报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验
试剂、试剂盒 D-PBSA 染色液质粒实验步骤 一、材料非消毒物品 1. D-PBSA2. 底物：X-gal（nvitrogen），以二甲基甲酰胺配成 20 mg/mL，用多聚丙烯管-20℃ 避光保存，最长可达 6 个月 3. 固定液：1.8% 的甲醛和 0.05% 戊二醛，均以 PBSA 液配制；将 85 mL 水、10 mL 的 10×D-PBSA、5 mL 福尔马林（37% 甲醛溶液）及 0.2 mL 戊二醛（25% 溶液）混合，制备成固定液，于 4℃ 储存 4. 染色液：含 5 mmol/L 铁氰钾，5 mmol/L 亚铁氰钾，2 mmol/LMgCl2，以 D-PBSA 配制，4℃ 储存 5. 底物/染色液：1 mg/mLX-gal，以染色液配制，现用现配 6. 含 10% 甲醛的 D-PBSA 液 7. 将β-gal 的表达质粒作为报告基因转染（如：pcMV......阅读全文
报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验——原位染色技术
β-半乳糖苷酶的原位染色可应用于：（1）确定导人的DNA是否已被整合到宿主细胞；（2）来示踪细胞与细胞相互作用。实验方法原理β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，通过原位染色，在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。实验材料β-gal表达质粒转染细胞试剂、试剂盒D-PBSA染色液
报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验
试剂、试剂盒 D-PBSA 染色液质粒实验步骤 一、材料非消毒物品 1. D-PBSA2. 底物：X-gal（nvitrogen），以二甲基甲酰胺配成 20 mg/mL，用多聚丙烯管-20℃ 避光保存，最长可达 6 个月 3. 固定液：1.8% 的甲醛和 0.05% 戊二醛，均以 PBSA 液配制；
报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验
原位染色技术 实验方法原理 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，通过原位染色，在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。
报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验
原位染色技术 实验方法原理 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，通过原位染色，在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。
报告基因实验
实验方法原理报告基因是一个分子生物学概念，它是指一类在细胞、组织/器官或个体处于特定情况下会表达并使得他们产生易于检测、且实验材料原本不会产生的性状的基因。作为报告基因，在遗传选择和筛选检测方面必须具有以下几个条件：①已被克隆和全序列已测定；②表达产物在受体细胞中本不存在，即无背景，在被转染的细胞中
β半乳糖苷酶染色简介
β -半乳糖苷酶是一种是细胞溶酶体中的水解酶，能把乳糖水解成葡萄糖和半乳糖的酶。其结构基因为LacZ，与LacY（半乳糖苷透性酶）和LacA（半乳糖苷转乙酰酶）同组成乳糖操纵子，并在特异的乳糖操纵系统中的阻遏物、操纵基因、启动子等的协同下，支配调节β-半乳糖苷酶的合成。β-半乳糖苷酶一般广泛存
β半乳糖苷酶染色简介
β- 半乳糖苷酶是一种是细胞溶酶体中的水解酶，能把乳糖水解成葡萄糖和半乳糖的酶。其结构基因为LacZ，与LacY（半乳糖苷透性酶）和LacA（半乳糖苷转乙酰酶）同组成乳糖操纵子，并在特异的乳糖操纵系统中的阻遏物、操纵基因、启动子等的协同下，支配调节β-半乳糖苷酶的合成。β-半乳糖苷酶一般广泛存在
中期染色体和间期核的原位杂交实验
实验材料含有人类中期染色体的载玻片或盖玻片试剂、试剂盒变性液乙醇Cot-1 DNA非同位素标记的 DNA 探针去离子甲醜胺基本杂交混合液甲酰胺SSC生物素检测溶液DAPI适当的抗褪色剂仪器、耗材玻片染色缸水浴箱相差显微镜盖玻片橡皮泥湿盒干燥的玻片盒指甲油实验步骤展开
