胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验

本实验中,我们将考察胰岛素受体的胰岛素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗体(antiphosphotyrosine antiboty) 来检测磷酸化的受体,后者可用 SDS-PAGE 来分离。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒纯化的鼠肝细胞质膜部分纯化的胰岛素受体純化的胰岛素受体猪胰岛素ATP一抗二抗自磷酸化缓冲液起始溶液SDS-PAGE 样品缓冲液蛋白质印迹转移液封闭缓冲液Tris-HClNaClTween-20仪器、耗材蛋白质凝胶电泳装置Whatman 3 MM 滤纸硝酸纤维素膜电泳转移槽ECLTM免疫印迹检测试剂盒实验步骤材料与设备纯化的鼠肝细胞质膜(见本单元实验 1)部分纯化的胰岛素受体,得自 WGA-琼脂糖柱层析(见实验本单元 3)純化的胰岛素受体,得自胰岛素琼脂糖柱层析(见实验本单元 4)猪胰岛素〔17,5pmol/L(0.1 mg/ml),溶于 0.001mol/LHCl〕(如 Si......阅读全文

胰岛素样生长因子受体介绍

  胰岛素样生长因子受体IGF必须与载体蛋白IGF结合蛋白(IGFBP)解离后与其特有受体结合才能发挥生物效应。IGF受体分两型,即IGF-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)和IGF-Ⅱ受体(IGF-ⅡR),前者属酪氨酸激酶型受体,是由两个α亚基组成异源四聚体糖蛋白;后者没有氨酸激酶活性。

抗胰岛素受体抗体(AIRA)的操作步骤

  用纯化人、猪或牛结晶胰岛素进行包被,待测血清作l:10稀释,再加最适量工作浓度的HRP标记抗人IgC抗体或标记的抗人IgA的F(ab’),加底物显色,阳性结果再检测血清AIAb的最高稀释度。

关于胰岛素受体的基本信息介绍

  胰岛素受体家族属于受体酪氨酸激酶家族( receptor tyrosine kinases,RTK) 的Ò型亚家族,成员包括胰岛素受体( insulin receptor,IR) ,胰岛素样生长因子受体( insulin-like growth factor receptor,IGFR),胰岛素

胰岛素受体底物的生物学作用

其家族已发现有4个成员IRS-1~IRS-4,在组织分布、亚细胞定位、发育过程的表达时序、与胰岛素的结合以及与含SH2蛋白质的相互作用方面有所差异。在胰岛素信号转导系统中是关键的中介分子;在胰岛素受体与细胞内含有SH2结构域信号分子的复杂网络之间起锚定蛋白的作用,参与多种激素、细胞因子的信号转导,并

胰岛素受体β抗体的主要操作方法

胰岛素是全身代谢的主要调节激素之一。这种激素的生物学作用包括碳水化合物、蛋白质和脂质代谢的整合。胰岛素增强葡萄糖、氨基酸和某些离子的膜转运。它还促进糖原储存,甘油三酯的形成和蛋白质和核酸的合成。免疫细胞化学研究在胰岛B细胞中定位胰岛素。胰岛素缺乏导致糖尿病,是一般人群发病率和死亡率的主要原因之一。胰

cell:胰岛素受体底物对营养平衡作用

(封面图片:肝脏特异性基因Irs1、Irs2双敲除的基因分析。背景为热图,基因表达数据用点表示,红、黄、蓝色点分别表示高、中、低值。左侧为对照小鼠,右侧为基因敲除后的小鼠,后者表现出发育延迟。图片提供:Dong等)  在肝脏中,胰岛素受体底物(insulin receptor substrat

抗胰岛素受体抗体(AIRA)临床意义

  阳性胰岛素依赖型糖尿病(1型)。  结果阳性可能疾病:糖尿病

自身免疫性胰岛素受体病的简介

  自身免疫性胰岛素受体病又称B型胰岛素抵抗(TBIR),是由于血中非外源性胰岛素诱导的胰岛素自身抗体及高浓度免疫活性胰岛素所致的自发性低血糖症。发病年龄多在30~39岁,好发于非洲裔美国女性,亚洲男女发病比例为2:3。临床主要特征为未使用外源性胰岛素的情况下,出现反复发作性严重性低血糖、胰岛素自身

胰岛素受体β抗体的主要使用方法

胰岛素是全身代谢的主要调节激素之一。这种激素的生物学作用包括碳水化合物、蛋白质和脂质代谢的整合。胰岛素增强葡萄糖、氨基酸和某些离子的膜转运。它还促进糖原储存,甘油三酯的形成和蛋白质和核酸的合成。免疫细胞化学研究在胰岛B细胞中定位胰岛素。胰岛素缺乏导致糖尿病,是一般人群发病率和死亡率的主要原因之一。胰

