细胞提取物中β半乳糖苷酶的测定实验

本方案介绍报道分子载体(请见图 17-5) 转染哺乳动物细胞后,测定表达的β-半乳糖苷酶活性。本方法既简单快速,又可以用可见光分光光度计进行测定。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料转染了感兴趣 DNA 的哺乳动物培养细胞试剂、试剂盒大肠杆菌β-半乳糖苷酶Tris-Cl磷酸钠ONPGNa2CO3β-巯基乙醇MgCl2实验步骤材料缓冲液和溶液贮存液稀释到适当浓度。100XMgCl20.1mol/L MgCl24.5mo1/L β-巯基乙醇临用前,加入适量的 14.7mol/Lβ-巯基乙醇贮存液。Na2CO3(1mol/L)10.6 g 无水固体溶于 100 ml 水中。1xONPGONPG 溶于 0.1mol/L 磷酸钠(pH7.5) 中,浓度为 4 mg/ml。磷酸钠(0.1mol/L,pH7.5)混合 41 ml 0.2mol/L Na2HPO4•2H2O(Mt=......阅读全文

植物组织中自由水含量的测定实验

实验方法原理植物组织在与高浓度的糖液接触时,束缚水因被原生质胶体颗粒吸附而留在组织中;自由水则因未被原生质胶体颗粒吸附而顺着水势梯度外渗到糖液中,使糖液的浓度降低。组织浸泡在糖液中一定时间后,根据糖液浓度降低的情况可算出组织中自由水的含量,而束缚水含量则可通过烘干植物组织计算出总含水量,再减去自由水

铁的比色测定实验中,波长选择多少

510nm邻二氮菲(o-ph)是测定微量铁的较好试剂。在pH=2~9 的溶液中,试剂与Fe2+生成稳定的红色配合物,其lgK形=21.3, 摩尔吸光系数ε = 1.1×104,其反应式如下:Fe2+ + 3(o-ph) = Fe(o-ph)3红色配合物的最大吸收峰在510nm波长处。 本方法的选择性

植物组织中自由水含量的测定实验

实验方法原理 植物组织在与高浓度的糖液接触时,束缚水因被原生质胶体颗粒吸附而留在组织中;自由水则因未被原生质胶体颗粒吸附而顺着水势梯度外渗到糖液中,使糖液的浓度降低。组织浸泡在糖液中一定时间后,根据糖液浓度降低的情况可算出组织中自由水的含量,而束缚水含量则可通过烘干植物组织计算出总含水量,再减去自由

测定溶点的实验中甘油起什么作用

1,加热介质。2,使毛细管受热均匀。甘油是液体,内部对流快,受热后会很快传热,使得甘油内部温度均一。这样使得毛细管是均匀受热。如直接电热丝或火焰加热,容易导致毛细管受热不均,比如毛细管单侧受热,导致该侧待测物质先熔融,而另一侧却温度较低,还没有达到熔点。不利于判断熔点。3,使得温度计处的温度同毛细管

植物组织中自由水含量的测定实验

实验方法原理:植物组织在与高浓度的糖液接触时,束缚水因被原生质胶体颗粒吸附而留在组织中;自由水则因未被原生质胶体颗粒吸附而顺着水势梯度外渗到糖液中,使糖液的浓度降低。组织浸泡在糖液中一定时间后,根据糖液浓度降低的情况可算出组织中自由水的含量,而束缚水含量则可通过烘干植物组织计算出总含水量,再减去自由

法布里病的诊断

  男性病人诊断的主要依据是躯干底部的典型皮损(角化瘤)。病人可有角膜混浊,发热,四肢末端烧灼性疼痛。病人可死于肾衰,医,学教育网,收集整理高血压或其他血管疾病引起的心脏或中枢并发症。产前诊断可以通过羊膜或绒毛囊穿刺测定半乳糖苷酶的活性。女性杂合子病人通常无症状,但常会有角膜混浊,此为疾病的轻型表现

法布里病的诊断

  男性病人诊断的主要依据是躯干底部的典型皮损(角化瘤)。病人可有角膜混浊,发热,四肢末端烧灼性疼痛。病人可死于肾衰,医,学教育网,收集整理高血压或其他血管疾病引起的心脏或中枢并发症。产前诊断可以通过羊膜或绒毛囊穿刺测定半乳糖苷酶的活性。女性杂合子病人通常无症状,但常会有角膜混浊,此为疾病的轻型表现

