DNA片段的回收实验——液氮冻融法
实验材料DNA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1. 紫外灯下从胶上切下目的片段,放入一Epphendof管中。2. 离心1 min,加入500 ul TE,200 ul 酚/氯仿混匀。3. 离心管放入液氮中10~15 min,再室温放置,反复冻融。4. 用酚/氯仿、氯仿抽提Epphendof管中液体各一次。5. 1/10体积乙酸钠+2体积无水乙醇沉淀2小时。6. 70%乙醇洗沉淀,真空干燥,复溶于dd水或TE中。......阅读全文
DNA片段的回收实验——液氮冻融法
实验材料DNA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1. 紫外灯下从胶上切下目的片段,放入一Epphendof管中。2. 离心1 min,加入500 ul TE,200 ul 酚/氯仿混匀。3. 离心管放入液氮中10~15 min,再室温
冻融法回收DNA片段
实验方法原理 冻融法是指采用反复冷冻与融化时由于细胞中形成了冰晶及剩余液体中盐浓度的增高可以使细胞破裂。这种方法简单方便,但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。 实验材料
冻融法回收DNA片段
冻融法回收DNA片段可用于:(1)获取纯化的DNA片段;(2)回收PCR产物。实验方法原理冻融法是指采用反复冷冻与融化时由于细胞中形成了冰晶及剩余液体中盐浓度的增高可以使细胞破裂。这种方法简单方便,但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。 实验材料DNA胶条试剂、试剂盒Tris-HCl饱和酚
什么是冻融?
冻融是指土层由于温度降到零度以下和升至零度以上而产生冻结和融化的一种物理地质作用和现象。中国多属于季节性冻土类型。即冬季冻结,夏季消融,多年冻土类型少。
细胞的冻存与复苏实验_液氮冻存法
实验方法原理目前长时间保存细胞的方法是将细胞低温冻结保存在液氮中(-196 ℃),保存时间可长达一年甚至几年,用时解冻,大多数细胞仍能生长繁殖,为妥善起见,细胞冻存一年后应复苏培养后再冻存。冻存细胞时应加入保护剂,否则,细胞内外的水会结成冰晶,使细胞发生机械损伤。加入保护剂后,可使冰点降低,在缓慢冻
冻融以在珍贵样本原液冻融工作的应用
嘿,生物圈人~你心中的原液冻融工作是怎样的? 生物制品生产的过程中往往面临大体积的原液冻融工作,单抗,双抗,ADC抗体偶联药物,重组蛋白等不同的原液样品,分子结构的差异必然具有迥异的温度敏感性,如何程序性地冷冻并且溶解以维持样品活性和均一性,是工艺设计至关重要的环节。 那么价值百万甚至千万的单抗,双
混凝土冻融试验机特点
特点:▲试验过程由电脑自动控制,具有控制参数设定,显示试验数据记录、存储状态指示等功能将可编程控制器和长图记录仪换成了工业控制用台式计算机。 能保证365 天不间断运行,绝不会发生死机现象;▲将冷冻机水冷机组换成了风冷机组。符合当前制冷设备流行趋势,并可免除水冷机组的冻害威胁。并有噪音小等特点。以实
海鲜冻存液氮罐
利用液氮超低温冻存海鲜是目前**的海鲜冻存技术。超低温-196度能让海鲜产品在和液氮接触时的温差超过200度,从而杜绝海中微生物的滋生,海鲜冻存液氮罐中液氮的使用瞬间冷冻技术极大的保藏了海鲜产品的新鲜度,使海鲜没有机会在长期放置的过程中发生腐化变质,鲜嫩口感的丧失,这是海鲜最重要的价值,而海鲜冻存液
混凝土快速冻融试验箱冻融试验方法
冻融试验,是指科研机构对新药或新材料进行的一种科学实验,目的是检验实验对象各种指标的稳定性和有效性。冻融试验在建筑上:冻融试bai验是为测du试混凝土抗冻性能而设计的试验,通常用zhi于测量dao混凝土在水中反复周期的冰冻和融化而导致破坏的承受能力。在医学上:冻融试验是模拟药品在运输与使用过程中可能
冻融法细胞破碎一次需要多长时间
