总RNA提取实验——一步法
实验材料RNA试剂、试剂盒乙酸钠氯仿异戊醇异丙醇乙醇SDS酚仪器、耗材离心机分光光度计摇床实验步骤1. 组织来源材料：100 ng 组织加1 ul 变性液，在玻璃Teflon匀浆器中将其匀浆。2. 培养细胞：离心弃悬浮细胞培养液或倒去单层培养细胞培养液（不需用生理盐水洗涤），每107细胞加入1 ml 变性液，然后用吸管抽吸7~10次。 3. 将匀浆移入5 ml 聚丙烯管子，加入0.1体积的2 mol/l pH4.0的乙酸钠缓冲液，混匀。4. 加入1 ml 水饱和酚，混匀；再加入0.2体积的49：1氯仿/异戊醇。5. 混匀后0~ 4℃放置15 min。 6. 于4℃用SS-34转子10 000 g 离心20 min，将上层水相移入一个干净试管中。7. 加入1 ml （等体积）异丙醇-20℃放置30 min 沉淀RNA，于4℃ 1......阅读全文
一步法提取质粒DNA
一步法提取质粒DNA主要用于鉴定阳性克隆。主要步骤如下：收集1.5mL菌体，彻底除去培养基；加入50ulSTE缓冲液重悬菌体；加入50ul酚：氯仿;异戊醇（25：24：1），混匀；12000rpm离心5分钟，取上清到另一离心管中；加入NH4Ac至终浓度2M，并加入2倍体积的乙醇，混匀，室温或冰上放置
总RNA提取实验——一步法
实验材料RNA试剂、试剂盒乙酸钠氯仿异戊醇异丙醇乙醇SDS酚仪器、耗材离心机分光光度计摇床实验步骤1. 组织来源材料：100 ng 组织加1 ul 变性液，在玻璃Teflon匀浆器中将其匀浆。2. 培养细胞：离心弃悬浮细胞培养液或倒去单层培养细胞培养液（不需用生理盐水洗涤），每107细胞加入1
一步法检测肝素的相关介绍
一步法测量肝素使得检测更加简单，并缩短了时间。这种方法不添加外源性AT。 检测是基于竞争抑制原理。加入Xa到血浆中与底物混合，立即同时有2个反应：底物被Xa水解和Xa被肝素-AT复合物抑制。一旦反应达到平衡，底物中释放出的pNA与待测血浆中肝素浓度成反比。在这个检测中，没有添加外源性的AT，完
大肠杆菌转化实验——一步法
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 TSS葡萄糖LB仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 按1：100的比例将过夜培养的菌液如人到新鲜的LB培养液中，于37℃培养至为OD600为0.3~0.4。 2. 加入等体积的2x SS于菌液中，在冰上温和地混匀。 3. 将10
一步法RT_PCR详细步骤
1．材料和方法Access RT-PCR System 试剂盒 (A1250)：Promega 公司产品。500u AMV Rev 目的基因 se Transcriptase, 5u/ul500u Tfl DNA Polym 目的基因 ase, 5u/ul1 ml AMV/Tfl 5×Reactio
一步法制备感受态
TSS方法制备感受态细菌（又称一步法）一、 准备工作1、 缓冲液1×TSS的配制：事先配制1M的氯化镁——20.3g氯化镁(6分子水结晶)/定容于100ml去离子水后封装，不用灭菌。取干净的100ml 量筒和100ml 烧杯，用量筒量取100ml去离子水，加入至烧杯中，取 1 g 蛋白胨，0.5
双位点一步法的操作步骤
在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。这种双位点一步不但简化了操作，缩短了反应时间，如应用高亲和力的单克隆抗体，测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELIS
双位点一步法和间接法区别
间接法是利用酶标记的抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。双位点一步法是在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。在一步法测定中，应注意钩状效应，类同于沉淀反应中抗原过剩的后带
关于双位点一步法的基本介绍
在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。这种双位点一步不但简化了操作，缩短了反应时间，如应用高亲和力的单克隆抗体，测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的EL
