大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验——离心法
对于某些用途来说(如体内感染细胞),有必要浓缩反转染病毒原液以增加其滴度。如果想要用不编码可选择标记的病毒感染一群细胞,必须用髙滴度的病毒。操作中需用几百毫升至几升的产毒细胞上清。实验材料病毒细胞试剂、试剂盒小牛血清仪器、耗材滤器转子实验步骤1. 将产病毒细胞按1:10或1:20从刚生长汇片的细胞分传至20~50个10 cm 培养皿中,培养细胞至50%~90%汇片。2. 弃去培养液,轻轻加入半量的培养液,注意培养液碱性不要过大,培养2~3天。 3. 收取上清,用0.45 μm 的滤器过滤,贮存于-70℃或-80℃,或马上进行滴定和浓缩。 4. 滴定病毒原液。 5. 对于大体积病毒原液,用无菌的250 ml 离心瓶和JA-14转子在4℃,25 000 g 离心20 min,对于小体积的病毒原液,用SW-27或SW-41Ti转子20 000 r......阅读全文
差速离心法
差速离心法指分步改变离心转速或向速崎低速离心交替进行,选用大小不向的离心力使具备不同质量、不同沉降系数的微小颗粒(粒子或大分子)从混合的悬浮液中分批沉降而进行分离的力法。该方法适用于在悬浮液中的样品颗粒之间重量存在较大差别,更准确地说是沉降系数的差别在一个到几个数量级的混合样品的分离。重量或S值的差
超速离心法纯化病毒实验——差速离心法
实验方法原理不同大小和比重的粒子在沉降速度上存在差别,沉降速度差别(相差)在一个或几个数量级的粒子,可用本法分离提取。实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒无仪器、耗材差速离心机实验步骤将被分离的样品交替进行低速离心与高速(或超速)离心。差速离心适用于从组织培养液、鸡胚尿囊液或经过红细胞吸附-释放的病毒悬
离型膜特点
一、具有防潮,耐温等特点。硅油具有一定的耐温性,根据产品的使用,以及国产和进口硅油的使用具体耐温性也有所差别。一般正常可以耐到150度左右。超重离型膜厂家二、耐腐蚀性,磨砂膜电尽缘性(尤其高频尽缘性)优良,可以氯化,辐照改性,可用玻璃纤维增强,低压聚乙烯的熔点,刚性,硬度和强度较高,吸水性小,有良好
双抗体夹心法简介
双抗体夹心法,是将含有已知抗体的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里,洗涤一次;加待测抗原,如两者是特异的,则发生结合,然后把多余抗体洗除;加入与待测抗原呈特异反应的酶联抗体,使形成“夹心”;加入该酶的底物,若看到有色的酶解产物产生,说明在孔壁上存在相应的抗原。
ELISA双抗体夹心法
操作步骤 1.包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵
差速离心法使用介绍
差速离心法指分步改变离心转速或向速崎低速离心交替进行,选用巨细不向的离心力使具备不同质量、不同沉降系数的细小颗粒(粒子或大分子)从混合的悬浮液中分批沉降而进行别离的力法。该办法适用于在悬浮液中的样品颗粒之间重量存在较大差别,更精确地说是沉降系数的差别在一个到几个数量级的混合样品的别离。重量或S值的差
双抗体夹心法介绍
双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。那么,为什么双抗体夹心法是检测抗原*常用的方法?1、将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。 2、加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗
远距[离]分泌的概念
中文名称远距[离]分泌英文名称telecrine定 义大多数激素经血液运输至远距离的靶组织而发挥作用的分泌方式。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),激素与维生素(二级学科)
离体蛙心脏灌流
实验概要1.学习蛙离体心脏灌流方法。2.观察Na 、K 、Ca2 、H 、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。实验原理 心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境(如Na 、K 、Ca2 等的浓度及比例、pH值和温度),而内环境的变化则直接影响到心脏的正常节律性活动。在体心脏还受交感神经和
差速离心法的测定方法
⑴样品:蛋白质⑵样品溶液与离心:将样品溶于缓冲液中,用一定规格的双槽分析池,一边加入溶液一边加入溶剂。分析池与平衡池平衡重量,使平衡池比分析池轻0.5g以内,然后分别装入分析转头。抽真空。开Schlieren光光源,选择工作速度,室温离心。转动腔达到真空后离以机开始运转加速,此时在观察窗口可以看到离
等密度离心法的原理
等密度离心分离样品主要是根据被分离样品的密度。在这种离心分离方法中,要用介质产生一种密度梯度, 这种密度梯度覆盖了待分离物质的密度,这样,通过离心使不同密度的颗粒悬浮到相应的介质密度区。
差速离心法的技术特点
差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细胞器。起始的离心速度较低,让较大的颗粒沉降到管底,小的颗粒仍然悬浮在上清液中。收集沉淀,改用较高的离心速度离心悬浮液,将较小的颗粒沉降,以此类推,达到分离不同大小颗粒的目的。
柱离心法纯化质粒DNA
实验概要本实验介绍了柱离心法纯化质粒DNA的原理及操作流程。实验原理1. 离心柱结构:特殊硅基质吸附材料,特异性吸附DNA,而RNA与蛋白质穿过。在正常情况下,核酸表面覆盖了一层由水分子组成的亲水薄膜,以维持其水溶性。高浓度盐离子的加入破坏了核酸表面亲水薄膜的相对有序排列,形成了疏水环境。在此环境中
