非同位素分析报道基因活性实验——β半乳糖苷酶

实验材料转染的细胞试剂、试剂盒PBSTriton裂解液β-半乳糖苷酶反应缓冲液光发射加速液仪器、耗材细胞刮子绘图仪发光计计数器实验步骤1. 用PBS分别洗涤两次60 mm 培养皿中的转染β-半乳糖苷酶表达质粒的细胞及模拟转染的细胞。 2. 加入250 μl Triton裂解液,用一橡胶细胞刮子将细胞刮下来。将细胞提取物转移至1 个1.5 ml 微量离心管中。在4℃以最大速度离心2 min,将上清转移至一个干净的微量离心管中。 3. 在一只发光计的测试管中加2~20 μl 细胞提取液。再加200 μl β-半乳糖苷酶反应缓冲液,在室温下温育60 min。 4. 将测试管放入发光计中,注人300 μl 光发射加速液。注入后等2~5 s,然后测定5 s。......阅读全文

淀粉葡糖苷酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 4-α-D-葡聚糖葡萄糖水解酶,葡聚糖 1,4-α-葡糖苷酶通过水解末端 1,4- 和 1,6 连接的 α-1,6-葡糖苷键释放 β-

淀粉葡糖苷酶的测定实验

实验方法原理4-α-D-葡聚糖葡萄糖水解酶,葡聚糖 1,4-α-葡糖苷酶通过水解末端 1,4- 和 1,6 连接的 α-1,6-葡糖苷键释放 β-D-葡萄糖。这个实验与 α-葡糖苷酶类似,只是用糖原代替麦芽糖作为底物。一段时间以后(5 min)反应停止,葡萄糖被测出与己糖激酶/6-磷酸葡糖脱氢酶偶联

同位素法测定底物磷酸化活性方法-Phosphorylation-of-Substrates

Phosphorylation of SubstratesScott T. Eblen, N. Vinay Kumar, and Michael J. WeberDepartment of Microbiology and Cancer Center, University of Virginia

乳铁蛋白的抗病毒活性的介绍

  乳铁蛋白可以帮助机体抵御多种病毒的感染。由轮状病毒、肠道病毒和腺病毒引起的肠道感染都可以用乳铁蛋白进行治疗,在感染发生初期,乳铁蛋白可以抑制腺病毒的复制,阻止病毒吸附于靶细胞上从而防止感染。在研究引起感染性腹泻的诺如病毒时发现,乳铁蛋白可以减轻细胞毒素的损伤、降低病毒细胞的数量、阻止病毒与细胞的

酵母双杂交技术及其在蛋白质组研究中的应用

摘要  蛋白质组学是在后基因组时代出现的一个新兴的研究领域, 它的主要任务是识别鉴定细胞、组织或机体的全部蛋白质, 并分析蛋白质的功能及其模式。 因此, 揭示蛋白质组中蛋白质间的相互作用关系也是蛋白质组学的重要内容之一。 酵母双杂交技术是用来检测蛋白质间是否相互作用的一个非常有效的手段。 该技术在酵

关于酵母双杂交系统的发展介绍

  发展起来的各种双杂交系统大多是以Fields等人建立的系统为基础的。这些新系统主要对报道基因、“诱饵”表达载体以及“猎物”表达载体等做了一些改进。其中一个重要改进是引入额外的报道基因,如广泛采用的HIS3基因。经过改造带有HIS3报道基因的酵母细胞,只有当HIS3被启动表达才能在缺乏组氨酸的选择

免疫分析大鼠N乙酰βD氨基葡萄糖苷酶实验

大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:                                                          96T10U/L -320 U/L使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相

相互作用蛋白鉴定实验——鉴定诱饵蛋白(半乳糖苷酶)

通过确定与之结合的其他蛋白质来理解某种特定蛋白质的功能,常常是十分有用的方法。这可以通过从文库中选择或筛选与靶蛋白相互作用的新蛋白来实现。现有一种特别有用的方法即双杂交系统或相互作用阱, 用来测定新的相互作用蛋白,这种方法采用充当「试管」的酵母菌和一种报道系统的转录激活作用来识别结合蛋白。本方法也可