粪便潜血单克隆抗体一步法试验
粪便潜血试验已被视为消化道出血的重要筛选指标，其试验方法主要分为化学方法和学方法两大类，近年来为解决潜血试验的特异性，已有应用免疫学方法的趋势。我们对免疫学方法中的单克隆抗体(单抗)一步法进行了临床和方法学的评价试验，报告如下。 一、材料与方法 1.试剂及操作：单抗一步检验法试剂盒(
一步法荧光定量PCR（染料）试剂盒说明
介绍 BIOGHC Elitefast SYBR One Step Kit专为以RNA为模板的定量PCR检测而设计。使用BIOGHC Elitefast SYBR One Step Kit，逆转录和定量PCR在一个反应管内一步完成，中间无开管和移液动作，操作非常简便，也大大提高了实验的效率，
双位点一步法与间接法的区别
间接法是利用酶标记的抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。双位点一步法是在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。在一步法测定中，应注意钩状效应，类同于沉淀反应中抗原过剩的后带
Hepatology：新方法允许一步法诊断HCV感染
当前诊断丙型肝炎病毒（HCV）感染的标准方法需要两个连续的步骤：用于筛选的HCV抗体测试，随后进行HCV RNA RT-PCR测试来验证病毒血症性HCV（viremic HCV, V-HCV）感染（编者注：即导致病毒血症的HCV感染）。这使得它未最优化、成本高、不方便、耗时和不能够在全球广泛使用或负
Hepatology：新方法允许一步法诊断HCV感染
当前诊断丙型肝炎病毒（HCV）感染的标准方法需要两个连续的步骤：用于筛选的HCV抗体测试，随后进行HCV RNA RT-PCR测试来验证病毒血症性HCV（viremic HCV, V-HCV）感染（编者注：即导致病毒血症的HCV感染）。这使得它未最优化、成本高、不方便、耗时和不能够在全球广泛使用
双位点一步法的原理和操作步骤
在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。这种双位点一步不但简化了操作，缩短了反应时间，如应用高亲和力的单克隆抗体，测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELIS
一步法超级荧光定量PCR试剂盒（探针）说明
介绍 BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit专为以RNA为模板的定量PCR检测而设计，适合荧光探针法定量PCR分析。使用BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit，逆转录和定量PCR在一个反应管内一步完成，中间无开管和移
低丰度核酸反转录及扩增实验——一步法
实验材料核酸试剂、试剂盒dNTPMnCl2MgCl2BSArTth DNA聚合酶仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤1. 用过氧化物酶，蛋白酶K和DNA酶预处理载玻片。2. 配置如下一步反应体系（总体积100 μl）（1）0.5 μl 100 μmol/l 正向引物（终浓度0.5 μmol/l）（2）
双位点一步法与间接法区别有哪些？
间接法是利用酶标记的抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。双位点一步法是在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。在一步法测定中，应注意钩状效应，类同于沉淀反应中抗原过剩的后带
Cell－Rep：一步法让干细胞变成神经元
本文亮点： 该研究找到了将人类多能干细胞（hPSC）直接诱导为GABA能神经元（iGN）的遗传因子 iGN表达端脑中间神经元标记物和亚型标记物SST iGN能够在体外实现功能上的成熟，释放GABA，并在体外形成突触网络 iGN可以在体内整合到宿主的突触回路中 近日，来自新加坡国立大学的
安捷伦发布AffinityScript一步法RTPCR试剂盒