抗胰岛素受体抗体(AIRA)的注意事项

  不适宜人群:一般无特殊人群。  检查前禁忌:不宜吃含糖量高的食品,会直接影响检验结果。  检查时要求:当待测血清同时含有抗胰岛素抗体时,对抗胰岛素受体抗体(IRA)的测定结果有干扰,需用其他方法加以校正。

胰岛素亲和层析实验

试剂、试剂盒部分纯化的胰岛素受体NaCl胰岛素琼脂糖溶液 F溶液 G溶液 H仪器、耗材一次性小型塑料柱CentriconTM 浓缩器银染试剂盒实验步骤材料与设备部分纯化的胰岛素受体,得自 WGA-琼脂糖柱层析(见本单元实验 3)NaCl(5mol/L)胰岛素琼脂糖(~2 ml 预装胶)(SigmaC

胰岛素亲和层析实验

胰岛素亲和层析实验             试剂、试剂盒 部分纯化的胰岛素受体 NaCl 胰岛素琼脂糖

关于胰岛素受体底物的生物学作用介绍

  其家族已发现有4个成员IRS-1~IRS-4,在组织分布、亚细胞定位、发育过程的表达时序、与胰岛素的结合以及与含SH2蛋白质的相互作用方面有所差异。在胰岛素信号转导系统中是关键的中介分子;在胰岛素受体与细胞内含有SH2结构域信号分子的复杂网络之间起锚定蛋白的作用,参与多种激素、细胞因子的信号转导

胰岛素受体基因的功能与特点是什么

  人体中有很多激素,每种激素都有自己的特殊结构。在人体的细胞膜上,也有相应的特殊结 构,两者结合后就产生了一定的生理效应。医学上把细胞膜上的这种特殊结构叫做“受体”。 胰岛素必须与受体结合,固定在细胞膜上时才有可能使细胞周围的葡萄糖输送到细胞中去,一旦葡 萄糖进入细胞中去,即被细胞所利用。因此,在

胰岛素信号通路的相关作用介绍

  胰岛素信号通路胰岛素在发挥作用时需首先与靶细胞膜上的一种异四聚体受体相结合。胰岛素受体是膜糖蛋白,由两个单独的胰岛素结合结构域(α亚单位)与两个信号转导结构域(β亚单位)组成。胰岛素与受体结合后引起α亚单位构象改变,从而三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)能够结合

胰岛素的信号通路

胰岛素信号通路胰岛素在发挥作用时需首先与靶细胞膜上的一种异四聚体受体相结合。胰岛素受体是膜糖蛋白,由两个单独的胰岛素结合结构域(α亚单位)与两个信号转导结构域(β亚单位)组成。胰岛素与受体结合后引起α亚单位构象改变,从而三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)能够结合于β

胰岛素

制法要求本品应从检疫合格猪的冰冻胰脏中提取。生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。本品为动物来源,工艺中应进行病毒的安全性控制性状本品为白色或类白色的结晶性粉末。本品在水、乙醇中几乎不溶;在无机酸或氢氧化钠溶液中易溶。鉴别(1)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与

Cell亮点-丨胰岛素受体调控基因表达的新方式

  近些年来,研究人员发现,一些受体酪氨酸激酶 (receptor tyrosine kinase, RTK) 能够出现在细胞核内,可能参与某些基因表达调控,但是具体的分子机制,还未研究清楚【1】。作为一种受体酪氨酸激酶,胰岛素受体 (Insulin receptor, IR) 同样被发现存在于细胞

关于自身免疫性胰岛素受体病的病因分析

  自身免疫性胰岛素受体病病因尚不明确。多认为本病的发生与其伴发自身免疫性疾病及应用巯基药物有关,可伴发于系统性红斑狼疮、肝炎、垂体前叶功能减低、甲状腺功能亢进、甲状腺功能减低、甲状腺炎等许多自身免疫疾病中,其中系统性红斑狼疮可占50%;也可发生于健康人。此外,在未接受胰岛素治疗的胰岛素自身免疫综合

治疗自身免疫性胰岛素受体病的相关介绍

  自身免疫性胰岛素受体病尚无标准治疗方案,临床上多以糖皮质激素作为基础治疗药物,并根据病情选择个体化治疗方案,如怀疑与药物有关,可先停用可疑药物。   1.控制血糖   (1)使用大剂量胰岛素治疗,可使血糖接近正常水平。   (2)口服降糖药既能降低血糖,又可以在一定程度上提高胰岛素的敏感性

