Antpedia LOGO WIKI资讯

基因置换实验———步基因破坏法

基因置换是酵母研究中最有效和最重要的技术之一。这种技术能使一个在染色体正常位置的基因与其离体条件下构建的等位基因进行置换,使置换前后的菌株仅仅在这个特殊的等位基因上存在遗传差异。利用这种方法可以分析在基因克隆中由无效突变 (null mutationr) 或其他任何类型突变所引起的表型变化。无论在理论上或在实践中,一个被克隆的酵母基因均有可能发生突变,然后通过重组进入基实验材料酵母菌株7-1 BY4741质粒pFA6a-kanMX6试剂、试剂盒DNA 引物仪器、耗材YPD 平板SC-ura平板实验步骤......阅读全文

基因置换实验———步基因破坏法

基因置换是酵母研究中最有效和最重要的技术之一。这种技术能使一个在染色体正常位置的基因与其离体条件下构建的等位基因进行置换,使置换前后的菌株仅仅在这个特殊的等位基因上存在遗传差异。利用这种方法可以分析在基因克隆中由无效突变 (null mutationr) 或其他任何类型突变所引起的表型变化。无论在

基因置换实验

—步基因破坏法 两步基因置换法 质粒改组 构建融合蛋白             实验材料 酵母菌株7-1 BY4741

基因置换实验——质粒改组

实验材料 酵母菌株7-2 2404质粒pDB141pRG68 试剂、试剂盒 诱变的pDB141 DNA 仪器、耗材 YPD 平板HC-leu平板5-FOA平板 实验步骤 第 1 天 将菌株 7-2 在 YPD 平板上划线,30°C 培养。 第 3

基因置换实验——构建融合蛋白

实验材料菌株BY4741质粒PDB118试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液仪器、耗材YPD 平板YPD 液体培养基血球计数板SC-his平板实验步骤YPD 平板 第 1 天将菌株 7-3 在 YPD 平板上划单克隆,30°C 下培养两天。第 3 天挑取单克隆,在 5 mlYPD 液体培养基中培养,30°C 过

细胞型操作实验——用两步基因置换法进行交配型转换

实验材料 酵母菌株YSC006YSC005质粒pSC9pSC11 仪器、耗材 YPD 平板SC-ura平板产孢平板无菌绒垫SD 平板 实验步骤 第 1 天 把菌株 9-4 和 9-5 在 YPD 平板上划单克隆,于 30°C 下培养。1、2、3、4 组使用菌株

克隆化酵母DNA的操作实验——基因置换技术

实验材料酵母实验步骤一、整合性破坏1.  将基因的内部片段亚克隆到YIP载体。2.  在此内部片段中将质粒线性化。3.  继续整合性转化步骤3(见基本方案1)。二、基因破坏一步法1.  将合适的选择性基因亚克隆到目的基因上,必要时,可在亚克隆的同时引入一个缺失。2.  采用合适的限制性位点,从步骤1

酵母遗传学方法11:PCR介导基因破坏法

PCR介导基因破坏法1.反应混合物:5μl             10×Taq缓冲液5μl             25mmol/L MgCl22μl             10mmol/L dNTPs10~100ng         模板DNA25pmols          引物(每种引物)

“巨型真菌”破坏森林基因机理获解

  英国《自然·生态与演化》杂志近日发表论文,报告了蜜环菌四个物种的基因组。该研究成功揭示了这些真菌扩散并感染植物的基因机理,为制定策略以控制它们破坏森林提供了宝贵资源。   蜜环菌属囊括了地球上最大的陆生生物体以及最具破坏性的森林病原体。一个被称为“巨型真菌”的蜜环菌,个体覆盖面积达965公顷