖基化是最常见的蛋白翻译后修饰。2020版《中国药典》第一增补版中,正式发布9405糖蛋白的糖基化分析指导原则。赛默飞能为糖基化分析提供业内最全方案,可根据糖蛋白的复杂性、与药物安全有效的相关性以及生产监控策略的总体设计等,为糖基化提供完整糖蛋白、糖

蛋白质糖基化分类

根据糖苷链类型,蛋白质糖基化可以分为四类,即以丝氨酸、苏氨酸、羟赖氨酸和羟脯氨酸的羟基为连接点,形成-O-糖苷键型。以天冬酰胺的酰胺基、N一末端氨基酸的 α - 氨基以及赖氨酸或精氨酸的ω - 氨基为连接点,形成-N-糖苷键型;以天冬氨酸或谷氨酸的游离羧基为连接点,形成脂糖苷键型以及以半胱氨酸为连接

细胞培养条件对蛋白质糖基化的影响

糖基化可能会影响蛋白质的半衰期、免疫原性、结合活性和稳定性。蛋白糖基化是一个复杂的过程,包括碳水化合物部分的连接,以及可能通过蛋白质结构中的天冬酰胺(N-连接)或丝氨酸/苏氨酸(O-连接)氨基酸连接的位置。在哺乳动物细胞培养过程中,使用不同的细胞系培养可能会在可能发生的糖基化类型上产生重大差异。糖基

蛋白质糖基化的检测实验——化学脱糖基化

实验材料蛋白样品试剂、试剂盒TFMS苯甲醚仪器、耗材玻璃器皿实验步骤1. 在冰上预冷干净、干燥的玻璃器皿。用带有 Teflon-丝帽的玻璃试管混合试剂。2. 打开或混合试剂前,在冰上预冷所有的溶液。从冰冷的原液中,TFMS:苯甲醚 ( Sigma) 以 2:1 (v/v) 的比例混合。缓慢的向试管内

蛋白质糖基化的检测实验——酶脱糖基化

实验方法原理用酶或化学脱糖基化、通过选择性标记或通过凝集素亲和层析法是检测蛋白糖基化常用方法。实验材料蛋白样品试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液蛋白溶液β-巯基乙醇NP-40 溶液仪器、耗材SDS-PAGE玻璃器皿植物凝集素柱实验步骤一、用 PNGaseF(N-多糖酶)处理1. 以 0.1 mol/L 磷酸钠

蛋白质糖基化的过程

N-连接的糖链合成起始于内质网,完成于高尔基体。在内质网形成的糖蛋白具有相似的糖链,由Cis面进入高尔基体后,在各膜囊之间的转运过程中,发生了一系列有序的加工和修饰,原来糖链中的大部分甘露糖被切除,但又被多种糖基转移酶依次加上了不同类型的糖分子,形成了结构各异的寡糖链。糖蛋白的空间结构决定了它可以和

蛋白质糖基化的检测

试剂、试剂盒 磷酸钠缓冲液蛋白溶液β-巯基乙醇NP-40 溶液仪器、耗材 SDS-PAGE实验步骤 一、用 PNGaseF(N-多糖酶)处理1. 以 0.1 mol/L 磷酸钠(或 Tris-HCl,而不用柠檬酸)缓冲液,pH 7.4 ( 7.0~8.0 ) 配制高达 2 mg/ml 的蛋白溶液,并

糖基化对膜蛋白功能的影响

糖基化对膜蛋白功能影响常常是很重要的,对特异的生物学功能起介导作用:1,对细胞具有保护、稳定、组织及屏障等多方面作用;2,可作为外源性受体的特异性配体,某些糖链可作为各种病毒、细菌及寄生物的特异受体;3,糖链也可作为内源性受体的特异性配体,参与介导清除、周转及胞内穿行作用;4,糖链在受精过程中起着重

蛋白质糖基化的案例研究

蛋白质糖基化是一种生命活动中普遍存在的翻译后修饰,赋予蛋白质不同的生物功能和增强的物理化学稳定性。糖基化的类型根据糖苷键中涉及的特定原子进行分类:O-糖基化将糖连接到丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基的羟基氧上;N-糖基化将糖与天冬酰胺的酰胺氮连接;S-糖基化将糖添加到半胱氨酸的硫醇硫中,这类糖基化不太常见

