细胞提取物中β半乳糖苷酶的测定实验

本方案介绍报道分子载体(请见图 17-5) 转染哺乳动物细胞后,测定表达的β-半乳糖苷酶活性。本方法既简单快速,又可以用可见光分光光度计进行测定。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料转染了感兴趣 DNA 的哺乳动物培养细胞试剂、试剂盒大肠杆菌β-半乳糖苷酶Tris-Cl磷酸钠ONPGNa2CO3β-巯基乙醇MgCl2实验步骤材料缓冲液和溶液贮存液稀释到适当浓度。100XMgCl20.1mol/L MgCl24.5mo1/L β-巯基乙醇临用前,加入适量的 14.7mol/Lβ-巯基乙醇贮存液。Na2CO3(1mol/L)10.6 g 无水固体溶于 100 ml 水中。1xONPGONPG 溶于 0.1mol/L 磷酸钠(pH7.5) 中,浓度为 4 mg/ml。磷酸钠(0.1mol/L,pH7.5)混合 41 ml 0.2mol/L Na2HPO4•2H2O(Mt=......阅读全文

淋巴细胞增殖功能的测定实验

实验方法原理 T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD2、抗CD3 McAb作为多克隆刺激剂可选择性地刺激T细胞增殖;而抗IgM、含葡萄球菌A蛋白的菌体(SAC)、脂多糖(LPS

淋巴细胞增殖功能的测定实验

淋巴细胞增殖和分化是机体免疫应答过程的一个重要阶段。因此,检测淋巴细胞增殖水平可用于(1)细胞免疫研究(2)临床免疫功能研究测定。实验方法原理T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD2、

淋巴细胞增殖功能的测定实验

            实验方法原理 T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD2、抗CD3 McAb作为多克隆刺激剂可选择性地刺激T细胞增殖;而

通过高等真核生物无细胞提取物分析mRNA的降解实验

实验方法原理 细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。实验材料 DEPC细胞多聚核糖体RNA底物试剂、试剂盒 乙酸钾乙酸镁DTTTris-乙酸组织培养液无菌去离子水磷酸肌酸ATPGTP乙酸钾精胺RNase 抑制剂仪器、耗材 高温烤箱匀浆器研杵低速离心机超速离心机

HeLa-细胞核提取物的-Sephacryl-S300-HR-柱层析实验

HeLa 细胞核提取物Sephacryl S-300 HR液氮TM 缓冲液+0.1mol LKCl仪器、耗材XK26 40 柱实验步骤材料与设备HeLa 细胞核提取物(从 12L 细胞培养物制得,见 pp.9l~93)(5-ml 样品)XK26/40 柱(PharmaciaBiotech,Inc.)

通过高等真核生物无细胞提取物分析mRNA的降解实验

            实验方法原理 细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。 实验材料 DEPC 细胞

HeLa-细胞核提取物的-Sephacryl-S300-HR-柱层析实验

试剂、试剂盒 HeLa 细胞核提取物Sephacryl S-300 HR液氮TM 缓冲液+0.1mol LKCl仪器、耗材 XK26 40 柱实验步骤 材料与设备HeLa 细胞核提取物(从 12L 细胞培养物制得,见 pp.9l~93)(5-ml 样品)XK26/40 柱(PharmaciaBiot

通过高等真核生物无细胞提取物分析mRNA的降解实验

细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。实验材料DEPC细胞多聚核糖体RNA底物试剂、试剂盒乙酸钾乙酸镁DTTTris-乙酸

荔枝果肉多糖乳酸菌发酵转化规律研究获进展

  广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所功能食品创新团队在国家自然科学基金重点项目、广东省重点领域研究发展项目等的资助下,在乳酸菌发酵促进荔枝果肉多糖可溶化转化规律及机制研究方面取得新进展。近日,相关成果以封面论文的形式发表于《农业与食品化学杂志》(Journal of Agricultural

