基因置换实验———步基因破坏法

基因置换是酵母研究中最有效和最重要的技术之一。这种技术能使一个在染色体正常位置的基因与其离体条件下构建的等位基因进行置换,使置换前后的菌株仅仅在这个特殊的等位基因上存在遗传差异。利用这种方法可以分析在基因克隆中由无效突变 (null mutationr) 或其他任何类型突变所引起的表型变化。无论在理论上或在实践中,一个被克隆的酵母基因均有可能发生突变,然后通过重组进入基实验材料酵母菌株7-1 BY4741质粒pFA6a-kanMX6试剂、试剂盒DNA 引物仪器、耗材YPD 平板SC-ura平板实验步骤......阅读全文

基因置换实验———步基因破坏法

基因置换是酵母研究中最有效和最重要的技术之一。这种技术能使一个在染色体正常位置的基因与其离体条件下构建的等位基因进行置换,使置换前后的菌株仅仅在这个特殊的等位基因上存在遗传差异。利用这种方法可以分析在基因克隆中由无效突变 (null mutationr) 或其他任何类型突变所引起的表型变化。无论在理

基因置换实验

—步基因破坏法 两步基因置换法 质粒改组 构建融合蛋白             实验材料 酵母菌株7-1 BY4741

基因置换实验——质粒改组

实验材料酵母菌株7-2 2404质粒pDB141pRG68试剂、试剂盒诱变的pDB141 DNA仪器、耗材YPD 平板HC-leu平板5-FOA平板实验步骤第 1 天将菌株 7-2 在 YPD 平板上划线,30°C 培养。第 3 天挑一个丰满的菌株 7_2 菌落,接种到 5 mlYPD 培养液,30

基因置换实验——构建融合蛋白

实验材料菌株BY4741质粒PDB118试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液仪器、耗材YPD 平板YPD 液体培养基血球计数板SC-his平板实验步骤YPD 平板 第 1 天将菌株 7-3 在 YPD 平板上划单克隆,30°C 下培养两天。第 3 天挑取单克隆,在 5 mlYPD 液体培养基中培养,30°C 过

细胞型操作实验——用两步基因置换法进行交配型转换

实验材料酵母菌株YSC006YSC005质粒pSC9pSC11仪器、耗材YPD 平板SC-ura平板产孢平板无菌绒垫SD 平板实验步骤第 1 天把菌株 9-4 和 9-5 在 YPD 平板上划单克隆,于 30°C 下培养。1、2、3、4 组使用菌株 9-4;5、6、7、8 组使用菌株 9-5。第 3

基因破坏的概念

中文名称基因破坏英文名称gene disruption定  义一种基因操作技术,即借助同源重组技术,在基因组中造成定位损伤,以建立携带预定遗传缺陷的动物模型。应用学科免疫学(一级学科),概论(二级学科),免疫学相关名词(三级学科)

基因破坏的定义

中文名称基因破坏英文名称gene disruption定  义一种基因操作技术,即借助同源重组技术,在基因组中造成定位损伤,以建立携带预定遗传缺陷的动物模型。应用学科免疫学(一级学科),概论(二级学科),免疫学相关名词(三级学科)

克隆化酵母DNA的操作实验——基因置换技术

实验材料酵母实验步骤一、整合性破坏1.  将基因的内部片段亚克隆到YIP载体。2.  在此内部片段中将质粒线性化。3.  继续整合性转化步骤3(见基本方案1)。二、基因破坏一步法1.  将合适的选择性基因亚克隆到目的基因上,必要时,可在亚克隆的同时引入一个缺失。2.  采用合适的限制性位点,从步骤1

酵母遗传学方法11:PCR介导基因破坏法

PCR介导基因破坏法1.反应混合物:5μl             10×Taq缓冲液5μl             25mmol/L MgCl22μl             10mmol/L dNTPs10~100ng         模板DNA25pmols          引物(每种引物)

基因平均置换时间的概念

中文名称基因平均置换时间英文名称average gene substitution time定  义一个等位基因被另一个等位基因替换的平均世代数。应用学科遗传学(一级学科),进化遗传学(二级学科)

基因置换的概念和功能

基因置换就是用正常基因通过体内基因同源重组,原位替换病变细胞内的致病基因,使细胞内的DNA完全恢复正常状态。属于基因治疗的一种方法。

“巨型真菌”破坏森林基因机理获解

  英国《自然·生态与演化》杂志近日发表论文,报告了蜜环菌四个物种的基因组。该研究成功揭示了这些真菌扩散并感染植物的基因机理,为制定策略以控制它们破坏森林提供了宝贵资源。  蜜环菌属囊括了地球上最大的陆生生物体以及最具破坏性的森林病原体。一个被称为“巨型真菌”的蜜环菌,个体覆盖面积达965公顷,重达

“巨型真菌”破坏森林基因机理获解

  英国《自然·生态与演化》杂志近日发表论文,报告了蜜环菌四个物种的基因组。该研究成功揭示了这些真菌扩散并感染植物的基因机理,为制定策略以控制它们破坏森林提供了宝贵资源。   蜜环菌属囊括了地球上最大的陆生生物体以及最具破坏性的森林病原体。一个被称为“巨型真菌”的蜜环菌,个体覆盖面积达965公顷,

“自私的遗传因素”——超基因对基因组造成巨大破坏

罗切斯特大学的研究人员利用果蝇作为模型生物来研究分离失调(SD,Segregation Distorter ),这是一种自私的基因元素,使其遗传分离偏离孟德尔遗传分离规则,扭曲了公平遗传传递。“自私的基因元素”使人类基因组杂乱无章。它们似乎对寄主没有好处,而只是寻求自我繁殖,甚至会造成严重破坏。例如

