痘苗病毒储液制备——噬斑分析测定滴度
实验方法原理经胰酶作用的系列稀释病毒储液常被用于感染适当的细胞系。经过几天的培养后，吸出培养基，将细胞用结晶紫染色。由于感染细胞变缩、变圆和脱落，形成直径 1～2 mm 颜色较淡的噬斑。实验材料生长良好的贴壁培养的单层 BSC-1 细胞病毒储液试剂、试剂盒0.1% 结晶紫（溶于 20% 乙醇）仪器、耗材6 孔 35 mm2 组织培养板实验步骤1. 胰酶消化汇片生长的单层 BSC-1 细胞（见「细胞培养实验」基本方案 1 步骤 4～7）。2. 用血细胞计数器对细胞进行计数。3. 将 5 × 105 个/孔 BSC-1 细胞加入 2 ml 完全 MEM-10 培养基在 6 孔的 35 mm2 组织培养板中培养，放入 5% CO2 加湿培养箱中 37°C 培养过夜，直到细胞生长至汇片。4. 胰酶处理病毒储液（见基本方案 步骤 4）。5. 用完全 MEM-2.5 培养基对胰酶处理后的病毒储液进行 9 次 1......阅读全文
T7RNA聚合酶系统基因表达实验
两种重组痘苗病毒共感染细胞 单病毒感染OST7-1细胞 利用VOTE系统 实验方法原理 含有 pT7 控制的外源基因（「痘苗病毒系统基
痘苗病毒系统基因表达实验
重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染 两种重组痘苗病毒共感染细胞 实验方法原理 本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质
噬斑扩增实验
实验方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。 实验材料 重悬重组噬斑 贴壁生长良好的
噬斑扩增实验
实验方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。实验材料 重悬重组噬斑贴壁生长良好的细胞HeLa S3 细胞试剂、试剂盒 完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培养基筛选试剂（麦考酚酸 黄嘌呤／次黄嘌呤）5-溴脱氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇仪器、耗材
噬斑扩增实验
实验方法原理痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。实验材料重悬重组噬斑贴壁生长良好的细胞HeLa S3 细胞试剂、试剂盒完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培养基筛选试剂（麦考酚酸 黄嘌呤／次黄嘌呤）5-溴脱氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇仪器、耗材杯状超
痘苗病毒系统基因表达实验
实验方法原理 本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质粒载体开始，然后用重组质粒通过脂质体介导转染已经被vTF7-3（可以持续表达T7 RNA聚合酶的痘苗病毒）感染的细胞。收获后，基因产物在细胞内的表达可以用脉冲标记的方法或用「重组痘苗病毒及其产物的鉴定实验」中叙述的方法分
痘苗DNA检测实验——Southern－杂交法
实验方法原理以前，用 HindIII 限制性内切核酸酶消化鉴定痕苗病毒 DNA。大部分的外源基因插入重组病毒的 TK 基因中，TK 基因位于 HindIII 5.1 kb 的 J 片段上。这样在重组病毒中，如果插入片段上没有 HindIII 内切酶位点，则J片段就会增大。如果缺乏 HindIII 5
痘苗病毒系统基因表达实验（二）