法布里病的诊断

  男性病人诊断的主要依据是躯干底部的典型皮损(角化瘤)。病人可有角膜混浊,发热,四肢末端烧灼性疼痛。病人可死于肾衰,医,学教育网,收集整理高血压或其他血管疾病引起的心脏或中枢并发症。产前诊断可以通过羊膜或绒毛囊穿刺测定半乳糖苷酶的活性。女性杂合子病人通常无症状,但常会有角膜混浊,此为疾病的轻型表现

罂粟果提取物粉的含量测定方法

含量测定照高效液相色谱法(通则0512)测定。固相萃取柱的前处理、系统适用性试验与要求见罂粟果提取物含量测定项下供试品溶液取本品约10g,研细(过五号筛),取约1g,精密称定,置200ml量瓶中,加5%醋酸溶液适量,超声30分钟使吗啡溶解,取出,放冷,用5%醋酸溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续

天麻提取物的活性成分及含量测定

  活性成分  化学成分含天麻甙(天麻素,gastrodin)、天麻甙元、天麻醚甙(gastrodioside)、 派立辛(parishin)、香草醇、β2甾醇、对羟基苯甲醛、柠檬酸、琥珀酸等。  含量测定  照高效液相色谱法测定。  色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-

改良半叶法测定叶片光合速率

【原理】植物进行光合作用形成有机物,而有机物的积累可使叶片单位面积的干物重增加,但是,叶片在光下积累光合产物的同时,还会通过输导组织将同化物运出,从而使测得的干重积累值偏低。为了消除这一偏差,必须将待测叶片的一半遮黑,测量相同时间内叶片被遮黑的一侧单位面积干重的减少值,作为同化物输出量(和呼吸消耗量

红细胞沉降率(ESR)测定实验

实验方法原理血液中加人一定量抗凝剂,吸入特制的沉降测定管中,在限定时间内记录红细胞下沉的毫米数.试剂、试剂盒枸橼酸钠溶液仪器、耗材血沉管血沉架实验步骤l.  以3.8%的枸橼酸钠溶液0.4mL置于洁净试管和小瓶中。2. 自静脉采血1.6毫升,加人抗凝瓶中,均匀混匀。3. 将血液吸至血沉管“0”处,勿

半自主性细胞器的简介

  半自主性细胞器(semiautomous organelle)的概念:自身含有遗传表达系统(自主性);但编码的遗传信息十分有限,其RNA转录、蛋白质翻译、自身构建和功能发挥等必须依赖核基因组编码的遗传信息(自主性有限)。叶绿体和线粒体都属于半自主性细胞器。

半自主性细胞器的组成

  线粒体和叶绿体中有DNA和RNA、核糖体、氨基酸、活化酶等。这两种细胞器均有自我繁殖所必需的基本组分,具有独立进行转录和转译的功能。迄今为止,已知线粒体基因组仅能编码约20种线粒体膜和基质蛋白并在线粒体核糖体上合成;线粒体和叶绿体的绝大多数蛋白质是由核基因编码,在细胞质核糖体上合成,然后转移至线

细胞化学词汇乳清苷

中文名称:乳清苷英文名称:orotidine定  义:由乳清酸的N-1和D-核糖的C-1通过β糖苷键连接而成的化合物。其磷酸酯为乳清苷酸。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

关于半不连续复制的模型介绍

  1978年Olivera提出了半不连续(semidiscontinuous)复制模型,也就是说前导链上的合成是连续的,只有后滞链上的合成才是半连续的。  已经弄清原来是由于细胞内都存在有dTTP和dUTP,而DNApolⅢ却并不能区分它们,因此也会将dUTP加入到DNA中,形成A·U对。那么在D

mRNA-在麦胚提取物中的翻译

            实验材料 精胺或4.0〜8.Ommol L亚精胺 肌氨酸激酶 新鲜麦胚 沙粒 试剂、试剂盒

mRNA-在麦胚提取物中的翻译

实验材料 精胺或4.0〜8.Ommol L亚精胺肌氨酸激酶新鲜麦胚 沙粒试剂、试剂盒 提取缓冲液 平衡缓冲液 DEFC 10X能量缓冲液 乙酸钾 DTT LHEPES mRNA [3 H] 或 [35S] 标记的 L-氨基酸 三氯乙酸(TCA)。仪器、耗材 SephatkxG-25(粗级)高温烘箱

细胞实验中如何预防真菌污染?

