DNA片段的回收实验——常规方法
实验材料NA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1. PAGE电泳,如EB染色的则在紫外灯下切下目的片断,如龈染或其他非放染色的则在关下切下目的片断。2. 用少量脱缓冲液I将目的片断胶条洗至一Eppendorf管中,用玻棒将凝胶捣碎,用150 ul 洗脱缓冲液II将玻棒上的凝胶洗至Eppendorf管中。3. 振荡后置于37℃3~5小时或过夜。4. 振荡后离心(10 000 g,10 min),取上清液,并再用200 ul 洗脱缓冲液II洗涤旧管,离心再取上清液。5. 合并两次上清液,乙醇+醋酸钠沉淀同前。......阅读全文
细胞培养常规方法
. 冻存细胞的复苏应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37。5度,取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内,约5ml左右,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养。2. 传代:对于贴壁细胞
快速检测常规采样方法
(1)散装食品①液体、半液体食品采样 以一池或一缸为一采样单位,即每一池或一缸采一份样本,采样前先检查样本的感官性状,然后将样本搅拌均匀后采样。如果池或缸太大,搅拌均匀有困难,可按池或缸的高度等距离分为上、中、下三层,在各层的四角和中间各取等量样本混合后,再取检验所需样本。对流动的液体样本,可定时
PCR产物常规纯化方法
大批量、廉价、用于测序的PCR产物纯化方法--PEG沉淀 最近,摸索了一下PEG沉淀PCR产物的方法,贴出来,与大家共享。 目的:探索一种方法,能将PCR产物大批量地、廉价地、纯度比较高地纯化出来,并且最好能去掉200bp以下的小片段DNA,用于DNA测序。 有文献和方法说,不同浓度的PEG能沉淀不
厌氧菌的常规培养方法
厌氧菌培养是可以生长在没有氧气条件下的生物,有些厌氧菌可以在有氧气条件下生产,属于兼性厌氧;有些甚至不能容忍微量氧气的环境;属于专性厌氧。厌氧菌是非常普通的;很多都是人体正常菌群的一部分,厌氧微生物转地球生物群的50%;在医疗系统感染中厌氧菌的检出率至少在65%以上。厌氧菌属于人体内主要的正常
常规细胞培养方法
原理 1 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱
常规红外样品制备方法
一、固体试样:常用的方法有压片法、石蜡糊法和薄膜法。 (1)压片法: 一般红外测定用的锭片为直径13 mm、厚度约1 mm左右的小片。取样品(约1 mg)与干燥的KBr(约200 mg)在玛瑙研钵中混和均匀,充分研磨后(使颗粒达到约2 μm),将混合物均匀地放入固体压片模具的顶模和底模之
分离方法之其它非常规方法
还有共沉淀、吸附、选择溶解、浮选、毛细管电泳、分子筛分离、富集技术和区域熔融等提纯手段。
水质监测常规分析方法
(1)容量法/自动滴定分析仪容量法也叫滴定法,它是根据指示剂的颜色变化指示滴定终点,然后目测标准溶液消耗体积,计算分析待测物含量的一种化学方法。滴定分析法根据反应原理可以分为氧化还原滴定法、络合滴定法、中和滴定法和沉淀滴定法四种。在水质分析中,常用容量法来分析的项目有CODcr、氯化物、CODmn、
亲和层析实验:常规方法
实验步骤一、亲和介质的选择亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过程中维持良好的流动特征。优选介质应具备便宜、易获取和使用简便的特点。
移液器的常规使用检查方法
