运用间期核荧光原位杂交对常见非整倍体的产前诊断实验
荧光原位杂交(FISH) 包括荧光素标记的特异性探针与患者染色体 DNA 杂交,并用荧光显微镜检测信号。FISH 不仅能用于中期染色体,也可用于间期核的诊断,因此不需要培养细胞进行诊断。FISH 作为一种在临床细胞遗传学中很有潜力的诊断技术,在大约 15 年前问世。已经证实:用特异性探针 FISH 检测间期核的染色体数目非常快捷有效。试剂、试剂盒乙醇HClNaOH甲酰胺甲醇冰乙酸柠檬酸钠KCl胰蛋白酶SSC仪器、耗材AneuVysion™ 试剂盒中提供的试剂实验步骤......阅读全文
染色体核型分析系统的用途
染色体核型分析系统目前已广泛应用于各大医院检验科、血液科、妇产科、生殖中心、计划生育研究所、职业病防治所以及高校和科研院所等单位。主要应用范围包括: 遗传疾病诊断 主要做外周血G带染色体分析,一般用于临床医学、婚前检查和优生优育。如生殖功能障碍、第二性征异常、外生殖器两性畸形、先天性多发性畸
染色体核型分析系统的用途
染色体核型分析系统目前已广泛应用于各大医院检验科、血液科、妇产科、生殖中心、计划生育研究所、职业病防治所以及高校和科研院所等单位。主要应用范围包括: 遗传疾病诊断 主要做外周血G带染色体分析,一般用于临床医学、婚前检查和优生优育。如生殖功能障碍、第二性征异常、外生殖器两性畸形、先天性多发性畸
简述染色体核型分析系统的用途
染色体核型分析系统目前已广泛应用于各大医院检验科、血液科、妇产科、生殖中心、计划生育研究所、职业病防治所以及高校和科研院所等单位。主要应用范围包括: 一、遗传疾病诊断 主要做外周血G带染色体分析,一般用于临床医学、婚前检查和优生优育。如生殖功能障碍、第二性征异常、外生殖器两性畸形、先天性多发
关于X三体综合征实验诊断的检查方法介绍
X-三体综合征主要通过染色体核型分析的方法进行实验诊断,常用以下几种检测方法。 1.染色体核型分析 是诊断的“金标准”,但分析结果时往往依赖获取物的质量,如果样本细胞量小或被污染,则很难或不能出结果;另外这种方法需要冗长的实验程序和高额的费用,技术要求高,无法用于大规模的筛查。 2.荧光原
荧光原位杂交实验步骤
荧光原位杂交实验步骤1)探针变性将探针在75oC恒温水浴中温育5min,立即置0oC,5~10min,使双链DNA探针变性。2)标本变性①将制备好的染色体玻片标本于50oC培养箱中烤片2~3h。(经Giemsa染色的标本需预先在固定液中退色后再烤片)。 ②取出玻片标本,将其浸在70~75
FISH-荧光原位杂交实验
实验概要1. 通过实验了解荧光原位杂交技术的基本原理和实验技术 2. 掌握原位杂交技术的操作方法及荧光显微镜的使用方法 3. 了解其在生物学、医学领域的应用实验原理荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20
荧光原位杂交实验的步骤
探针变性:将探针在75℃恒温水浴中温育5min,立即置0℃,5~10min,使双链DNA探针变性。 切片置于65℃下过夜烘烤。 二甲苯中室温脱蜡2次,每次10分钟,随后浸入100%乙醇中5分钟。 切片依次室温置于100%乙醇、85%乙醇和70%乙醇中各两分钟复水。将组织切片室温浸入去离子水
FISH荧光原位杂交实验(原位杂交)
1. 实验目的 通过实验了解荧光原位杂交技术的基本原理和在生物学、医学领域的应用。掌握原位杂交技术的操作方法,熟练掌握荧光显微镜的使用方法。2. 实验原理 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗
染色体核型分析系统的用途及工作原理