愤怒的污染君随即列出了一系列罪证:1你若随便穿戴,我便生死相依你进细胞房时不换鞋,不戴口罩,不戴手套,虽然感觉呼吸畅快全身轻松,但其实是进细胞房的最大忌讳!有更严格的细胞房连帽子都要戴上。这么随便的就把我带进去见你的细胞,难怪她会被你气死,换鞋就不说了,你应该也知道有真菌吧。但你根本不能保证你口腔支

弗布利氏综合征的诊断

  弗布利氏综合征虽有许多特征性表现,但临床误诊10年以上者并不少见。一般来讲,Fabrys病患者的发病年龄在儿童晚期或青少年早期,男性发病,女性为携带者或轻症患者,B型和AB型血型者发病早且较严重。患者平均存活年龄为50岁,女性基因携带者的生存年龄较长,约70岁。死因主要是肾衰或心脑血管并发症。 

FabryAnderson病的诊断

  Fabry-Anderson病虽有许多特征性表现,但临床误诊10年以上者并不少见。一般来讲,Fabrys病患者的发病年龄在儿童晚期或青少年早期,男性发病,女性为携带者或轻症患者,B型和AB型血型者发病早且较严重。患者平均存活年龄为50岁,女性基因携带者的生存年龄较长,约70岁。死因主要是肾衰或心

出血性小结节病的诊断

  出血性小结节病虽有许多特征性表现,但临床误诊10年以上者并不少见。一般来讲,Fabrys病患者的发病年龄在儿童晚期或青少年早期,男性发病,女性为携带者或轻症患者,B型和AB型血型者发病早且较严重。患者平均存活年龄为50岁,女性基因携带者的生存年龄较长,约70岁。死因主要是肾衰或心脑血管并发症。 

报告基因:β半乳糖苷酶的原位染色实验

原位染色技术             实验方法原理 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,通过原位染色,在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。

报告基因:β半乳糖苷酶的原位染色实验

试剂、试剂盒 D-PBSA 染色液质粒实验步骤 一、材料非消毒物品 1. D-PBSA2. 底物:X-gal(nvitrogen),以二甲基甲酰胺配成 20 mg/mL,用多聚丙烯管-20℃ 避光保存,最长可达 6 个月 3. 固定液:1.8% 的甲醛和 0.05% 戊二醛,均以 PBSA 液配制;

报告基因:β半乳糖苷酶的原位染色实验

原位染色技术             实验方法原理 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,通过原位染色,在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。

氮测定法的半微量法相关介绍

  连接蒸馏装置,A瓶中加水适量与甲基红指示液数滴,加稀硫酸使成酸性, 加玻璃珠或沸石数粒,从D漏斗加水约50ml,关闭G夹,开放冷凝水,煮沸A瓶中的水,当蒸气从冷凝管尖端冷凝而出时,移去火源,关H夹,使C瓶中的水反抽到B瓶,开G夹,放出B瓶中的水,关B瓶及G夹,将冷凝管尖端插入约50ml水中,使水

植物叶片光合速率的测定(改良半叶法)

实验试剂三氯、石蜡。实验设备剪刀,分析天平,称量皿(或铝盒),烘箱,刀片,金属(有机玻璃也可)模板(或打孔器),纱布,夹子,有盖搪瓷盘,锡纸等。实验材料生长于田间的植株。实验步骤1.选择测定样品:实验可在晴天上午8~9点钟开始,预先在田间选定有代表性的叶片(如叶片在植株上的部位、年龄、受光条件等)1

植物叶片光合速率的测定(改良半叶法)

实验试剂三氯乙酸、石蜡。实验设备剪刀,分析天平,称量皿(或铝盒),烘箱,刀片,金属(有机玻璃也可)模板(或打孔器),纱布,夹子,有盖搪瓷盘,锡纸等。实验材料生长于田间的植株。实验步骤1.选择测定样品:实验可在晴天上午8~9点钟开始,预先在田间选定有代表性的叶片(如叶片在植株上的部位、年龄、受光条件等

植物叶片光合速率的测定(改良半叶法)

实验概要光合速率测定是植物生理学的基本研究方法之一,在作物丰产生理、作物生态、新品种选育、以及光合作用基本理论研究等方面都有着广泛的用途。 根据光合作用的总反应式 CO2 2H2O→ (CH2O) O2 H2O   光合强度原则上可以用任何一反应物消耗速度或生成物的产生速度来表示。由于植物体内水

植物叶片光合速率的测定(改良半叶法)

光合速率测定是植物生理学的基本研究方法之一,在作物丰产生理、作物生态、新品种选育、以及光合作用基本理论研究方面都有着广泛的用途。根据光合作用的总反应式:C022H2O→ (CH2O)O2H2O光合强度原则上可以用任何一反应物消耗速度或生成物的产生速度来表示。由于植物体内水分含量很高,而且植物随时都在