免疫沉淀实验——抗Ig血清免疫沉淀放射性标记抗原
实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDS仪器、耗材离心机摇床实验步骤1. 按基本方案进行，但以下说明的操作步骤已经修改： （2a）按每毫升加入2 μl 正常血清的量对放射性标记抗原进行预澄清处理，加入适量的抗血清，于4℃放置12~18 h， 111 000 g 离心10 min，保留上清。 （4a）加入1 μl 抗原特异性抗血清，3 μg 抗原持异性纯化单抗，或抗原特异性杂交瘤培养上清（克隆细胞系来源的加30 μl 或未克隆细胞系来源的加100 μl），用漩涡混合器混匀，于4℃放置2 h。然后加入合适量的抗血清，旋涡混合器混匀后，于4℃放置12~18 h。 （5a）按基本方案洗涤免疫沉淀物，但以1 000 g 离心7 min。 （6a）加入20~50 μl SDS样品缓冲液，不要旋起，否则免疫沉淀物会粘在液面上的管壁。 盖紧盖子，对免疫沉淀物、先在56℃保温1 h，然后在100℃保温5......阅读全文
免疫沉淀法的基本原理
1. 用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白。2. 防止非特异性的RNA的结合。3. 免疫沉淀把RNA结合蛋白及其结合的RNA一起分离出来。4.结合的RNA序列通过microarray（RIP-Chip），定量RT-PCR或高通量测序（RIP-Seq）方法来鉴定。
组织免疫沉淀中染色质的制备
实验概要此步骤描述了从组织中制备染色质，以用于后续的染色质免疫沉淀反应。每个免疫沉淀/抗体反应推荐使用肝组织 30 mg，但组织使用量可根据实际进行调整。每种组织的用量依据组织蛋白丰度、抗体亲和力和交联效率而定。每个免疫沉淀反应最适染色质的量为 5-15 μg 。每次交联免疫沉淀反应之前，需根据不同
有适合免疫沉淀IP的GST抗体吗
有适合免疫沉淀IP的GST抗体吗？近年来在原核表达体系中，谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用更为普遍，它的来源是日本血吸虫的25kDa大小的GST蛋白。GST标签系统具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便，以及利于GST抗体制备等特点和优势。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可从细菌裂解液中提取，在
染色质免疫沉淀（ChIP）技术的难点
染色质免疫沉淀技术（Chromatin Immunoprecipitation，简称ChIP）是研究体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体的特异性反应，可以真实地反映体内蛋白分子与基因组DNA结合的状况。下面我们就最基本的实验步骤，实验中的小技巧以及需要注意的问题简单介绍一下。1.
免疫沉淀法的基本原理
RIP 实验基本原理：1. 用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白。2. 防止非特异性的RNA的结合。3. 免疫沉淀把RNA结合蛋白及其结合的RNA一起分离出来。4.结合的RNA序列通过microarray（RIP-Chip），定量RT-PCR或高通量测序（RIP-Seq）方
技术和方案18－染色质免疫沉淀
试剂、试剂盒甲醛甘氨酸TBS蛋白酶抑制剂裂解缓冲液免疫共沉淀洗脱液TESTE仪器、耗材超声波粉碎仪实验步骤1.培养要分析的细胞。每一个样品，需要在三角瓶中培养 50~100ml 细胞至 OD600 大约为 1。2.甲醛处理细胞交联蛋白质和 DNA。加甲醛到细胞中至终浓度为 1%(37% 的甲醛按 1
免疫沉淀的培养细胞的裂解实验_单层培养的细胞的裂解
实验方法原理培养的动物细胞一般使用温和去垢剂来裂解。如果低浓度的去垢剂就能引起细胞的充分裂解（如1%NP-40或1%TritonX-100)，那么这对目标蛋白的影响可能比匀浆方法更温和。去垢剂的选择必须根据免疫沉淀所用的抗体的识别表位的性质来决定。实验材料单层细胞或悬浮细胞试剂、试剂盒裂解缓冲液PB
免疫资料——免疫学常用简称介绍
1：抗体查询常用名词 Reactivity （物种与抗体反应）：Species with which the antibody reacts Host Species （宿主）：Host in which the antibody was generated Applicati
可用于免疫沉淀的抗体类型和特点介绍
有3种类型的抗体可用于免疫沉淀：多克隆抗体，混合单克隆抗体和单克隆抗体。多克隆抗体混合单克隆抗体单克隆抗体反应强度极好抗体依赖性（极差到极好）极好特异性一般良好（有时本底高）极好，但有些出现交叉反应极好，避免使用有交叉反应的抗体优点稳定，多价反应特异供应不受限制稳定，多价反应特异供应不受限制缺点本底