系统用途 染色体核型分析系统目前已广泛应用于各大医院检验科、血液科、妇产科、生殖中心、计划生育研究所、职业病防治所以及高校和科研院所等单位。主要应用范围包括: 遗传疾病诊断 主要做外周血G带染色体分析,一般用于临床医学、婚前检查和优生优育。如生殖功能障碍、第二性征异常、外生殖器两性畸形、先
荧光原位杂交的荧光原位杂交
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。探针首先与某种介导分子(reporter molecule)结
荧光原位杂交实验方法
荧光原位杂交实验方法,实验原理荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色
多重端粒荧光原位杂交实验
实验方法原理实验材料永生化淋巴细胞株试剂、试剂盒青霉素谷氨酰胺胎牛血清植物血球凝集素胸苷秋水仙胺KCl甲醇冰乙酸柠檬酸钠SSC甘油生物素-16-dUTP地高辛-11- dUTP10 XdNTP 混合物仪器、耗材超净台细胞培养瓶Nunc 管培养基相差显微镜染色缸加热板装有Pinkel滤光片轮的CCD显
荧光原位杂交技术实验心得
荧光原位杂交技术( fluorescence in situ Hybridization,FISH)是一种非放射性原位杂交方法,用特殊的荧光素标记核酸探针,在细胞或组织切片标本上进行杂交,以检测细胞内 DNA 或 RNA 特定序列存在与否。FISH 实验操作与用非荧光标记探针的原位杂交基本相似。在组
多色荧光原位杂交实验
M-FISH 被成功地用于鉴别先天性疾病中的标记染色体或衍生染色体。近来该方法越来越多地被用于确认复杂核型中的多重染色体异常;在进行血液疾病的诊断时,M-FISH 在检测临界染色体重排中非常有用试剂、试剂盒DAPI 复染液乙醇SSC盐酸HClNP-40胰酶NaCl柠檬酸钠Spectra Vysion
多色荧光原位杂交实验
实验方法原理 试剂、试剂盒 DAPI 复染液乙醇SSC盐酸HClNP-40胰酶NaCl柠檬酸钠Spectra Vysion探针M-FISH 探针实验步骤 一、染色体标本制备1.标本制备:不同标本来源的样品(血液、羊水、成纤维细胞培养物或骨髓)用其相应的标准程序进行制备。2.用相差显微镜找到合适的中期
多色荧光原位杂交实验
实验方法原理 试剂、试剂盒 DAPI 复染液 乙醇 SSC 盐酸 HCl
FISH荧光原位杂交实验
实验概要通过实验了解荧光原位杂交技术的基本原理和在生物学、医学领域的应用。掌握原位杂交技术的操作方法,熟练掌握荧光显微镜的使用方法。实验原理荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原
非整倍体细胞系的定义
中文名称非整倍体细胞系英文名称aneuploid cell line定 义由非整倍体细胞建立的细胞系,通常为无限增殖的肿瘤细胞系。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
染色体畸形的鉴别诊断及缓解方法
鉴别诊断 1.数量畸变包括整倍体和非整倍体畸变,染色体数目增多、减少和出现三倍体等。 2.结构畸变染色体缺失、易位、倒位、插入、重复和环状染色体等。又可分为常染色体畸变,如Down(21三体)综合征、Patau(13三体)综合征和Edward(18三体)综合征等,以及性染色体畸变,如Turn
我国研究出更快更准的快速产前诊断技术
一项有关产前诊断技术的研究课题,在历时三年后于近日通过了卫生部组织的结题验收。这意味着我国的产前诊断技术将更快、更准。 这一课题名为“荧光原位杂交技术在产前遗传性疾病检测中的应用研究”,由卫生部医药卫生科技发展研究中心承担,北京妇产医院牵头,全国共有55家产前诊断中心参加。 据介绍,
无细胞胎儿DNA可用于区分整倍体和非整倍体妊娠丢失