常规使用检查常规使用检查前需要进行目视的检查,可能的情况下需要试一下移液器的操作是否有异常,是否有残液,是否可以逐滴排空,并且需要有记录。周期性检查1.目视检查需要用去离子水或蒸馏水进行测试,检查活塞按钮的功能、移动是否平顺、移液枪头是否有变形和液体残留,移取一定量液体,10秒内不得有液体的滴落。2
实验动物编号的常规方法
常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。(一)颜料涂染这种标记方法在实验室最常使用,也很方便。经常应用的涂染化学药品有:①、涂染红色:0.5%中性红或品红溶液。 ②、涂染黄色:3~5%苦味酸溶液。 ③、黑色:煤焦油的酒精溶液。 ④、涂染咖啡色:2%硝酸银溶液。标记时用毛笔或棉签蘸取上述
实验动物编号的常规方法
常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。(一)颜料涂染这种标记方法在实验室最常使用,也很方便。经常应用的涂染化学药品有:①、涂染红色:0.5%中性红或品红溶液。 ②、涂染黄色:3~5%苦味酸溶液。 ③、黑色:煤焦油的酒精溶液。 ④、涂染咖啡色:2%硝酸银溶液。标记时用毛笔或棉签蘸取上述
亲和层析实验:常规方法
实验步骤 一、亲和介质的选择 亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过
总钙测定的常规方法
总钙测定:血液总钙测定方法主要有原子吸收分光光度法、染料结合法和滴定法等。其中较普遍应用的是络合滴定法,其优点是操作简便,不需要特殊设备,用血量少,准确性符合要求原创。常用的指示剂有钙黄绿素与钙红。原子吸收分光光度法使用空气一乙炔焰,钙焰的光吸收特征是422.7nm较火焰光度法灵敏度高,但不适宜
热风循环烘箱的常规保养方法
热风循环烘箱目前市面上使用较广,全国范围内的保有量非常大。这么大量的烘箱每年都需要很多人力的投入维护,因为热风循环烘箱在使用过程中需要注意保养,过往经验告诉我们,定期进行保养的热风循环烘箱使用寿命比从不保养维护的热风循环烘箱平均要长1-2年。 下面我们就来简单介绍下热风循环烘箱的常规保养方法
DNA片段的回收实验——常规方法
实验材料NA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1. PAGE电泳,如EB染色的则在紫外灯下切下目的片断,如龈染或其他非放染色的则在关下切下目的片断。2. 用少量脱缓冲液I将目的片断胶条洗至一Eppendorf管中,用玻棒将凝胶捣碎,用1
常规处理SO2的方法
亚铵法:采用亚铵法处理SO2是用氨水吸收SO2,副产品亚铵。虽然亚铵法技术较成熟,但产生的副产品是液体状态的亚铵,产品的贮存运输都较困难,只适用于有氨源的小型冶炼厂。亚硫酸钠法:中小型的冶炼厂可采用亚硫酸钠法进行烟气脱硫。亚硫酸钠法是利用烧碱或纯碱吸收SO2,同时产生副产品亚硫酸钠。例如,上海冶炼厂
亲和层析实验:常规方法(三)
6.仿生配基大部分的亲和层析配基是天然存在的,其优点在于具有高度选择性和强结合能力,但也存在某些缺点。这种配基稳定性低,需要进行纯化,使用过程中批间差异大,易被其他生物分子污染,对灭菌方法敏感,并且成本高。为了克服这些局限性,加速亲和层析在治疗性蛋白质纯化中的应用, 仿生型配基 (biomime
亲和层析实验:常规方法(四)
2.配基吸附对于多肽、蛋白质或核酸,通常采用的共价吸附是, 通过胺反应将配基上的氨基吸附在树脂表面。溴化氰活化表面与伯胺发生反应形成亚胺碳酸盐是最常见的胺反应吸附。最典型的伯胺是赖氨酸侧链(Hermanson,1992;PorathetaU1%7)(详见第 28 章)。这种活化形式的优点在于可以使用
常规色谱柱的操作方法
安装1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳的连接效果
