痘苗病毒储液制备——噬斑分析测定滴度
实验方法原理经胰酶作用的系列稀释病毒储液常被用于感染适当的细胞系。经过几天的培养后，吸出培养基，将细胞用结晶紫染色。由于感染细胞变缩、变圆和脱落，形成直径 1～2 mm 颜色较淡的噬斑。实验材料生长良好的贴壁培养的单层 BSC-1 细胞病毒储液试剂、试剂盒0.1% 结晶紫（溶于 20% 乙醇）仪器、耗材6 孔 35 mm2 组织培养板实验步骤1. 胰酶消化汇片生长的单层 BSC-1 细胞（见「细胞培养实验」基本方案 1 步骤 4～7）。2. 用血细胞计数器对细胞进行计数。3. 将 5 × 105 个/孔 BSC-1 细胞加入 2 ml 完全 MEM-10 培养基在 6 孔的 35 mm2 组织培养板中培养，放入 5% CO2 加湿培养箱中 37°C 培养过夜，直到细胞生长至汇片。4. 胰酶处理病毒储液（见基本方案 步骤 4）。5. 用完全 MEM-2.5 培养基对胰酶处理后的病毒储液进行 9 次 1......阅读全文
液滴宽度法
液滴高度/宽度法运用圆方程式来拟合液滴的轮廓形状，从而计算出接触角。由于此方法假定了液滴（截面）的形状为圆的一部分，所以其适用范围只限于球状或接近球状的液滴。由于重力的影响，严格地讲，液滴的形状都偏离球型：偏离的程度随液滴的体积增大而增大；在同样的体积下，液体的比重越大，表面张力越小，偏离的幅度也越
慢病毒包装试剂盒包出病毒的滴度一般是多少
过表达慢病毒＞10^8 PFU/ml干扰慢病毒＞10^8 PFU/ml
病毒的培养检测
病毒研究的发展常常与病毒培养和检测方法的进步有密切的关系，特别在脊椎动物病毒方面，小鼠和鸡胚接种、组织培养、超速离心、凝胶电泳、电子显微镜和免疫测定等技术，对病毒学的发展具有深刻的影响。 噬菌体的培养和检测方法最为简单。将噬菌体接种到易感细菌的肉汤培养物中，经18～24小时后，混浊的培养物重新
基因导入的生物学法
主要通过构建病毒载体来完成。 1 逆转录病毒（retrovirus，Rv) 构建简单，装载外源基因容量最大达8kb，整合入宿主细胞基因组而无病毒蛋白表达。但仅能感染分裂期细胞，体外制备滴度较低，且其随机整合有引起“插入性突变”的可能。 2 腺病毒（adenovirus,Adv) 为近年肝
杆状病毒毒种贮液的制备
实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 胎牛血清重组病毒仪器、耗材 培养箱培养瓶转子实验步骤 从单层培养中制备： 1a. 以毎瓶1.8×107 Sf9细胞的密度，将细胞接种于两个150 cm2 培养瓶，在含10%胎牛血清的完全培养液中培养。于27℃让细胞贴壁3 h，然后移去完全培养液。以感染复数为
利巴韦林滴鼻液的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液精密量取本品适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含利巴韦林50g的溶液。系统适用性要求见利巴韦林含量测定项下。利巴韦林峰与抑菌剂峰的分离度应符合规定。对照品溶液、色谱条件与测定法见利巴韦林含量测定项下。
细菌透射电镜样品制备实验滴液法＋负染法
实验方法原理由于生物样品主要由碳、氢、氧、氮等元素组成，散射电子的能力很低，在电镜下反差小。所以在进行电镜的生物样品制备时通常还须采用重金属盐染色或金属喷镀等方法来增加样品的反差，提高观察效果。负染色法就是用电子密度高，本身不显示结构且与样品几乎不反应的物质（如磷钨酸钠或磷钨酸钾）来对样品进行「染色
细菌透射电镜样品制备实验——滴液法＋负染法
透射电镜样品的制备方法很多。其中滴液法，或在滴液法基础上发展出来的其他类似方法如直接贴印法、喷雾法等主要被用于观察病毒粒子细菌的形态及生物大分子等。由于生物样品散射电子的能力很低，所以通常还须采用重金属盐染色或金属喷镀等方法来增加样品的反差，提高观察效果。负染色法由于操作简单，目前在进行透射电镜生物
液滴微流控：如何保证液滴的稳定性
液滴，因其微型化及高通量的特性，已成为一种用于微生物培养的有力工具，但在液滴中进行微生物的长期培养时，微生物的生长（生长速度及形态）及其分泌的各种代谢物，均会对液滴的稳定性造成一定的影响，可能会出现液滴“破裂”或者液滴互相融合现象，此外，部分微生物的生长对微环境特别敏感，液滴失去稳定性，便意味着我们
痘苗DNA检测实验——PCR－法