关于自身免疫性胰岛素受体病的诊断介绍

  1.有典型或自发性较严重低血糖的临床表现。  2.发作时血糖水平明显偏低。  3.尽管从未接受过胰岛素治疗,但血浆中存在大量胰岛素抗体,胰岛素受体抗体活性增高为主要诊断依据之一。  4.放射免疫法测血浆总免疫反应性胰岛素显著升高。  5.胰岛素抗体呈阳性,滴度明显升高。

胰岛素受体竟与基因表达之间存在关联性

  胰岛素受体(IR)信号传导是正常代谢控制的核心,并且在流行的慢性疾病中失调。胰岛素受体在细胞表面与胰岛素结合并通过细胞质激酶快速地传导信号。然而,调节胰岛素长期作用的机制尚不清楚。  在一项新的研究中,来自美国麻省总医院、哈佛医学院和哈佛大学陈曾熙公共卫生学院的研究人员发现胰岛素受体与细胞核中的

临床化学检查方法介绍抗胰岛素受体抗体介绍

抗胰岛素受体抗体介绍:  抗胰岛素受体抗体(IRA)是Flier等于1975年在研究合并黑色棘皮症的胰岛素抵抗综合征病人时发现的。此抗体可与存在于机体细胞膜上的胰岛素受体结合,而表现为对胰岛素的亲和性降低。检测IRA时常用传代人淋巴细胞IM-9(胞质膜上受体丰富,细胞易于获得)或人胎盘制备胰岛素受体

免疫学实验胰岛素抗体

胰岛素抗体介绍:  胰岛素抗体的出现有两种情况,一种出现于接受外源性胰岛素治疗的病人,主要和胰岛素制剂的纯度有关系,一种出现于从未接受胰岛素治疗的病人,称为胰岛素自身抗体。胰岛素抗体正常值:    阴性。胰岛素抗体临床意义:  胰岛素抗体对糖尿病和低血糖的诊断、鉴别诊断及治疗具有非常重要的意义。  

什么是胰岛素?胰岛素的发展历史简介

  胰岛素是由胰脏内的胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。胰岛素是机体内唯一降低血糖的激素,同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成。外源性胰岛素主要用来治疗糖尿病。  发现  胰岛素于1921年由加拿大人F.G.班廷和C.H.贝斯特首先发现。

可替代胰岛素注射的智能胰岛素贴片

  来自美国北卡罗来纳大学和北卡罗来纳州立大学的研究人员最近发明了一种智能胰岛素贴片,可以监测血糖水平,当血糖水平升高时可以自动按需释放胰岛素。  这项发表在《美国国家科学院院刊》上的研究表明,给糖尿病病人带来痛苦的胰岛素注射有望成为历史。  这种不大于1便士硬币的方形薄贴片内面密布超过100个呈矩

基础胰岛素和餐时胰岛素的介绍

  基础胰岛素可以抑制肝脏生成葡萄糖,采用合适剂量刻使空腹血糖维持在接近正常的水平,而餐前胰岛素能够满足食物吸收后的额外需求,从而降低餐后血糖的升高。确诊1型糖尿病后应尽早开始基础-餐时胰岛素治疗以提供生理模式的胰岛素补充。需要胰岛素的2型糖尿病患者通常先从基础胰岛素治疗开始(除了使用口服药物),但

以色列口服胰岛素梦想:不用注射的胰岛素

  大型制药企业在胰岛素新制剂研究开发方面投入巨大预算。大部分项目都以失败告终,理想的给药途径还是口服制剂,就像维生素或阿司匹林那样每天服用。   现在,还很不起眼的一家以色列生物技术企业,正在默默地进行一系列早期阶段试验,它将成为世界首个开发胰岛素口服药丸的公司,实现不仅是数百万糖尿病

胰岛素制剂胰岛素类似物的基本介绍

  胰岛素类似物是利用重组DNA技术制造的胰岛素类似物旨在产生更接近生理的胰岛素模式,尤其是针对1型糖尿病,且可降低发生低血糖的风险。速效胰岛素类似物(赖脯胰岛素、赖脯胰岛素-aabc、门冬胰岛素、超速效门冬胰岛素和谷赖胰岛素)用作餐前胰岛素时比普通胰岛素起效更快,药效更短;长效胰岛素类似物用作基础

胰岛素抵抗

  胰岛素抵抗是指各种原因使胰岛素促进葡萄糖摄取和利用的效率下降,机体代偿性的分泌过多胰岛素产生高胰岛素血症,以维持血糖的稳定。胰岛素抵抗易导致代谢综合征和2型糖尿病。50年代Yallow等应用放射免疫分析技术测定血浆胰岛素浓度,发现血浆胰岛素水平较低的病人胰岛素敏感性较高,而血浆胰岛素较高的人对胰