1、高速组织捣碎 :将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种 子等。2、玻璃匀浆器匀浆 :先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,
细胞冻存复苏原则慢冻快融操作与演示
培养细胞时为何要冻存一定数量的细胞?有何意义?细胞冻存的意义:细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态并将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其它意外事
混凝土冻融试验机试验规程
试验规程:▲开机前准备→检查机组周围是否异样。→检查机组电源连接是否妥当(相电压是否符合机组电压要求)。→冻水泵经试压、排污、放空气、试运行后是否处于无故障备用状态。→检查试验箱内是否干净,不得有小颗粒及丝状物,否则损坏水泵或堵塞管路。→加足够的乙二醇,不得无乙二醇的状态下开启机器。▲机组系统操作→
细胞复苏的原则:慢冻速融
必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复苏步骤一. 实验前准备:将水浴锅预热至37℃。细胞实验室进行常规消毒,用75%酒精擦拭并且使用紫外线照射40min的超净工作台台面。在超净工作台中按次序摆放好消过
混凝土冻融试验机操作规程
操作规程:▲开机前检查机组是否出现凹凸异状,电源连接是否妥当,并加足够的防冻液,不得在无防冻液的状态下开启机器。▲机组系统操作。开机后,观察高低压表的指数来判定机组是否运行正常,一般压缩机正常运行时,高压压力为14-22kg/cm3,低压压力为0.8-1.5kg/cm3。▲机组保养。要保持机房清洁及
混凝土冻融试验机维护与保养
混凝土冻融试验机维护与保养:▲经常进行克利夫兰闪点试验器保养与维护,并存放在干燥通风之处,待用时间过长仪器设备,应定期通电开机,防止潮霉损坏仪器设备其零部件。▲建立大型精度、贵重备技术指标定期校验和标定制度,保持应有的技术指标。做好使用原始记录。▲仪器设备不准随意拆改或解体使用,确因需要开发新功能或
western蛋白样品最多可以反复冻融几次
可反复冻融的次数具体情况根据目的蛋白性质(主要是稳定性)而定,当然,最好是一次成功。如果说需要做大量的实验,需要一次准备很多一致性蛋白样品,那么强烈建议你在第一次冷冻前用EP管分装,分装数量和分装量根据你的实验次数和需要一次上样量确定。这样,就完全避免了多次冻融(除了第一次实验不需要冻融;这是从根本
混凝土冻融试验机使用注意事项
注意事项:▲使用设备时,要认真阅读技术说明书,熟悉技术指标、工作性能、使用方法、注意事项,严格遵照仪器使用说明书的规定步骤进行操作。▲初次使用设备人员,必须在熟练人员指导下进行操作,熟练掌握后方可进行独立操作。▲实验时使用的仪器设备及器材,要布局合理,摆放整齐,便于操作,观察及记录等。▲电子仪器设备
反复对血清冻融对细胞培养有害
实验室一次用不完的血清会采取继续冷冻的方式保存,冻融血清会对蛋白的活性有影响,如果是反复冻融的确会影响到细胞正常生长。曾有研究发现,血清冻融三次,对肿瘤标志物的浓度影响不大1,对于血浆,有报道在短时间内反复冻融三次,对总蛋白、白蛋白和免疫球蛋白含量影响不大,但作者推测对免疫球蛋白的活性有影响2。重要
砌墙砖冻融试验机的参数特点
砌墙砖冻融试验机的原理为气冻水溶,仪器通电前在储水箱中加满水,机器通电后电源指示灯亮起; 将待检试样放入试样槽中,按启动键冻融机开始运行,出厂设置参数制冷设定值为‘-20℃’,制冷完成后保持恒温240min; 制冷完成后工作室自动加水并融化试件,加热设定值为‘+20℃’试件温度
混凝土冻融试验箱的使用说明
混凝土冻融试验箱一体式结构,操作简单方便。具有占地面积小、移动方便等特点,是移动实验室、高速公路和混凝土搅拌站的常用设备。 混凝土冻融试验箱的调试与安装: 1、开箱后,应检查有无因运输振动造成的损失,对损坏部分应修复后才能使用。2、本装置对安装的要求: 空气要流通,远离热源,无阳光直射的场所;