水质监测常规仪器分析方法
(1)水质多参数测量仪水质多参数测量仪主要测量包括温度、盐度、电导率、氯化物、深度、溶解氧、浊度、氧化还原电位、叶绿素、蓝绿藻等水质参数,这些要素能够根据实际测量需求任意筛选。水质多参数测量仪按其记录数据的形式不同分为直读式和自容式两大类。直读式水质仪主要由水上机和水下机组成,二者通过水密传输电缆连
水质常规监测项目及标准方法
(1)工业废水常规监测项目水温,臭,电导率,透明度,pH值,全盐量,色度,浊度,悬浮物,酸度,碱度,六价铬,总汞,金属(铜,锌,铅,镉,镍,铁,锰,铍,总铬,钾,钠,钙,镁,钡,钼,钴),总硬度,总砷,硒,溶解氧,氨氮,亚硝酸盐氮,硝酸盐氮,硫酸盐,总氮,总磷,氯化物,氟化物,总氰化物,硫化物,高锰
容量瓶常规使用方法
容量瓶主要用于准确地配制一定摩尔浓度的溶液。它是一种细长颈、梨形的平底玻璃瓶,配有磨口塞。瓶颈上刻有标线,当瓶内液体在所指定温度下达到标线处时,其体积即为瓶上所注明的容积数。一种规格的容量瓶只能量取一个量。常用的容量瓶有100、250、500、1000毫升等多种规格。 1.检漏: 使用前检查
亲和层析实验:常规方法(一)
一、亲和介质的选择亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过程中维持良好的流动特征。优选介质应具备便宜、易获取和使用简便的特点。亲和介质
临床化学检查方法介绍血常规
血常规介绍: 血常规是最一般,最基本的血液检验。血液由液体和有形细胞两大部分组成,血常规检验的是血液的细胞部分。血液有三种不同功能的细胞——红细胞(俗称红血球),白细胞(俗称白血球)、血小板。通过观察数量变化及形态分布,判断疾病。是医生诊断病情的常用辅助检查手段之一。血常规正常值: (1) 红细
亲和层析实验:常规方法(二)
二、配基的选择选择合适的配基,需要对配基和靶分子之间的天然相互作用有一定的认知及理解。靶分子与配基的相互作用必须是特异性结合,并且在不同的结合和洗脱条件下均应该稳定。此外,制订亲和纯化的方案时,需着重考虑能否购买到商品化配基,还是需要从头研制配基和介质。后者的成功在很大程度上取决于对蛋白质结构和相互
液相色谱泵常规维护方法
在高效液相色谱仪的日常保养中,柱塞后清洗,也是很重要的,尤其是流动相中含有缓冲盐,或者其他可凝固和可析出固体的情况下,柱塞后清洗尤为重要。以缓冲盐为例,经常时间使用的情况下,建议一周进行一次后柱塞后清洗:一般用纯水,或水中加10%的甲醇或者10%的乙腈。无论是国产还是进口的,只要是柱塞泵,都会有柱塞
临床化学检查方法介绍尿常规介绍
尿常规介绍: 尿常规是医学检验“三大常规”项目之一,不少肾脏病变早期就可以出现蛋白尿或者尿沉渣中有形成分。对于某些全身性病变以及身体其他脏器影响尿液改变的疾病如糖尿病、血液病、肝胆疾患、流行性出血热等的诊断,也有很重要的参考价值。同时,尿液的化验检查还可以反映一些疾病的治疗效果及预后。通过此项检查
常规无损检测法之涡流探伤方法
涡流探伤是由交流电流产生的交变磁场作用于待探伤的导电材料,感应出电涡流。如果材料中有缺陷,它将干扰所产生的电涡流,即形成干扰信号。用涡流探伤仪检测出其干扰信号,就可知道缺陷的状况。影响涡流的因素很多,即是说涡流中载有丰富的信号,这些信号与材料的很多因素有关,如何将其中有用的信号从诸多的信号中一一分离
常规无损检测法之渗透探伤方法
渗透探伤方法(PT)渗透探伤是利用毛细现象来进行探伤的方法。对于表面光滑而清洁的零部件,用一种带色(常为红色)或带有荧光的、渗透性很强的液体,涂覆于待探零部件的表面。若表面有肉眼不能直接察知的微裂纹,由于该液体的渗透性很强,它将沿着裂纹渗透到其根部。然后将表面的渗透液洗去,再涂上对比度较大的显示液(