丹麦哥本哈根大学医院Henriette Svarre Nielsen团队研究了无细胞胎儿DNA用于遗传评价的可行性。相关论文于2023年2月2日发表在《柳叶刀》杂志上。四分之一的妊娠以流产告终。尽管对夫妻的影响有充分的文献记载,但缺乏循证治疗和预测模型。胎儿非整倍体与下一次成功妊娠的几率更高,而整倍
如何运用高压无线核相仪对变压器核相
应先用高压无线核相仪运行的变压器校对两母线上电压互感器的相位,然后用新投入的变压器向一级母线充电,再进行核相,一般使用相位表或电压表,如测得结果为,两同相电压等于零,非同相为线电压,则说明两变压器相序一致。变电所两电源核相的问题A----A 115V A----B 330V A----C 440V
胎儿有核红细胞在无创产前诊断中应用
随着经济的高速发展,在生活水平提高的同时,人们的生活压力也日渐增大,加上雾霾等环境污染的加剧和各种慢性疾病发生率的增长,都严重影响了人们的生殖能力,随之而来的不孕不育、胎儿先天缺陷等问题已经成了亟待解决的难题。目前,我国每年新增出生缺陷约90万例,不仅严重影响了儿童的健康,也给整个家庭和社会带来了严
荧光原位杂交体植入的应用实验
荧光原位杂交体植入的应用实验PBl、PB2 标本的制备 1.在 50 mL 培养瓶准备新鲜固定液(甲醇:冰乙酸=3:1),在冰柜中保存备用。 2.将毛细吸管在小型喷灯的火焰上拉出内径约 50pm 的尖,内径太大可能会丢失极体。 3.加几滴固定液再处理预先处理过的玻片以清除可能存在的油脂或灰尘,用无尘
多重端粒荧光原位杂交实验(三)
三、端粒克隆DNA的抽提1.准备含特定抗生素50μg/mL氨苄青霉素、35μg/mL卡那霉素或12.5μg/mL氯霉素)的LB平板。2.从-70℃取出甘油保存管,放在干冰上。3.取甘油保存的菌种在LB平板划线后,37℃细菌培养箱培养过夜。4.加100mL 2×YT培养基到500mL离心管中,按步骤1
荧光原位杂交实验——基本方案
实验材料样品试剂、试剂盒DNA探针非同位素甲酰胺杂交混合液甲酰胺Triton X-100SSC仪器、耗材相差显微镜盖玻片水浴锅加湿盒滤光片荧光显微镜实验步骤1a. 石蜡切片或细胞的杂交:按石蜡切片或细胞的原位杂交实验的基本方案步骤1~7,对载玻片进行脱蜡、水化、 封闭和脱水处理。将标本晾干(或在干
多重端粒荧光原位杂交实验(一)
实验方法原理 实验材料 永生化淋巴细胞株试剂、试剂盒 青霉素谷氨酰胺胎牛血清植物血球凝集素胸苷秋水仙胺KCl甲醇冰乙酸柠檬酸钠SSC甘油生物素-16-dUTP地高辛-11- dUTP10 XdNTP 混合物仪器、耗材 超净台细胞培养瓶Nunc 管培养基相差显微镜染色缸加热板 装有Pinkel滤光片轮
多重端粒荧光原位杂交实验(二)
(2)来自永生化淋巴细胞株1.增殖细胞,直至全培基到50mL。.2.收获细胞前的18〜24h,更换新鲜培养液。3.收获时,将20mL生长良好的细胞移到50mL离心管中。4.加200ΜL浓度为10μ×g/mL秋水酰胺,轻轻混匀。5.37℃条件下孵育50〜60min。6.180g离心5min。箱或水浴箱
多重端粒荧光原位杂交实验(四)
(2)杂交后洗脱、抗体检测和复染1.准备封闭液和抗体溶液1〜3。2.振荡抗体溶液,在微型离心机中以最大转速离心10min。避光放置,如有必要可在室温中预温。3.加洗脱液I到干净的染色缸中,水浴中预温到72℃后调整pH至7.0。4.加洗脱液II到干净的染色缸中,室温(20〜25℃)放置。5.同时将用水
多色纤维荧光原位杂交实验
实验方法原理试剂、试剂盒培养细胞悬液PBS晕圈溶液牛血清白蛋白乙醇醚10 X 切口缓冲液核苷酸混合物Bio-16-dUTP二硫苏糖醇酵母 RNA鲑鱼精 DNASSCTNT 溶液TNB 溶液仪器、耗材微型离心机Camag UV 盒 II荧光显微镜探针DNA实验步骤一、制备含 DNA 纤维的载玻片标本大