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基因置换实验

—步基因破坏法 两步基因置换法 质粒改组 构建融合蛋白 实验材料 酵母菌株7-1 BY4741 质粒pFA6a-kanMX6 试剂、试剂盒 DNA 引物 仪器、耗材 YPD 平板 SC-ura平板 实验步骤 ......阅读全文

基因置换实验

—步基因破坏法 两步基因置换法 质粒改组 构建融合蛋白             实验材料 酵母菌株7-1 BY4741

基因置换实验——质粒改组

实验材料酵母菌株7-2 2404质粒pDB141pRG68试剂、试剂盒诱变的pDB141 DNA仪器、耗材YPD 平板HC-leu平板5-FOA平板实验步骤第 1 天将菌株 7-2 在 YPD 平板上划线,30°C 培养。第 3 天挑一个丰满的菌株 7_2 菌落,接种到 5 mlYPD 培养液,30

基因置换实验———步基因破坏法

基因置换是酵母研究中最有效和最重要的技术之一。这种技术能使一个在染色体正常位置的基因与其离体条件下构建的等位基因进行置换,使置换前后的菌株仅仅在这个特殊的等位基因上存在遗传差异。利用这种方法可以分析在基因克隆中由无效突变 (null mutationr) 或其他任何类型突变所引起的表型变化。无论在理

酵母菌基因克隆实验

实验材料 酵母菌实验步骤 1.  用含LEU 2作为选择标志的酵母菌DNA文库转化lea 2 cdc 101-1酵母菌株,在23℃培养,依据插入片段的大小,筛选2 000~20 000个Leu+转化体。 2.  影印平板转化体,将其转印到预热的选择性平板,并于37℃培养筛选互补温感突变的表型。过

基因平均置换时间的概念

中文名称基因平均置换时间英文名称average gene substitution time定  义一个等位基因被另一个等位基因替换的平均世代数。应用学科遗传学(一级学科),进化遗传学(二级学科)

基因置换的概念和功能

基因置换就是用正常基因通过体内基因同源重组,原位替换病变细胞内的致病基因,使细胞内的DNA完全恢复正常状态。属于基因治疗的一种方法。

基因置换实验——构建融合蛋白

实验材料菌株BY4741质粒PDB118试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液仪器、耗材YPD 平板YPD 液体培养基血球计数板SC-his平板实验步骤YPD 平板 第 1 天将菌株 7-3 在 YPD 平板上划单克隆,30°C 下培养两天。第 3 天挑取单克隆,在 5 mlYPD 液体培养基中培养,30°C 过

酵母菌基因克隆实验——互补法

实验材料酵母菌实验步骤1.  用含LEU 2作为选择标志的酵母菌DNA文库转化lea 2 cdc 101-1酵母菌株,在23℃培养,依据插入片段的大小,筛选2 000~20 000个Leu+转化体。 2.  影印平板转化体,将其转印到预热的选择性平板,并于37℃培养筛选互补温感突变的表型。过夜培养之

酵母菌基因组DNA的提取实验

基本方案             实验材料 酵母菌 试剂、试剂盒