除了 PCR 和 Southern 杂交可以检测病毒 DNA 外，也可以利用 DNA 点迹杂交方法检测在分离的噬斑中的重组病毒。本实验主要介绍用这3种方法来检测痘苗DNA。实验材料贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞重组病毒噬斑悬液试剂、试剂盒PBS胰酶／EDTA干冰／乙醇
琼脂板上裂解性感染实验
λ噬菌体重组体编码的融合蛋白可通过大肠杆菌株 Y1089 溶源化菌落来制备。但从大量单个噬菌斑制备溶源菌工作量大，且并不一定每次成功（Huynh et al.1985)。另外，裂解性噬菌体感染可通过软琼脂（本方案）或液体培养（方案 9) 获得。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕
噬菌体克隆的纯化实验
实验材料 噬菌体试剂、试剂盒 LB顶层琼脂糖氯仿SMMgSO4仪器、耗材 培养箱牙签硝酸纤维素膜实验步骤 1. 在直径82 mm LB平极上倒入含200 μl 宿主菌的3 ml 0.7%顶层琼脂糖，放置10 min。 2. 通过放射自显影胶片上的杂交斑点确定阳性噬斑在原平板上的位置，用牙签轻轻插
噬菌体克隆的纯化实验
基本方案 实验材料 噬菌体 试剂、试剂盒
氯霉素滴耳液
性状本品为无色至微黄色的黏稠澄清液体鉴别(1)取本品约1ml,照氯霉素项下的鉴别(1)试验,显相同的反应(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。检查有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液精密量取本品适量,用流动相定量稀释制成每1
液滴高度/宽度法
液滴高度/宽度法运用圆方程式来拟合液滴的轮廓形状，从而计算出接触角。由于此方法假定了液滴（截面）的形状为圆的一部分，所以其适用范围只限于球状或接近球状的液滴。由于重力的影响，严格地讲，液滴的形状都偏离球型：偏离的程度随液滴的体积增大而增大；在同样的体积下，液体的比重越大，表面张力越小，偏离的幅度也越
滴液漏斗的概述
滴液漏斗是一种便于添加液体，并且在添加液体时不会有气体泄漏，可以通过控制滴液的速率来控制反应速率的漏斗，也可装在反应装置上,作滴加料液之用。 便于添加液体.并且在添加液体时不会有气体泄漏. 可以通过控制滴液的速率来控制反应速率. 实际上就是恒压的分液漏斗，可以不像分液漏斗那样需要另外的操作
TrueDrop™－真实液滴法
传统的光学接触角测量方法，包括现在市场上的测量仪器提供的和学术、研究领域使用的测量方法， 除基于多项式或B-Spline曲线（注）的切线法外，几乎都以假设液滴的轮廓符合一定的数学模型，而且均为轴对称的数学模型为前提。DropMeter软件提供的广义两次曲线法虽然容许液滴呈现非对称，但其数学模型本身仍
液滴微流控
加拿大液滴微流控和芯片实验室研究会主席，滑铁卢大学（University of Waterloo）机械与机电工程系教授Carolyn Ren博士，将在会议上发表关于一种高通量筛选分析使能技术——液滴微流控的主题演讲。她将描述几个运用纳升尺寸液滴进行高通量筛选的应用案例。Ren博士的实验室评估了气-液
痘苗DNA检测实验
实验方法原理 实验材料 贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞重组病毒噬斑悬液试剂、试剂盒 PBS胰酶／EDTA干冰／乙醇DNA 提取缓冲液乙酸钠乙醇PCR 扩增缓冲液引物完全 MEM-10、MEM-2.5 和 MEM-5 培养基完全 MEM-10／BrdU 培养基筛选试剂4
痘苗DNA检测实验
PCR 法 斑点杂交法 Southern 杂交法 实验方法原理 实验材料
怎么固定储液器？
储液器各部件间一般采用钎焊的连接方式固定。因为钎焊是采用液相温度（熔点）比母材固相温度低的金属材料作为钎料，将零件和钎料加热到钎料熔化，利用液态钎料润湿母材，填充接头间隙并与母材相互溶解和扩散而实现连接零件的方法。 钎焊的优点 a)、钎焊接头平整光滑，外形美观。 b)、钎焊加热温度较低，对
液滴微流控：在液滴中培养大肠杆菌
已有研究表明，使用氟化油进行油包水液滴制备，可用于长期细胞培养[1]，相较矿物油，氟化油表现出更好的生物相容性[2]，但要找到一种有效稳定液滴的表面活性剂，仍是一个挑战。本研究的目的是：通过在液滴中培养大肠杆菌（Escherichia coli），说明新型表面活性剂dSURF的生物相容性及液滴稳定表