蔬菜中多种农药残留测定实验

气相色谱质谱联用法             实验材料 蔬菜 试剂、试剂盒

原代细胞实验中样本的处理方法

原代细胞实验中样本的处理方法1. 血清:全血标本于室温放置2小时或4℃后于1000×g离心20分钟,取上清即可检查,搜集 血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。  2. 血浆:抗凝剂举荐运用EDTA.Na2,标本搜集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可 检查。防止运用溶血,高血脂

酵母细胞中质粒的加工实验

定位突变质粒缺口修复技术和等位基因修复技术实验材料酵母菌株试剂、试剂盒带选择标记的YRp或YCp质粒适当的限制性内切核酸酶相应选择标记突变的酵母菌质粒标记的选择培养基平板仪器、耗材培养皿实验步骤1)将目的基因亚克隆到带恰当的选择标记的YRp或YCp质粒上。2) 在基因内部的两个限制酶酶切位点上切割以

酵母细胞中质粒的加工实验

实验方法原理 在非选择性生长条件下,大多数大肠杆菌/酵母菌穿梭载体的丢失频率大约1%。 在本方案中含质粒的酵母菌株接种于非选择性平板上以分离质粒并可得到单菌落。然后通过影印到选择性平板上可以鉴别丢失了质粒的菌株实验材料 含质粒的酵母菌株试剂、试剂盒 YPD或其他非选择性液体培养基及平板CM缺失成分

概述罗伊氏乳杆菌在畜禽商业化养殖实验中的效用

  实验室中的实验已验证了罗伊氏乳杆菌的诸多益生效用,在此基础上更需要明确其在商业化养殖环境下是否具有类似功效。Casas等在16个火鸡养殖场中进行了该项实验,实验涉及火鸡总量为280000只。将每572只火鸡随机分成一组,在其孵化到生长42天的过程进行体重记录。结果表明,饲喂罗伊氏乳杆菌的有益功效

免疫学实验HCG半定量

HCG半定量介绍:  HCG 红血球淀集抑制半定量试验(以下简称 HCG 半定量)灵敏度高,故对早孕、先兆流产、外孕能及早做出诊断,并能对滋养细胞疾病进行诊断,疗效判定及随访。本法较放免要求设备简单、迅速、经济,基层医院都可开展放免、酶标法虽较本法更灵敏,但对滋养细胞疾病的诊断尚无肯定的标准。HCG

微波消解原子荧光法测定乳与乳制品中硒

研究发现,硒和维生素E一起对奶牛的繁殖和防止肝、胰的变性和坏死有重要的作用。因为,硒是和蛋白质,主要是含硫氨基酸的类似物联系在一起的,硒还与类脂及生育酚(维生素E)的吸收有连带关系,所以硒和维生素E对奶牛营养有着相互协调的功能。硒是谷胱甘肽过氧化物酶的成分,有抗氧化、防止膜损伤等功能。缺硒,主要症状

半二甲酚橙分光光度法测定矿石中的钍

一、方法要点在pH值为1.5~4时,有溴化十六烷基三甲基铵存在下,钍与半二甲酚橙形成深红色的三元络合物,使显色反应的灵敏度大有提高。于550nm处测量吸光度。二、试剂与仪器(1)钍标准溶液:将光谱纯ThO2配制成浓度为10μg/mL的钍标准溶液。(2)一氯乙酸缓冲溶液(pH2.5)。(3)溴化十六烷

α葡萄糖苷酶抑制剂研究进展

糖尿病是一组常见的有遗传倾向的内分泌系统疾病,是由多种原因引起糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱,以血糖增高和尿糖为特征,进而导致多个系统、多个脏器损害的综合症。临床上将糖尿病分为两种类型:1型糖尿病(胰岛素依赖型糖尿病)和2型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病),超过90%的病人属于2型糖尿病,一般情况下,这类糖

α葡萄糖苷酶抑制剂研究进展

糖尿病是一组常见的有遗传倾向的内分泌系统疾病,是由多种原因引起糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱,以血糖增高和尿糖为特征,进而导致多个系统、多个脏器损害的综合症。临床上将糖尿病分为两种类型:1型糖尿病(胰岛素依赖型糖尿病)和2型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病),超过90%的病人属于2型糖尿病,一般情况下,这类糖

