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凝胶阻滞实验分析RNA蛋白质作用常数实验

凝胶阻滞实验(gel reiardadon assay,又称为 mobthty shift assay)方法简单、灵敏,可以定量的特性使它在研究转录和基因调控中广泛的应用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 结合蛋白的纯化,确定一种已知或可能的 RNA 结合蛋白所识别的序列,建立反应常数(如亲和常数和解离常数)等。在本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理凝胶阻滞实验(gel reiardadon assay,又称为 mobthty shift assay)方法简单、灵敏,可以定量的特性使它在研究转录和基因调控中广泛的应用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 结合蛋白的纯化,确定一种已知或可能的 RNA 结合蛋白所识别的序列,建立反应常数(如亲和常数和解离常数)等。实验材料待分析蛋白质RNA试剂、试剂盒结合缓冲液电泳储存液仪器、耗材电泳仪电泳槽玻璃板垫片梳子聚丙烯酰胺凝胶电泳X 射线片暗盒放射物质......阅读全文

RNA-蛋白质的相互作用1

叶绿体RNA的体外加工与紫外交联分析RNARNA的合成l      DNA模板的线性化1.根据供应商的指导用合适的限制酶酶解含有DNA模板(如亚克隆在转录载体如pBluescript®(Stratagene)上的菠菜叶绿体psbA基因)的质粒(Schuster and Gruissem1991)。2

RNA-蛋白质的相互作用2

叶绿体mRNA3’末端的体外加工l      RNA加工反应1.在1.5ml微量离心管中加入下列反应液:缓冲液IVT(20×)                            0.5μl叶绿体蛋白提取物(20μg)                      Lμl缓冲液E           

RNA-蛋白质印迹法的技术应用

中文名称RNA-蛋白质印迹法英文名称Northwestern blotting定  义将经过电泳分离的蛋白质转移到膜上再与某种特异的RNA探针杂交,是研究蛋白质与RNA特异结合的技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

凝胶阻滞实验分析RNA-蛋白质作用常数实验

            实验方法原理 凝胶阻滞实验(gel reiardadon assay,又称为 mobthty shift assay)方法简单、灵敏,可以定量的特性使它在研究转录和基因调控中广泛的应用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 结合蛋

凝胶阻滞实验分析RNA-蛋白质作用常数实验

实验方法原理 凝胶阻滞实验(gel reiardadon assay,又称为 mobthty shift assay)方法简单、灵敏,可以定量的特性使它在研究转录和基因调控中广泛的应用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 结合蛋白的纯化,确定一种已知或可能的 RNA 结合蛋白所识别

凝胶阻滞实验分析RNA-蛋白质作用常数实验

凝胶阻滞实验(gel reiardadon assay,又称为 mobthty shift assay)方法简单、灵敏,可以定量的特性使它在研究转录和基因调控中广泛的应用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 结合蛋白的纯化,确定一种已知或可能的 RNA 结合蛋白所识别的序列,建立反应常数(如亲

硝酸纤维素滤膜结合实验确定RNA-蛋白质解离常数实验

            实验方法原理 利用硝酸纤维素滤膜结合可以测定蛋白与 DNA、RNA 间的结合,该方法的基础在于大多数蛋白可以与硝酸纤维素滤膜结合,如果蛋白质和核酸结合,那么该复合物也可以与硝酸纤维素滤膜结合,但是这种结合必须能够 承受过滤压力,并且蛋

硝酸纤维素滤膜结合实验确定RNA-蛋白质解离常数实验

实验方法原理 利用硝酸纤维素滤膜结合可以测定蛋白与 DNA、RNA 间的结合,该方法的基础在于大多数蛋白可以与硝酸纤维素滤膜结合,如果蛋白质和核酸结合,那么该复合物也可以与硝酸纤维素滤膜结合,但是这种结合必须能够 承受过滤压力,并且蛋白质在结合到硝酸纤维素滤膜上时还能够保持与核酸的结合,

硝酸纤维素滤膜结合实验确定RNA-蛋白质解离常数实验

利用硝酸纤维素滤膜结合可以测定蛋白与 DNA、RNA 间的结合,该方法的基础在于大多数蛋白可以与硝酸纤维素滤膜结合,如果蛋白质和核酸结合,那么该复合物也可以与硝酸纤维素滤膜结合,但是这种结合必须能够承受过滤压力,并且蛋白质在结合到硝酸纤维素滤膜上时还能够保持与核酸的结合。在本实验来源「RNA 实验指

如何分离DNA-蛋白质复合体与RNA-蛋白质复合体的混合物

可以借助一些多组分抽提试剂,比如TRIzol可以将RNA/DNA/蛋白质分开。经TRIzol处理后,RNA位于上层水相中,DNA处于中间层,蛋白质则在下层。可分别取出水相用异丙醇沉淀回收RNA;用乙醇沉淀中间层回收DNA;用异丙醇沉淀有机相回收蛋白质。