实验方法原理含有 pT7 控制的外源基因（本实验「重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染」）的重组质粒，通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此病毒储液与 vTF7-3 共同感染贴壁或悬浮细胞，在培养过程中，外源基因被高效的 T7 RNA 聚合酶转录，并在感染细胞的细胞质完成
昆虫细胞共转染实验
基本方案 用线性化杆状病毒DNA 实验方法原理 实验材料 草地夜蛾（Sf 9）细胞
昆虫细胞共转染实验
实验方法原理 实验材料 草地夜蛾（Sf 9）细胞含目的基因的重组杆状病毒转移质粒阳性对照载体：pVL 1392 - XylE试剂、试剂盒 ORF 1629 缺失的线性 AcMNPV DNA转染缓冲液 B转染缓冲液A500 mmol／L 儿茶酚／50 mmol／L 硫酸氢钠仪器、耗材 含 10％ 胎牛
昆虫细胞共转染实验
实验材料草地夜蛾（Sf 9）细胞含目的基因的重组杆状病毒转移质粒阳性对照载体：pVL 1392 - XylE试剂、试剂盒ORF 1629 缺失的线性 AcMNPV DNA转染缓冲液 B转染缓冲液A500 mmol／L 儿茶酚／50 mmol／L 硫酸氢钠仪器、耗材含 10％ 胎牛血清（FBS）的 T
病毒透射电镜病毒标本制备实验——悬滴标本法
实验方法原理病毒等微小颗粒标本可取其培养物经稀释或分离提纯后直接滴于附有支持膜的载网上用电镜观察。实验材料病毒试剂、试剂盒稀释液仪器、耗材透射电镜实验步骤悬液应尽量除去杂质如培养基残渣，细胞碎片、糖类及各种盐类的结晶等，这些杂质的存在会干扰染色及电镜观察。用该法的缺点是由于电子穿透能力很弱，只能观察
氧氟沙星滴耳液的含量测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液精密量取本品2ml(约相当于氧氟沙星6mg),置50ml量瓶中,用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀对照品溶液、色谱条件、系统适用性溶液、系统适用性要求与测定法见氧氟沙星含量测定项下
pfu及噬菌体滴度测定方法
pfu指的是噬菌体的空斑形成单位。以下是关于测定M13效价的一个方法：测定噬菌体滴度只有当噬菌体的感染复度MOI (multiplicity of infection)值远低于1时（即细胞过量时），噬菌斑的数量才会随着加入噬菌体的量而呈线性增加。正因如此，建议检测噬菌体贮液的滴度时，在感染前进行
噬菌体滴度的测定的方法
在宿主细胞过量的情况下，噬斑的数量随着噬菌体的增加呈线性增加。由于这个原因，在感染以前，要将噬菌体进行稀释，而不是将宿主细胞稀释。以低MOI(感染重复性)铺板，也可确保每一个噬斑仅包含一个DNA 序列。材料和试剂1. 微波炉2. LB/IPTG/Xgal培养 板3. lb培养基4. 顶层琼脂糖凝胶操
噬菌体滴度的测定的方法
在宿主细胞过量的情况下，噬斑的数量随着噬菌体的增加呈线性增加。由于这个原因，在感染以前，要将噬菌体进行稀释，而不是将宿主细胞稀释。以低MOI(感染重复性)铺板，也可确保每一个噬斑仅包含一个DNA 序列。材料和试剂1. 微波炉2. LB/IPTG/Xgal培养 板3. lb培养基4. 顶层琼脂糖凝胶操
关于琥珀密码子的基本介绍
琥珀密码子（amber codon）指mRNA的多核苷酸链中的终止密码子（UAG），它引起蛋白质翻译的中止。这个名字的由来是因为这个密码子是在大肠杆菌噬菌体T4的“琥珀型”突变种中发现的，T4突变种的发现者是德国人H.Bernstein，而Bernstein这个姓在德语中意为“琥珀”。当mRNA
噬菌体克隆的纯化实验
噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的细菌病毒的总称，作为病毒的一种，噬菌体具有病毒特有的一些特性：个体微小；不具有完整细胞结构；只含有单一核酸。噬菌体基因组含有许多个基因，但所有已知的噬菌体都是在细菌细胞中利用细菌的核糖体、蛋白质合成时所需的各种因子、各种氨基酸和能量产生系统来实现其自身