细胞化学词汇DNA半保留复制

中文名称:半保留复制外文名称:semiconservative replication定       义:半保留复制(semiconservative replication)是DNA复制的模式。亲代DNA双链分离后的两条单链均可作为新链合成的模板,复制完成后的子代DNA分子的核苷酸序列均与亲代DN

醋酸氢化可的松乳膏的含量测定

照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量(约相当于醋酸氢化可的松2.5mg),精密称定,置50ml量瓶中,加甲醇适量,置80℃水浴中加热使基质完全融化,放冷,用甲醇稀释至刻度,摇匀,置冰浴中冷却2小时,迅速用滤膜(0.45pm)滤过,弃去初滤液20ml,精密量取放至室温的续滤液5m

醋酸地塞米松乳膏的含量测定方法

照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量(约相当于醋酸地塞米松0.5mg),精密称定,精密加甲醇50ml,用匀浆机以每分钟9500转搅拌30秒,置冰浴中放置1小时,经有机相滤膜(0.45μm)滤过,弃去初滤液5ml,取续滤液对照品溶液取醋酸地塞米松对照品适量,精密称定,加甲醇溶解并

克罗米通乳膏的含量测定方法

照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量(约相当于克罗米通25mg),精密称定,置50ml量瓶中,加环己烷适量,置热水浴中,振摇使克罗米通溶解,放冷至室温,用环己烷稀释至刻度,摇匀,静置1小时,精密量取上清液5m1,置100ml量瓶中,用环己烷稀释至刻度,摇匀。对照品溶液取克罗米通

氟尿嘧啶乳膏的含量测定

取本品适量(约相当于氟尿嘧啶0.1g),精密称定,加氯化钠1g,置水浴上加热融化,加水50ml,煮沸,使氟尿嘧啶溶解,放冷,滤过,滤液置200ml量瓶中,同法提取三次,用水洗涤滤器,洗液并入量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取100ml,照氮测定法(通则0704第一法)测定。每1ml硫酸滴定液(0

乳和乳制品杂质度的测定

1 范围本标准规定了乳和乳制品杂质度的测定方法。本标准适用于巴氏杀菌乳、灭菌乳、生乳、炼乳及乳粉杂质度的测定,不适用于含非乳蛋白质、淀 粉类成分、不溶性有色物质及影响过滤的添加物质。2 规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本 适用于本标准

复方酮康唑乳膏的含量测定方法

酮康唑与丙酸氯倍他索照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品约4g,精密称定,加无水乙醇适量置80℃水浴中使酮康唑与丙酸氯倍他索溶解,用无水乙醇适量移至50ml量瓶中,放冷,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀,冰浴中冷却2小时,滤过,取续滤液放置至室温。对照品溶液取酮康唑对照品与丙酸氯倍他索对

醋酸地塞米松乳膏的含量测定方法

含量测定照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量(约相当于醋酸地塞米松0.5mg),精密称定,精密加甲醇50ml,用匀浆机以每分钟9500转搅拌30秒,置冰浴中放置1小时,经有机相滤膜(0.45μm)滤过,弃去初滤液5ml,取续滤液对照品溶液取醋酸地塞米松对照品适量,精密称定,加甲

林旦乳膏的含量测定方法

照气相色谱法(通则0521)测定。对照品溶液取林旦对照品约10mg,精密称定,置l00ml量瓶中,加丙酮使溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置50ml量瓶中,用环已烷稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置100ml量瓶中,用环己烷稀释至刻度,摇匀。供试品溶液、系统适用性溶液、色谱条件与系统适用性

细胞周期测定实验——流式细胞仪测定法

实验方法原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测,得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。 

高效液相色谱法测定金银花提取物中绿原酸

金银花FlosLonicerae又名忍冬、双花,为临床常用中药,具有清热解毒、凉散风热之功效,主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等。在中成药中,金银花或以细粉直接入药,或以提取物的形式入药,但大部分制剂以后者的形式入药。目的建立金银花提取物中绿原酸含量的HPLC测定方法。方法国产