安捷伦科技公司发布用于克隆、基因表达和定量的一步法RT-PCR试剂盒 2010年1月6日，北京安捷伦科技公司(NYSE:A)今天宣布推出了AffinityScript 一步法 RT-PCR试剂盒。这一试剂盒的问世意味着安捷伦Stratagene 产品部又一次携市场领先的高性能解决方案挺进一
张天宇小组实现一步法构建自主发光分枝杆菌
记者3月16日从中科院广州生物医药与健康研究院获悉，该院张天宇研究组构建了无抗性筛选标记的稳定自主发光的分枝杆菌。相关成果日前在线发表于《科学公共图书馆·综合》。 分枝杆菌引起的疾病如结核病、麻风病和布鲁利坏死病，一直是在全球引起高致残率和死亡率的疾病。多数致病性分枝杆菌生长缓慢，严重阻碍了对
一步法甲醛胶连检测蛋白质相互作用
INTRODUCTIONThis protocol describes a method for chemical cross-linking of proteins using formaldehyde. With the exception of zero-length cross-linker
我国科学家研发出“一步法”杂交制种新技术
近日，中国农业科学院作物科学研究所农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程“作物分子育种技术和应用创新团队”和“玉米遗传改良与新品种选育创新团队”利用基因编辑研发出一步法创制核不育系及其保持系的新技术，为第三代作物杂交育种技术提供了更高效的技术方案。相关研究论文近日在线发表在国际期刊《分子植物》
ELISA一步法误判高浓度抗HIV为阴性1例
酶联免疫吸附试验（ELISA）以其简便、快速、灵敏、特异性好，且适用于大批标本检测之特点，而广泛地应用于诸多领域，也是目前采供血机构筛查献血者各类传染性指标的主要检测方法。ELISA抗-HIV就其操作步骤来分有两类：即“一步法”与“二步法”，前者相对于后者，少一个洗板和加酶标记物再孵育的步骤，因此操
一步法TUNEL细胞凋亡检测技巧及常见问题分析
1. 对于贴壁细胞或细胞涂片： a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用碧云天生产的免疫染色固定液或4%多聚甲醛固定细胞30分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入碧云天生产的免疫染色强力通透液或含0.3% Triton X-100的PB
RTPCR一步法与两步法有什么不同
两步法RT-PCR比较 常见，在使用一个样品检测多个mRNA时比较有用。然而一步法RT-PCR具有其他优点。一步法RT-PCR在处理大量样品时易于操作，有助于减少残余污 染，因为在cDNA合成和扩增之间不需要打开管盖。一步法可以得到更高的灵敏度，最低可以达到0.1pg总RNA，这是因为整个cDNA样
张天宇小组实现一步法构建自主发光分枝杆菌
记者3月16日从中科院广州生物医药与健康研究院获悉，该院张天宇研究组构建了无抗性筛选标记的稳定自主发光的分枝杆菌。相关成果日前在线发表于《科学公共图书馆·综合》。 分枝杆菌引起的疾病如结核病、麻风病和布鲁利坏死病，一直是在全球引起高致残率和死亡率的疾病。多数致病性分枝杆菌生长缓慢，严重阻碍了对
ELISA一步法误判高浓度抗HIV为阴性1例
酶联免疫吸附试验（ELISA）以其简便、快速、灵敏、特异性好，且适用于大批标本检测之特点，而广泛地应用于诸多领域，也是目前采供血机构筛查献血者各类传染性指标的主要检测方法。ELISA抗-HIV就其操作步骤来分有两类：即“一步法”与“二步法”，前者相对于后者，少一个洗板和加酶标记物再孵育的步
真菌毒素检测技术新革命——一步法净化多毒素样品
近年来，真菌毒素对粮食饲料的污染是一个全球性的热点问题，不仅以黄曲霉毒素（Aflatoxin），赭曲霉毒素A（Ochratoxin A），单端孢菌毒素（Trichothecenes），玉米赤霉烯酮（Zearalenone），烟曲霉毒素（Fumonisin）和串珠镰刀菌素（Moniliformin
微波辐射下2苯并咪唑基烯烃的一步法合成
以8种肉桂酸衍生物和邻苯二胺为原料,在多聚磷酸(PPA)中,采用分段式微波辐射方法合成了8种2-苯并咪唑基烯烃衍生物, 并通过1HNMR、13CNMR和MS进行了表征。该反应时间为6～10min, 比传统的合成方法明显缩短, 产率为47%～94% (2-苯丁基苯并咪唑除外),后处理简单,为该类化