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蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验3

方案3 检测 PVDF 膜上的蛋白质实验实验材料含目的蛋白的 PVDF 膜试剂、试剂盒考马斯亮蓝染色液脱色液仪器、耗材塑料容器实验步骤1.依方案2 电转移后,将 PVDF膜迅速放于塑料容器中,并加人考马斯亮蓝染色液浸没膜。室温下染 5〜10 min 。2.弃去染色液,加人脱色液浸没膜,在 PVDF 膜完全脱色后换液。大约共需换 3〜4 次脱色液,共脱色 30min 到 1 h 。3.用水洗 PVDF 膜约 5〜10 min 。4.重复洗膜 5 次以上。......阅读全文

蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验3

方案3 检测 PVDF 膜上的蛋白质实验 实验材料 含目的蛋白的 PVDF 膜 试剂、试剂盒 考马斯亮蓝染色液脱色液 仪器、耗材 塑料容器 实验步骤 1.依方案2 电转移后,将 PVDF膜迅速放于塑料容器中,并加人考马斯亮蓝染色液浸没膜。室温下染

蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验

方案1 两相柱测序仪的样品上样实验实验材料样品溶液试剂、试剂盒甲醇(HPLC级)三氟乙酸(TFA)仪器、耗材双向测序柱(Agilent)氮气供应设备聚丙烯试管样品加样器上样漏斗实验步骤一、浸润层析柱1.将准备好的两相柱的亲水段(凸向接头)移开,放在一边。2.将柱的疏水段(凹向接头)和上样漏斗装配在一

蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验

方案1 两相柱测序仪的样品上样实验 方案2 将蛋白质从凝胶电转移至 PVDF 膜实验 方案3 检测 PVDF 膜上的蛋白质实验 方案4 浓缩聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白质点实验 方案5 磷酸化多肽的固相微量测序实验 方案6 羧基端序列分

蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验5

方案5 磷酸化多肽的固相微量测序实验 实验材料 放射性标记的多肽 试剂、试剂盒 碳二亚胺试剂偶联缓冲液甲醇-水多肽溶剂S3 (氯丁烷 正丁醇)闪烁液 仪器、耗材 ATZ-收集器加热块小滴管Mylar 聚酯薄膜蛋白质测序仪闪烁计数器Sequelon-AA 试剂

蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验4

方案4 浓缩聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白质点实验实验材料包含目的蛋白的二维电泳凝胶点试剂、试剂盒丙烯酰胺混合物(30%)琼脂糖 50g L考马斯亮蓝染色液脱色液平衡缓冲液10 X 聚丙烯酰胺电泳缓冲液浓缩胶仪器、耗材巴氏滴管聚丙烯管Protean II xi 2-D 电泳槽(Bio-Rad)注射器试管管式

蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验6

方案6 羧基端序列分析实验实验材料利用一维或二维聚丙烯酰胺凝胶分离的蛋白质或溶液中的蛋白质试剂、试剂盒乙酸酐 二甲基吡啶烷基化乙内硫酰脲 (ATH) 氨基酸标准品溴甲基萘的乙腈溶液考马斯亮蓝(R250)二异丙基乙胺(DIEA)的庚烷溶液乙酸乙酯甲醇N-甲基咪唑的乙腈溶液异氰酸苯酯的乙腈溶液哌嗪硫氰酸

蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验2

方案2 将蛋白质从凝胶电转移至 PVDF 膜实验实验材料含目的蛋白样品的聚丙烯酰胺凝胶( 未染色)试剂、试剂盒CAPS甲醇转移缓冲液仪器、耗材电印迹设备塑料容器聚偏二氟乙烯(PVDF)膜实验步骤要点:为了避免凝胶或膜的蛋白质污染,进行以下操作时需戴手套。1.凝胶电泳之后,立即将凝胶转移到一个塑料容器

N 端封闭蛋白质内部序列测定实验

实验材料 蛋白质样品(约 200 mol) 试剂、试剂盒 1%乙酸溶液(含丽春红 S 染料)1% 乙酸0.2 mol/L NaOH0.1 mol/L 乙酸溶液(含PVP-40)消化缓冲液1 mg/ml 胰蛋白酶层析溶液 A层析溶液 B 仪器、耗材 0.22 μm

N 端封闭蛋白质内部序列测定实验

实验方法原理 实验材料 蛋白质样品(约 200 mol)试剂、试剂盒 1%乙酸溶液(含丽春红 S 染料)1% 乙酸0.2 mol/L NaOH0.1 mol/L 乙酸溶液(含PVP-40) 消化缓冲液 1 mg/ml 胰蛋白酶层析溶液 A 层析溶液 B仪器、耗材 0.22 μm 硝酸纤维素膜酸洗过的

N 端封闭蛋白质内部序列测定实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 蛋白质样品(约 200 mol)