免疫学实验HCG半定量

HCG半定量介绍:  HCG 红血球淀集抑制半定量试验(以下简称 HCG 半定量)灵敏度高,故对早孕、先兆流产、外孕能及早做出诊断,并能对滋养细胞疾病进行诊断,疗效判定及随访。本法较放免要求设备简单、迅速、经济,基层医院都可开展放免、酶标法虽较本法更灵敏,但对滋养细胞疾病的诊断尚无肯定的标准。HCG

半合成生物体能生成非天然蛋白质

  英国《自然》杂志29日发表的一篇论文中,美国斯克里普斯研究所公布了合成生物学最新进展,他们培育了一种既能存储又能检索的人造遗传信息的半合成生物体,其生成非天然改造蛋白质,效率与天然几无差距。该成果将成为人们创造新蛋白质和新功能的平台,但合成生物学目前的快速发展却引发了担忧。  遗传密码由腺嘌呤、

α葡萄糖苷酶的抑制剂性质

目前发现α-葡萄糖苷酶的抑制剂性质可能是底物的类似物或者酶-底物中间体的类似物,也可能是与α-葡萄糖苷酶通过可逆性结合、竞争性或者非竞争结合抑制酶的活性而发挥作用的,或者共同兼有。α-葡萄糖苷酶的作用方式是先形成糖-酶中间体,然后通过亚基间的酸性进行广义酸碱催化及亲核作用,形成碳阳离子过渡态物质,最

α葡萄糖苷酶的抑制剂性质

α-葡萄糖苷酶的抑制剂性质目前发现α-葡萄糖苷酶的抑制剂性质可能是底物的类似物或者酶-底物中间体的类似物,也可能是与α-葡萄糖苷酶通过可逆性结合、竞争性或者非竞争结合抑制酶的活性而发挥作用的,或者共同兼有。α-葡萄糖苷酶的作用方式是先形成糖-酶中间体,然后通过亚基间的酸性进行广义酸碱催化及亲核作用,

α葡糖苷的测定实验_测定-α葡糖苷酶

α-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶,麦芽糖酶。从末端切断 α-D-葡萄糖的非还原的 1,4 键相连的 α-D-葡萄糖残基。对于实验,麦芽糖分成两个葡萄糖,这是从己糖激酶的反应中测得的,而己糖激酶(HK)的反应又与葡萄糖 6-磷酸脱氢酶(G6PDH)相偶联。实验材料α-葡糖苷酶试剂、试剂盒乙酸缓冲液麦芽糖溶

一个半、十五个半综合征病例分析

临床资料患者,男,59岁,因“头晕伴视物双影3d”入院。既往:高血压病及脑出血病史10y,遗留言语、右侧肢体活动差,生活可自理。吸烟史40余年,戒烟10y。饮酒史30余年。入院查体:血压:190/110mmHg,神清,构音障碍,双眼向左、向右注视时复视,左眼内收受限,右眼内收及外展均受限。双眼向右、

NK细胞活性测定实验

实验方法原理 用放射性核素标记靶细胞,当靶细胞受到破坏时,放射性核素被释放出来,通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性,即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料 靶细胞试剂、试

酶活性的测定实验

连续性检测             实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量

酶活性的测定实验

酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际

青稞酰化黄酮α葡萄糖苷酶抑制活性构效关系研究取得进展

青稞是青藏高原地区重要的粮食作物,研究发现,其幼苗期富含高含量的黄酮类化合物。该类化合物具有显著的α-葡萄糖苷酶抑制活性,主要成分为大麦黄苷、皂草黄苷及其7-O位糖基酰化衍生物。中国科学院西北高原生物研究所研究团队通过建立UPLC-QTOF-MS/MS结合高速逆流色谱和制备液相色谱的靶向分离技术,从

实现胞外衰老相关β半乳糖苷酶活性的快速灵敏检测

  近日,中国科学院合肥物质科学研究院健康与医学技术研究所研究员杨良保课题组在胞外衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)活性灵敏检测方面取得新进展。相关研究成果发表在Analytical Methods上。  细胞衰老是生物衰老的潜在原因之一,也与原发性卵巢癌及多种衰老相关疾病相关。β-半乳糖苷