活细胞中去糖基化的方法

  1、衣霉素在体内阻断N-连糖;  2、将内切神经氨酸酶注入发育中的视网膜提示了多唾液酸的特异性作用--将高纯度酶注入细胞内+恰当的对照;  3、将糖基修饰酶的cDNA在活细胞或动物中表达;  4、在培养环境中加入凝集素或抗体把特异的聚糖封闭掉。

活细胞中去糖基化的方法

活细胞中去糖基化的方法:1,衣霉素在体内阻断N-连糖; 2,将内切神经氨酸酶注入发育中的视网膜提示了多唾液酸的特异性作用--将高纯度酶注入细胞内+恰当的对照;3,将糖基修饰酶的cDNA在活细胞或动物中表达; 4,在培养环境中加入凝集素或抗体把特异的聚糖封闭掉。

细胞化学词汇ADP核糖基化

中文名称:ADP核糖基化英文名称:ADP-ribosylation定  义:烟酰胺腺嘌呤二核苷酸中的ADP核糖基部分与某些蛋白质的氨基酸残基发生共价连接的反应。影响蛋白质的功能。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

9405糖蛋白的糖基化分析指导原则解析,SCIEX助力糖基化精准分析

概述日前,国家药监局、国家卫生健康委联合发布《中国药典》(2020年版)第一增补本,将于2024年3月12日起施行。其中增加了《9405 糖蛋白的糖基化分析指导原则》,本指导原则详细阐述了糖蛋白糖基化分析的理念、方法及应用和验证的相关要求,适用于糖蛋白产品结构与稳定性的表征、批次放行检测和过程控制检

蛋白质免疫印迹悬浮细胞蛋白提取简介

  1)所需器材:制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管(最好高温高压处理)、两个大冰盒、长满细胞的培养瓶、10ml离心管、手套、移液枪、吸头(最好高温高压处理)、滤纸、保存于4℃冰箱的PBS(最好高温高压处理)、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟(PMSF,一种蛋白酶抑制剂,剧毒)、离心机、烧杯、4×SD

巨细胞病毒免疫球蛋白

中文名称巨细胞病毒免疫球蛋白英文名称cytomegalovirus immunoglobulin定  义针对巨细胞病毒的特异性免疫球蛋白。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临床免疫(二级学科),感染免疫(三级学科)

细胞周期蛋白影响机体免疫反应

  在你的血液中,有一些被称为中性粒细胞的免疫细胞,当它们面对致病威胁时,就会释放它们的DNA网来牵制病原体。这些DNA陷阱被人们称为中性粒细胞外陷阱(neutrophil extracellular traps,NETs)。一些研究人员在《Developmental Cell》发表文章,描述了细胞

糖基化蛋白质的基本信息

中文名称糖基化蛋白质英文名称glycosylated protein定  义带有共价连接糖链的蛋白质。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),糖类(二级学科)

黏蛋白的糖基化和聚集的介绍

  黏蛋白基因编码粘蛋白单体被合成为杆状核粘蛋白核心是翻译后由异常丰富改性的糖基化。  粘蛋白的致密“糖衣”给他们相当保水能力,也使它们耐蛋白水解作用,这可能是在维持重要粘膜障碍。  黏蛋白的分泌与分子质量约为1 10万大蛋白质的块状集合体。内的这些聚集体,单体被相互连接大多是由非共价的相互作用,尽

蛋白质的糖基化修饰主要分为

特征 N-连接 O-连接合成部位 粗面内质网 主要在高尔基体合成方式 来自同一个寡糖前体 一个个单糖加上去与之结合的氨基酸残基 天冬酰氨 丝氨酸、苏氨酸、羟脯、羟赖最终长度 至少5个糖残基 1-4个糖残基第一个糖残基 N-乙酰葡萄糖胺 N-乙酰半乳糖胺大概清楚了吧! 蛋白质糖基化是一种蛋白质修饰,作