半乳凝素的基本信息
Gal-1是一个对富含多N乙酰基乳糖糖复合物有明显亲和力的动物外源凝集素家族的一个成员。最近的发现Gal-1有调节免疫反应、血管新生和肿瘤进展的作用。
半乳葡萄甘露聚糖的基本信息
中文名称半乳葡萄甘露聚糖英文名称galactoglucomannan定 义半纤维素的组成之一，尤其在裸子植物细胞壁中，该聚糖占12%～15%。主链由葡萄糖和甘露糖以β-1,4键连接而成，半乳糖则以α-1,6键连到主链的任一种糖上。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），糖类（二级学科）
酵母载体与表达产物的检测实验_β半乳糠苷酶检测
实验材料酵母试剂、试剂盒YPDSDS磷酸钾Na2CO3OPNG仪器、耗材水浴锅培养箱分光光度计漩涡混合器离心机实验步骤1. 按每一个单酵母菌落接种YPD（或适当）的培养基，挑2~3个含lacZ融合蛋白表达质粒的酵母菌于30℃培养过夜，如果融合蛋白在一个质粒上，那么就在选择该质粒的培养基中培养。 2
报告基因实验——MUG－荧光分析
实验材料组织提取物试剂、试剂盒GUS 缓冲液MUG仪器、耗材96 孔板数显荧光计实验步骤1. 分别取 25 ul 和 50 ul 组织提取物样品于 96 孔板中（黑色或者白色），包括未转化的对照组织，加 GUS 缓冲液至总体积为 200 ul，混匀。2. 加入 100 μl 含 2.5 mg/ml
转染实验常用的报告基因（植物、动物）
报告基因(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其 它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。
放射自显影原位杂交玻片的压片固定实验_姆萨－染色
实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒吉姆萨染色液（Fisher)710 mmol L磷酸钠缓冲液pH 6.8 (500 mmol L原液按1:50稀释）50%、70%、95% 和100% 乙醇、二甲苯封片介质为Permount (Fisher)或 Gelvatol (现称 Airvol来自A
荧光原位杂交的染色体分析
荧光原位杂交的染色体分析（一）标本的制备1．室温下，依次用70％、90％和100％的乙醇脱水5min。2．空气干燥载玻片。3．若短期使用，载玻片可在室温贮存数天。若载玻片要长期保存，应在室温下过夜使组织“老化”（aged），然后放入容器中，该容器密封于含干燥剂的塑料袋内，－70℃保存。根据作者的经验
哺乳动物原代细胞培养的β半乳糖苷酶（荧光测定）
β半乳糖苷酶：β半乳糖苷酶由大肠杆菌lacZ基因编码，可催化半乳糖苷水解。最大优势是易于用免疫组织化学法观测其原位表达，是最常用的监测转染率的报道基因之一。以邻—硝基苯—β—D—半乳吡喃糖苷(ONPG)为底物可用标准的比色法检测酶活性，其检测动力学范围为6个数量级。氯酚红—β—D—半乳吡喃糖苷(CP
间接原位PCR（原位杂交PCR）实验
实验材料 组织或细胞样品试剂、试剂盒 SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脱脂奶粉Denhardt’s 液SDS变性的鲑鱼精DNARnaseDTT乙醇仪器、耗材 玻片石蜡膜橡皮泥湿盒实验步骤 一、预杂交 1. 试剂与配制 2×SSC 50%去离子甲酰胺：用4×SSC配制（v/v） 预杂交液：2×SSC，5%硫
基本方案2－G－显带后的染色体原位杂交实验
实验材料未封片或 Entdlan 封片 G 显带的中期细胞试剂、试剂盒二甲苯浓度梯度乙醇丙酮 甲醇固定剂2 X SSC仪器、耗材全染色体涂染探针Coplin 缸实验步骤
应用－APAAP－免疫染色和原位杂交进行序列的－MAC－分析实验
实验方法原理实验材料用于分析的空气干燥的细胞铺试剂、试剂盒甲醛缓冲的丙酮固定剂PBSFBS兔抗鼠Ig抗血清溶液APAAP 底物溶液5 % 的吉姆萨染液乙醇甲醇 冰乙酸固定剂生物素或地高辛标记的重复序列探针Harris苏木素染液氨水溶液仪器、耗材Coplin 缸封片媒介细胞离心涂片器过滤器保湿盒过滤膜
报告基因实验——花青素表达的定量