滴度的概念
滴度，是一种表述浓度的用词，通常在化学，病理学和免疫学中使用。滴度是稀释度的倒数。病毒滴度即病毒悬液的浓度，又称病毒的效价，噬菌斑形成单位数或感染中心数，就是指pfu的数值。
抗体滴度定义
打个比方，通过间接库姆伯斯试验（indirect Coombs test）检测一个孕妇血清中anti-Rh 抗体。一个患者可能报告通过此试验检出的抗体滴度为16，这表示只要血清的稀释度不超过1/16（1份比例的血清和15份比例的稀释液），此试验都能得到阳性结果，即可识别出抗原。如果稀释度超过1/
氯霉素滴耳液的含量测定方法
含量测定照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液精密量取本品适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含氯霉素0.1mg的溶液对照品溶液、系统适用性溶液、色谱条件、系统适用性要求与测定法见氯霉素含量测定项下。
养多细胞皿数会提高慢病毒滴度吗
上清液滴度是一样的，因为你养的皿数多了，培养基体积也相应的增加了，如果浓缩的话肯定对滴度提高是有帮助的。ps：慢病毒滴度主要与细胞状态、质粒质量、转染效率相关性比较大，在这三个因素都比较好的情况下提高皿数更有利于滴度的提高。如果本身出毒量比较低，只是提高皿数成本比较高。
进口胎牛血清对细胞及病毒滴度的影响
进口胎牛血清是妊娠后期未出生的剖腹取胎牛的血清。胎牛血清营养成分完全而丰富，代谢产物极少，微生物感染的可能性zui小，品质zui高，是组织细胞培养和病毒增殖培养的重要营养来源。 血清是一种成分复杂的混合物，不同批次血清对细胞生长的促进作用不同大规模细胞培养中由血清引起的细胞生长状态不佳及病毒滴
噬斑的概念
噬斑是在固体培养基上由一个噬菌体复制增殖并裂解宿主菌后形成的溶菌空斑，不同噬菌体噬斑的形态大小不尽相同。通过噬斑计数，可以测定一定体积内的噬菌体单位数目，即噬菌体的数量。
关于链霉素滴鼻液的含量测定介绍
精密量取链霉素滴鼻液20ml，置水浴上浓缩至稠膏状，加硅藻土适量，研匀，烘干，研细，加甲醇80ml，水浴回流提取30分钟，滤过，滤渣再加甲醇60ml继续回流提取30分钟，滤过，滤渣及滤器用甲醇50ml洗涤，合并滤液和洗液，回收溶剂至干，残渣加水20ml溶解，以水饱和的正丁醇提取3次，每次20ml
盐酸林可霉素滴耳液的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。对照品溶液取林可霉素对照品适量,精密称定,加流动相定量稀释成每1ml中约含林可霉素1mg的溶液,摇匀。供试品溶液、色谱条件与系统适用性要求见林可霉素B项下。测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算供试品中C18H
便携式液滴形状分析仪
一键式操作，一秒出结果全自动，易于操作设计坚固，是可以信赖的实验室仪器功能简介：* 液滴和固体的静态接触角、动态接触角（前进角和后退角）* 分析固体表面的表面能，及其极性和色散力组成和分布应用领域：* 测量大型工件和成品，例如汽车零部件 * 进行喷涂或粘合前固体材料的润湿性测量 * 表面预
梅毒滴度的概念
梅毒滴度的概念是：梅毒滴度是梅毒血清血检查是检查血清中抗体的点子，滴度的高低就是反应患者血清中抗体的多少。 梅毒滴度患者是唯一的传染源。性接触传染占95%。关键通过性交由破损处传染，梅毒滴度螺旋体好多存在于皮肤粘膜伤害外貌，也见于唾液、乳汁、精液、尿液中。未经治疗的患者在劝化梅毒滴度一年内最具
什么是抗体滴度
抗体滴度用来衡量某种抗体（antibody)识别特定抗原决定部位(epitope)所需要的最低浓度（也即最大稀释度)。一般表示为：仍能产生阳性结果的最大稀释度。通常通过ELISA方法来检测抗体滴度。
慢病毒包装试剂盒包出病毒的滴度一般是多少
过表达慢病毒＞10^8 PFU/ml干扰慢病毒＞10^8 PFU/ml