柱离心法纯化质粒DNA
实验原理1. 离心柱结构:特殊硅基质吸附材料,特异性吸附DNA,而RNA与蛋白质穿过。在正常情况下,核酸表面覆盖了一层由水分子组成的亲水薄膜,以维持其水溶性。高浓度盐离子的加入破坏了核酸表面亲水薄膜的相对有序排列,形成了疏水环境。在此环境中,核酸与硅胶膜能有效结合,而蛋白质、代谢产物和其他污染物则不
双抗体夹心法的概念
双抗体夹心法,是将含有已知抗体的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里,洗涤一次;加待测抗原,如两者是特异的,则发生结合,再加入与待测抗原呈特异反应的酶联抗体,使一单位的抗原同时结合两单位的抗体形成“夹心”;最后加入该酶的底物,根据产生的有色酶解产物颜色的深浅来判断待测抗原的含量。
速度离心法的技术特点
中文名称速度离心英文名称velocity centrifugation定 义根据被分离物质的体积差异在一定离心速度下沉降速度不同而分离的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
双抗原夹心法的原理
简单地说一下:固相抗原吸附载体+血清(抗体)+酶结合物(抗原)=抗原*抗体*抗原复合物;抗原*抗体*抗原复合物+辣根过物氧化酶《过氧化氢催化》=蓝色络合物。因为抗体多数是2价(Igm是5价),具有两个结合部位,所以可以结合2个抗原
ELISA双抗体夹心法原理
原理LISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。加入酶标记的抗原或抗体,
离放射化学分的概述
放射化学分离是用化学或物理的方法使放射性物质(见放射性)与稳定物质分离或几种放射性物质彼此分离的技术。在核燃料生产、核燃料后处理、放射性核素生产、放射性标记化合物合成、核化学研究和放射性核素的分析方面,都会遇到放射化学分离。放射化学分离的方法通常有:共沉淀、溶剂萃取、离子交换色谱(见色谱法)、电
离放射化学分的特点
放射化学分离过程的特点是:①大多数放射性物质以微量或低浓度状态存在,如10毫升含有104贝可钴60的溶液中,钴60仅2.4×10-10克,浓度为3.9×10-10摩尔/升,这样少量的钴60很容易被容器表面吸附或被沉淀载带失去,因此通常要使用载体。②放射性物质不断进行放射性衰变,如果研究的放射性核
离型膜的功能特性
离型膜是指薄膜表面能有区分的薄膜,离型膜与特定的材料在有限的条件下接触后不具有粘性,或轻微的粘性。
[离体]根培养的定义
中文名称[离体]根培养英文名称root culture定 义从植物体上切下来的根尖或其一部分放在琼脂培养液上进行的无菌培养。可用于根的生长和分化的研究。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
离放射化学分的简介
用化学或物理的方法使放射性物质(见放射性)与稳定物质分离或几种放射性物质彼此分离的技术。在核燃料生产、核燃料后处理、放射性核素生产、放射性标记化合物合成、核化学研究和放射性核素的分析方面,都会遇到放射化学分离。
[离体]茎培养的定义
中文名称[离体]茎培养英文名称stem culture定 义将从几微米到几十微米的茎分生组织,几十毫米的茎尖或更大的芽,幼嫩的茎段和小块块茎等从母体植株上切下,放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
离型膜的应用范围
电子、汽车泡棉、印刷等,它的使用范围大部分和具有粘性的在一起,特别是胶带产品。具体见下表说明材料类型厚度(um)克重(g/m2)剥离力(g/25mm)适用范围PET/PE等25355-10不干胶、热熔胶等强胶产品40605-10不干胶、热熔胶等强胶产品50733-8进口双面胶等高粘产品50735-1
我们离“旧衣新用”还差几步?
你家的旧衣服都去哪儿了?转送、捐赠,还是直接扔了? 预计到“十三五”末,我国化纤纺织品的社会存量将继续增加近2亿吨。而废旧化纤制品被当作垃圾填埋或焚烧,不仅污染环境,也造成极大的资源浪费。 4月27日,中国工程院发布的《废旧化纤纺织品资源再生循环技术发展战略研究报告》指出,我国是世界化
梨离体叶片再生实验
实验概要试验研究了基本培养基、激素配比、细胞分裂素、生长素、培养基添加物、蔗糖浓度、pH值及叶龄与接种方式对梨离体叶片不定芽再生的影响,优化了再生条件,建立起了高效、稳定的离体叶片再生体系。实验材料金花和丰产两种梨树的离体叶片。实验步骤1. 培养基的配制 试验所用的培养基为MS (Murashige
康乃馨的离体快繁
仪器 设备和 试剂 超净工作台、带有吸水纸的成套的培养皿,无菌水 培养基 N 6 +1 mg/L 6-BA 剪刀、枪型镊子 量筒、酒精灯、滤纸、蒸馏水、小刷子 95%乙醇、70%酒精、70%酒精棉球、0.2%升汞、甲醛、高锰酸钾、来苏尔
在离太阳更近的地方
2021年五一假期后,吴俊伟又准备出趟远门。他添置了件连帽的深色冲锋衣,防风遮雨透气,适合在高原穿着。 吴俊伟的目的地,是位于海拔3830米的稻城县噶通镇,那里将建成国家重大科技基础设施空间环境地基综合监测网(子午工程二期)的标志性设备“圆环阵太阳射电成像望远镜”。设计图已经铺好,但搭建工作才
中国离疫苗强国还有多远?
目前,我国最大的疫苗生产企业——国药集团中国生物技术股份有限公司正在积极开拓海外市场,由于质优、价廉等优势,目前中生的疫苗已经销往韩国、印度、尼泊尔、越南等国,并成为WHO的全球第五大疫苗供应商。 疫苗市场竞争白热化 全球现有疫苗生产企业85家,我国超过40家。中国还是全球最大的疫苗