肿瘤糖基化可为免疫治疗提供新的免疫检查点

  肿瘤的诊断和治疗一直是研究的热点和前沿,其中与免疫相关的诊疗手段更是研究的重点所在。2018年在《Nature Reviews Immunology》上发表了题为《The tumour glyco-code as a novel immune checkpoint for immunothera

细胞免疫细胞免疫

  几乎所有的细胞表面都有MHC-I,CD8+T细胞能识别细胞表面的MHCI+抗原复合物,识别后进行攻击。  根据功能不同T细胞可分为三类,其表面均有相应的受体,具有抗原特异性:细胞毒性T细胞(Cytotoxic T cells,Tc)、辅助性T细胞(helper T cells,TH)、抑制性T细

尿红细胞免疫球蛋白细胞化学染色

正常尿液中无免疫球蛋白存在,但在肾小球及肾小管发生病变时尿中可检出免疫球 蛋白,已经证实尿中红细胞多在 Henle′s 环升支瘀着,肾小球来源的尿红细胞表面将被 免疫球蛋白覆盖,而非肾小球来源的尿红细胞表面则无免疫球蛋白覆盖,为此应用细胞 化学染色法可检测尿红细胞表面免疫球蛋白,以鉴别肾性血尿和非肾

蛋白质免疫印迹实验贴壁细胞蛋白提取

  贴壁细胞蛋白提取(细胞蛋白含量一般约为1x10-9mg/细胞)  1)所需器材:制冰机、细胞刮刀、标记笔、两套1.5ml EP管(最好高温高压处理)、两个大冰盒、手套、长满细胞的培养瓶、保存于4℃冰箱的PBS、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟(PMSF,一种蛋白酶抑制剂,剧毒)、移液枪、吸头(最好高温

蛋白质免疫印迹实验悬浮细胞蛋白提取相关

  悬浮细胞蛋白提取  1)所需器材:制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管(最好高温高压处理)、两个大冰盒、长满细胞的培养瓶、10ml离心管、手套、移液枪、吸头(最好高温高压处理)、滤纸、保存于4℃冰箱的PBS(最好高温高压处理)、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟(PMSF,一种蛋白酶抑制剂,剧毒)、离

蛋白质工程拓展免疫细胞语言

  根据世界卫生组织统计,每年约600万人死于败血症,这些数字令人担忧。这种俗称“血液中毒”的疾病通常始于无害的感染。  一旦触发免疫系统过度反应,自身组织就会受到攻击和损伤。过度反应最终会导致危及生命的防御系统全面崩溃。仅在德国,死于败血症的人数就超过了艾滋病、结肠癌和乳腺癌的总和!  世界各地的

蛋白质糖基化位点检测实验步骤

  用酶或化学脱糖基化、通过选择性标记或通过凝集素亲和层析法是检测蛋白糖基化常用方法。 一、用 PNGaseF(N-多糖酶)处理。  1. 以 0.1 mol/L 磷酸钠(或 Tris-HCl,而不用柠檬酸)缓冲液,pH 7.4 ( 7.0~8.0 ) 配制高达 2 mg/ml 的蛋白溶液,并含 5

关于分泌蛋白的修饰加工糖基化的介绍

  这些修饰包括糖基化、羟基化、酰基化(酰化)、二硫键形成等,其中最主要的是糖基化,几乎所有内质网上合成的蛋白质最终被糖基化。糖基化的作用是:  ①使蛋白质能够抵抗消化酶的作用;  ②赋予蛋白质传导信号的功能;  ③某些蛋白只有在糖基化之后才能正确折叠。  糖基化有两种类型:  (1)糖蛋白是由寡糖

高尔基体蛋白质糖基化的介绍

  N-连接的糖链合成起始于内质网,完成于高尔基体。在内质网形成的糖蛋白具有相似的糖链,由Cis面进入高尔基体后,在各膜囊之间的转运过程中,发生了一系列有序的加工和修饰,原来糖链中的大部分甘露糖被切除,但又被多种糖基转移酶依次加上了不同类型的糖分子,形成了结构各异的寡糖链。糖蛋白的空间结构决定了它可

大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)酶联免疫分析

大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中晚期糖基化终末产物(AGEs)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)水平。用纯化的大鼠晚期糖基化终末