实验材料植物组织试剂、试剂盒酸性乙醇或甲醇花青素-3-O-葡萄糖苷仪器、耗材滤膜实验步骤1. 瞬时表达研究植物组织经基因枪转化培养大约 12 h 后，转化细胞开始表现出深红色或者偶尔为深蓝色的斑点。颜色常常会向整个液泡扩散，从外表上看整个细胞都是红色的。在几天时间里，颜色将会增强，并且能在 1~2
原位PCR实验相关
所需设备 原位PCR反应是在载玻片的平面上进行，保持水平可以使反应各组分均匀地分布在组织切片上，所以须在原位PCR仪上进行，该仪器不但可以使载玻片保持水平，而且还可以给载玻片进行均匀地加热，保证扩增反应的顺利进行。 探针种类 与原位杂交一样，检测原位PCR结果的探针可以是DNA探针，也可以
原位PCR实验步骤
原位PCR实验步骤，原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术，使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞（爬片、甩片或涂片）或组织（石蜡、冰冻切片）上直接对靶基因片段进行扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。一、组织切片和细胞样品的制备试剂与配置10%福尔马
漩涡混合器产品应用介绍
产品应用快速可控混匀使孔与孔/ 管与管之间实验条件均一化，因此可以提高重复性。● PCR 反应体系制备● 沉淀重悬(如 细菌、DNA、细胞培养沉淀)● 孵育(ELISA 酶免分析)● 蛋白染色定量（如Bradford、Lowry、BCA）● 报告基因分析（如β- 半乳糖苷酶、荧光素酶分析）● 酶反应
β半乳糖苷酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。乳糖＋H2O → β-D-半乳糖＋D-葡萄糖 实验
β半乳糖苷酶的测定实验
实验方法原理β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。乳糖＋H2O → β-D-半乳糖＋D-葡萄糖实验材料β-半乳糖苷酶试剂、试剂盒磷酸钾邻硝基苯基 β-D-半乳糖苷仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」实验混合物：以 0.02 ml 酶溶液起始，然后 25℃ 下，在 405 nm处吸收值升
β半乳糖苷酶的测定实验
实验方法原理 β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。乳糖＋H2O → β-D-半乳糖＋D-葡萄糖实验材料 β-半乳糖苷酶试剂、试剂盒 磷酸钾邻硝基苯基 β-D-半乳糖苷仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」实验混合物：以 0.02 ml 酶溶液起始，然后 25℃ 下，在 405 nm
关于LacZ基因的简介
1969年，美国哈佛大学以Beckwith博士为首的研究小组，应用DNA分子杂交技术首次分离到lacZ基因后，该基因逐渐成为了一个广泛应用的报告基因。但是，在秀丽线虫中其主要应用于相对早期的环境暴露以及毒性的评价研究，应用已经很少 [2] 。LacZ基因编码的β一半乳糖苷酶(简称β-gal)是由
双荧光素酶报告基因实验原理
双荧光素酶报告基因实验原理具体如下：双荧光素酶报告基因实验原理是利用双荧光素酶作为荧光素酶的标记来研究基因表达与调控的机制。双荧光素酶报告基因实验是一种基因表达定量分析技术，通过将双荧光素酶Luciferase作为报告基因插入到需要研究的靶基因启动子区域或转录后区域，使其与靶基因协同表达。当荧光素基
原位杂交仪—原位杂交实验（三）
原位杂交第三天 1） 用1ml含10%热灭活血清的MABT溶液置换抗体溶液，放置摇床上25分钟，然后用1mlMABT置换，25分钟，再用1mlMABT溶液置换，一小时以上，最后用1mlMABT溶液置换，25分钟。 2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置
原位杂交仪—原位杂交实验（二）
原位杂交第二天 1. 1）将探针回收，放于－20C保存（通常探针可重复使用十次左右）。 2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分钟，重复一次。 3）置换2XSSCT1ml，60℃，放置15分钟。 4）置换0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分钟，重复一次。