反复冻融的血清对细胞有什么影响
血清中因含有许多蛋白质,反复冻融对蛋白的活性肯定会有一定的影响,这似乎已*。因此,如果几次内用不完,应尽量分装,这不仅适用于血清,也适用于其他储存于-20℃的蛋白质类产品。本文威正翔禹/缔一生物为您分析反复冻融的血清对细胞有什么影响 曾有研究发现,血清冻融三次,对肿瘤标志物的浓度影响不大1,对于
细胞冻存液氮罐的质量判断
细胞冻存液氮罐一般可分为液氮贮存罐、液氮运输罐两种。 贮存罐主要用于室内液氮的静置贮存,不宜在工作状态下作远距离运输使用; 液氮运输罐为了满足运输的条件,作了专门的防震设计。其除可静置贮存外,还可在充装液氮状态下,作运输使用,但也应避免剧烈的碰撞和震动。细胞冻存液氮罐一般可分为液氮贮存罐、液氮运输罐
液氮罐冻细胞注意事项(一)
液氮罐是一种低温容器,整个容器的内外胆之间是真空层,可以维持细胞、疫苗、精液、组织等生物,存放在液氮罐内可以长时间维持活性,但是冻细胞的时候应该注意哪些问题呢?首先我们需要知道冻存细胞的时候,需要包括准备、取材、培养和冻存复苏,为了保存细胞,需要注意操作细节。液氮罐内冻存生物样品的注意事项:1:当我
成都山地所展示中国冻融侵蚀图-成果丰硕
7月4日,水利部水土保持监测中心在成都组织召开《第一次全国水利普查成果查询及服务系统冻融侵蚀展示成果加工提炼》技术服务合同验收会,来自水利部水土保持监测中心、北京师范大学、中科院·水利部成都山地灾害与环境研究所、四川省水土保持生态环境监测总站、青海省水土保持局等单位的领导和专
细胞冻存与复苏的基本原则是快冻慢融,为什么
冻存的原则是:慢冻,主要是防止细胞在冷冻过程中形成冰晶,对细胞造成损害,加DMSO也是这个原理.复苏细胞的原则是:快融.主要是防止DMSO在液体状态下对细胞的毒害作用,快速使细胞进入复苏和生长状态.因此,细胞的冻存与复苏原则应该是慢冻快融.分别经过4度,-20度,-80度和液氮的依次过程进行冻存;经
细胞冻存与复苏的基本原则是快冻慢融,为什么
冻存的原则是:慢冻,主要是防止细胞在冷冻过程中形成冰晶,对细胞造成损害,加DMSO也是这个原理.复苏细胞的原则是:快融.主要是防止DMSO在液体状态下对细胞的毒害作用,快速使细胞进入复苏和生长状态.因此,细胞的冻存与复苏原则应该是慢冻快融.分别经过4度,-20度,-80度和液氮的依次过程进行冻存;经
细胞冻存与复苏的基本原则是快冻慢融,为什么
冻存的原则是:慢冻,主要是防止细胞在冷冻过程中形成冰晶,对细胞造成损害,加DMSO也是这个原理.复苏细胞的原则是:快融.主要是防止DMSO在液体状态下对细胞的毒害作用,快速使细胞进入复苏和生长状态.因此,细胞的冻存与复苏原则应该是慢冻快融.分别经过4度,-20度,-80度和液氮的依次过程进行冻存;经
液氮罐细胞冻存架的合理摆放
液氮罐细胞冻存架的合理摆放 液氮罐里面的细胞冻存架,相信不会陌生,在大口径的液氮罐里面,大多都会配上冻存架用来存放标本。我们在这里要说的是:冻存架与液氮罐的合理布置: 能够摆放冻存架子的博林牌液氮罐,口径在大多是125mm或者200,也有80mm口径的液氮罐,不过这种液氮罐里面的抽
简介液氮罐冻细胞的注意事项
1、当我们使用DMSO的时候,不能使用高压灭菌,因为它本身带有灭菌作用,如果再次高压灭菌会破坏分子结构,会降低冷冻保护效果。操作的过程中尽量带上手套,防止对人体造成危害。 2、我们冻存细胞的时候温度在0℃到-60℃的时候,不能时间过长,不然会影响细胞的活性。 3、多余冻存液可以4度低温保存。
LSCM液氮冷冻法
液氮冷冻法:成年小鼠和大鼠的脑及稍大一些的组织块也可采用此方法冷冻。将组织块置于样品台的 OCT中,为防止组织块爆裂,先在液氮中迅速浸提几次,时间从1s开始逐渐增加,直至样品温度与液氮温度平衡,之后移至冷冻切片机中,使温度与切片机箱体温度一致,进行冷冻切片。