多国现反转基因作物破坏活动

德国Gross Lüsewitz附近遭破坏的一处土豆试验田   德国的破坏者们摧毁了种植转基因(GM)小麦和土豆的两块试验田。其中一起事件发生在7月9日,在罗斯托克市附近的Gross Lüsewitz,6名头戴面具的袭击者制服了看守试验田的保安人员。他们随后摧毁了种植着具有抗真

酵母菌基因克隆实验——互补法

实验材料酵母菌实验步骤1.  用含LEU 2作为选择标志的酵母菌DNA文库转化lea 2 cdc 101-1酵母菌株,在23℃培养,依据插入片段的大小,筛选2 000~20 000个Leu+转化体。 2.  影印平板转化体,将其转印到预热的选择性平板,并于37℃培养筛选互补温感突变的表型。过夜培养之

基因突变的诱变机制碱基置换突变

可以通过两个途径即碱基结构类似物的参入和诱变剂或射线引起的化学变化来进行。① 类似物的参入 5-溴尿嘧啶(BU)是胸腺嘧啶的结构类似物。它只是在第5位碳原子上以溴原子代替了胸腺嘧啶的甲基(─GH3),并且因此更易以烯醇式出现。大肠杆菌在含有BU的培养基中培养后,细菌的 DNA中的一部分胸腺嘧啶被BU

“自私超基因”严重破坏遗传多样性

美国罗切斯特大学的生物学家首次使用群体基因组学来阐明一种被称为分离变相因子(SD)的“自私遗传元素”的进化和后果。发表在《eLife》杂志上的论文表明,SD已导致染色体组织和遗传多样性发生了巨大变化。 人类基因组中充斥着“自私”的遗传元素,这些元素似乎对宿主没有好处,而只是寻求自我繁殖。 研

基因组步移的应用介绍

①根据已知的基因或分子标记连续步移,获取人、动物和植物的重要调控基因,可以用于研究结构基因的表达调控。如分离克隆启动子并对其功能进行研究;②步查获取新物种中基因的非保守区域,从而获得完整的基因序列;③鉴定T-DNA或转座子的插入位点,鉴定基因枪转基因法等转基因技术所导致的外源基因的插入位点等;④用于

转基因技术核移植转基因法

  体细胞核移植是一种转基因技术。该方法是先把外源基因与供体细胞在培养基中培养,使外源基因整合到供体细胞上,然后将供体细胞细胞核移植到受体细胞——去核卵母细胞,构成重建胚,再把其移植到假孕母体,待其妊娠、分娩,便可得到转基因的克隆动物。

基因合成实验

基因合成可应用于:(1)代谢通路合成;(2)基因网络构建;(3)疫苗设计。难度系数  2.0共2人点评打分点评实验,有机会获丁当奖励 +收藏 8人收藏基因合成实验标签: 基因 合成基因合成可应用于:(1)代谢通路合成;(2)基因网络构建;(3)疫苗设计。基因合成实验实验方法原理基因合成是指在体外人工

基因合成实验

基因合成可应用于:(1)代谢通路合成;(2)基因网络构建;(3)疫苗设计。实验方法原理基因合成是指在体外人工合成双链DNA分子的技术,与寡核苷酸合成有所不同:寡核苷酸是单链的,所能合成的最长片段仅为100nt左右,而基因合成则为双链DNA分子合成,所能合成的长度范围50bp-12 kb。基因合成是用

基因合成实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 dNTPDAN聚合酶乙醇TE限制性内切核酸酶缓冲液仪器、耗材 水浴锅培养箱实验步骤 1.  将两种寡核苷酸各1 μg加入微量离心管中,加水至17 μl,再加2 μl 的10×测序酶缓冲液。70℃加热5 min,然后在合适的退火温度下保温5  min,取2 μl 留待以后

基因合成实验

            实验方法原理 基因合成是指在体外人工合成双链DNA分子的技术,与寡核苷酸合成有所不同:寡核苷酸是单链的,所能合成的最长片段仅为100nt左右,而基因合成则为双链DNA分子合成,所能合成的长度范围50bp-12 kb。基因合成是用人工方法合

基因互补实验

实验方法原理互补作用可以用来确定两个突变是属于同一基因还是属于不同的基因。如果是同一基因内两个不同位点的突变,它们就不能互补;如果是不同基因的突变则是互补的,此为基因间互补。有时同一基因内的两个突变位点也能发生基因内互补,但基因内互补所恢复的酶活性一般最多只有野生型酶活性的25%,而基因间互补则为1

基因互补实验

实验方法原理 互补作用可以用来确定两个突变是属于同一基因还是属于不同的基因。如果是同一基因内两个不同位点的突变,它们就不能互补;如果是不同基因的突变则是互补的,此为基因间互补。有时同一基因内的两个突变位点也能发生基因内互补,但基因内互补所恢复的酶活性一般最多只有野生型酶活性的25%,而基因间互补则为

有机物破坏法

  在食品的加工生产中,为了使食品保持特有的色泽,常加入漂白剂,依靠其所具有的氧化或还原能力来抑制,破坏食品的变色因子,使食品褪色或免于发生褐变。一般在食品的加工过程中要求漂白剂除对食品的色泽有一定作用外,对食品的品质、营养价值及保存期均不应有不良的改变。   漂白剂从作用机理分为两类:(1)还原

有机物破坏法

食品中重金属的分析和其他分析一样,关键在于如何将重金属从其他干扰其测定的物质中分离出来。一般是用湿法灰化或干法灰化的手段将食品中的有机物破坏、除去,至于湿法或干法的选择,要以不致丢失所要分析的对象为原则。食品中的微量元素,多数以结合的形式存在于有机物中,我们在分析和测定这些元素时,需将这些元素从有机