杆状病毒毒种贮液的制备实验
杆状病毒是一类具有囊膜包裹的双链环状DNA病毒，其基因组大小为80~180 kb，在自然界中以节肢动物作为专一性宿主进行感染和传播。实验材料杆状病毒试剂、试剂盒胎牛血清重组病毒仪器、耗材培养箱培养瓶转子实验步骤从单层培养中制备： 1a. 以毎瓶1.8×107 Sf9细胞的密度，将细胞接种于两个15
盐酸萘甲唑林滴鼻液的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液精密量取本品5ml(0.1%规格)或10ml(0.05%规格),置50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀对照品溶液取盐酸萘甲唑啉对照品约25mg,精密称定,置50ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置25ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇
盐酸萘甲唑林滴鼻液的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液精密量取本品5ml(0.1%规格)或10ml(0.05%规格),置50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀对照品溶液取盐酸萘甲唑啉对照品约25mg,精密称定,置50ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置25ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇
盐酸赛洛唑啉滴鼻液的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液精密量取本品适量,用水定量稀释制成每lml中约含盐酸赛洛唑啉50μg的溶液对照品溶液取盐酸赛洛唑啉对照品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含50gg的溶液系统适用性溶液、色谱条件与系统适用性要求见杂质Ⅰ项下测定法精密量取供试品溶液与对照
盐酸麻黄碱滴鼻液的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液精密量取本品适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含30g的溶液。对照品溶液取盐酸麻黄碱对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含30g的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾6.8g,三乙胺5m
盐酸羟甲唑啉滴鼻液的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品,即得。对照品溶液精密称定盐酸羟甲唑啉对照品适量,加流动相溶解并定量稀释制成每1m中含0.5mg的溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇水-三乙胺-磷酸(550:450:5:1.5)(用磷酸或三乙胺调节pH值至7.3)为流动相;检测波长
如何利用新型固定床生物反应器开发高产量活病毒疫...2
2.5. 病毒收获收获原液通过由Sartopure PP38μm过滤器和Sartopore 2 0.8/0.45μm过滤器组成的两步深层过滤器链，收集进入二级容器。在运行4中，罐初步清空后，生物反应器用额外的1L新鲜培养基润洗，以冲洗掉固定床中所有残料的病毒颗粒。该冲洗液通过深层过滤器，以TFF
液滴微流控：单细胞高通量液滴测序（Dropseq）
细胞是生物结构与功能的基本单位，形态类型千差万别。通过细胞基因组学，可以描述细胞特性及功能，本文所介绍的单细胞（single-cell）高通量液滴测序（Drop-seq）技术，是一种快速分析成千上万个单细胞的方法，通过将每个细胞包裹在纳升级微滴中，进行RNA杂交并生成mRNA转录物，制作细胞基因表达