乳铁蛋白的免疫调节和抗炎活性

  由于乳铁蛋白在机体的外分泌液中广泛分布,因此可以作为机体的第一道天然免疫屏障参与免疫调节。乳铁蛋白是重要的炎症反应调控因子之一,是参与调节免疫系统的重要成分,能够保护机体抵抗微生物的感染,降低由大肠杆菌、传染性腹泻的发生率,改善刚断奶小猪的生长状况。对免疫系统未发育完善的新生儿而言,富含乳铁蛋白

乳过氧化物酶的浓度及活性

在牛乳中,LP是仅次于黄嚓吟氧化酶第二丰富的酶,它在乳中的浓度大约是30mg/L。有报道,LP含量的改变与牛的生殖周期、季节、品种和喂养制度有关,需要注意,不像其它抗菌蛋白,LP的含量在牛初乳中是较低的,但在产后3~5天LP含量迅速增加以达到最大值。不同来源乳中的LP的活性不同,可以看到牛乳中LP的

报告基因分类及优缺点

报告基因(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,其表达产物非常容易被鉴定。把它的编码序列和基因调节序列相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。作为报告基因必须具备的条件:(1)全序列已测定(2)表达产物在手提细胞中不存在,即无背景,

非编码RNA-Nfi调控水稻固氮酶活性

   近日,生物所微生物功能基因组创新团队林敏课题组在水稻根际联合固氮施氏假单胞菌中发现新型非编码RNA参与协同调控固氮酶活性,为进一步揭示生物固氮网络调控机制奠定了重要理论基础。该成果发表在最新一期的经典微生物学杂志《应用环境微生物学(Applied and Environmental Micro

非活性染色质的概念和特征

非活性染色质是指不具有转录活性的染色质。

非离子表面活性剂简介

  1.烷基葡糖苷:  一种新型的非离子表面活性剂,常见的有椰油基葡糖苷、月桂基葡糖苷、鲸蜡硬脂基葡糖苷等。  1.脂肪酸甘油酯:单硬脂酸甘油酯;  HLB为3~4,主要用作W/O型乳剂辅助乳化剂。  2.多元醇  蔗糖酯:HLB(5~13)O/W乳化剂、分散剂  脂肪酸山梨坦(Span) :W/O

抑制剂对酶活性的影响实验报告实验结果及分析

影响酶作用的因素:影响酶促反应的因素常有酶的浓度,底物浓度,pH值,温度,抑制剂,激活剂等.其变化规律有以下特点: 1、酶浓度对酶促反应的影响:在底物足够,其它条件固定的条件下,反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时,酶促反应的速度与酶浓度成正比。2、底物浓度对酶促反应的影响

表面元素半定量分析

样品表面出射俄歇电子强度与样品中该原子的浓度有线性关系 , 利用这种关系可以进行元素的半定量分析。俄歇电子强度不仅与原子多少有关 , 还与俄歇电子的逃逸深度、样品的表面光洁度、元素存在的化学状态有关。因此 , AES 技术一般不能给出所分析元素的绝对含量 , 仅能提供元素的相对含量。必须注意的是 ,

概述半不连续复制的相关实验

  脉冲标记实验(pulse-labelingexperiment)。以E.coli为材料,在培养时,培养基中加入同位素[3H]标记的dTTP,经30秒后,DNA刚开始复制,分离DNA,然后在碱中沉淀,变性,让新合成的单链和模板链分开,再用CsCl密度梯度离心,以沉降的快慢来确定片段的大小,再检测放

植物水稳定同位素分析简介

  植物水稳定同位素分析仪是一种用于地球科学、环境科学技术及资源科学技术领域的分析仪器,于2017年12月7日启用。  技术指标  δ18O≤0.10‰,δ2H≤0.5‰。  主要功能  采用激光光腔衰荡光谱法测定冰芯,雪样,降水,地表水,河湖水,大气水汽等各类水样中氢氧同位素比。使用自动进样器进样

用于同位素分析的方法介绍

用于同位素分析的方法有: ①质谱法,是最重要的同位素分析法, 不仅精密度高, 而且可分析同位素的种类也多。 ②光谱法, 用于分析氘的精密度达0.0002%,可与质谱法相比;是分析氮15最方便的方法,已有专门的光谱仪生产;分析铀235和铀238则须用大型光栅摄谱仪。③气相色谱法,用于分析氕、氘,迅速而