免疫学实验血清免疫球蛋白（Ig）介绍
血清免疫球蛋白（Ig）介绍： 血清免疫球蛋白（Ig）的测定是检查体液免疫功能最常用的方法。通常检测IgG、IgM、IgA，这三类Ig就可以代表血清Ig的水平。血清免疫球蛋白（Ig）正常值： IgG 7.6-166g／L；IgA 0.71-3.35g／L；IgM 0.48-2.12g／L；IgD
免疫双扩散检测抗GFP血清抗体
实验概要本实验利用免疫双扩散检测了抗GFP血清抗体。实验原理在溶液中的可溶性多价抗原与血清抗体相遇，当两者的比例适当时可以形成一种网状的不溶性的大分子复合物，这叫作免疫沉淀反应。当这样的抗原和相应的抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相对扩散时，在抗原与抗体的比例适当处会形成可见的沉淀线，这叫免疫双扩散实验
免疫双扩散检测抗GFP血清抗体
实验概要本实验利用免疫双扩散检测了抗GFP血清抗体。实验原理在溶液中的可溶性多价抗原与血清抗体相遇，当两者的比例适当时可以形成一种网状的不溶性的大分子复合物，这叫作免疫沉淀反应。当这样的抗原和相应的抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相对扩散时，在抗原与抗体的比例适当处会形成可见的沉淀线，这叫免疫双扩散实验
沉淀反应实验原理、材料和实验方法（1）
可溶性抗原（如血清中的蛋白,组织浸出液,细胞裂解液等）与其相应的抗体在溶液中或凝胶中结合,若比例合适,可形成肉眼可见的抗原-抗体复合物,这就是免疫沉淀反应。免疫沉淀反应可以在小玻璃管中或毛细玻璃管及凝胶平板中进行。在用凝胶平板做实验时,常用琼脂糖凝胶做介质,有的加电流,使反应更快更灵敏。一、环状沉淀
沉淀反应实验原理、材料和实验方法（1）
可溶性抗原（如血清中的蛋白,组织浸出液,细胞裂解液等）与其相应的抗体在溶液中或凝胶中结合,若比例合适,可形成肉眼可见的抗原-抗体复合物,这就是免疫沉淀反应。免疫沉淀反应可以在小玻璃管中或毛细玻璃管及凝胶平板中进行。在用凝胶平板做实验时,常用琼脂糖凝胶做介质,有的加电流,使反应更快更灵
血清四项检查丙型肝炎抗体检测(抗HCVIg)
丙型肝炎抗体检测(抗-HCV-Ig)介绍: 丙型肝炎抗体是由丙型肝炎病毒(HCV)所引起。机体感染HCV后,在血清中抗体出现较晚。丙型肝炎抗体检测(抗-HCV-Ig)正常值: 抗-HCIgM阴性,抗-HCIgG阴性。丙型肝炎抗体检测(抗-HCV-Ig)临床意义: 抗-HCV-IgA是丙型肝炎诊断、预
染色质免疫沉淀法（Chromatin－immunoprecitation，ChIP）
染色质免疫沉淀法（Chromatin immunoprecitation，ChIP）是研究体内DNA与蛋白质相互作用的重要工具。它可以灵敏地检测目标蛋白与特异DNA片段的结合情况，还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系。核小体组蛋白可以发生多种翻译后的共价修饰，如乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等，这些
抗原和免疫血清制备实验—抗红细胞抗体（溶血素）制备
实验材料家兔试剂、试剂盒红细胞悬液生理盐水阿氏液仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1. 红细胞悬液的制备（1） 采血采取的绵羊血与灭菌的保存液等量混合，置冰箱中，可保存数周，也可用抗凝方法（2） 洗涤血球先将抗凝血液离心沉淀（2000 cpm×5分钟）吸去上清。加入2~3倍的生理盐水并用毛细滴管反复吹
免疫沉淀的培养细胞的裂解实验_悬浮生长的细胞的裂解
实验材料细胞实验步骤①细胞在480g的离心力条件下离心10min，弃去上清。②用冷PBS洗细胞两次，然后将洗过的细胞置于冰上。③重新悬浮沉淀，使1.0ml裂解液（冷却到4℃)中含大约1X107〜5X107个细胞。④冰上孵育细胞15min，并不时地振动小管。⑤4℃条件下20000g离心裂解液10min
磁珠与琼脂糖珠在免疫沉淀实验使用中的区别
琼脂糖珠长久以来，多孔的琼脂糖珠 (也称琼脂糖树脂) 作为免疫沉淀实验中的固相支持物常用的材料。琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ，它能够直接高效、快速结合抗体，而不需借助特殊的专业设备。图 1. 琼脂糖珠 在无需抗体饱和的情况下，琼脂糖
抗PMScl抗体(抗PM1抗体)的介绍
PM-1抗体是出现于多发性肌炎、皮肌炎或进行全身性硬化症/多发性肌炎（PSS/PM）重叠综合征患者的一种抗核抗体，又称抗PM-Sol抗体。Gelpi等（1990）用35S蛋氨酸标记Hela细胞抗原与抗PM-1抗体阳性的患者血清做免疫沉淀反应，证实被抗PM-1抗体沉淀的抗原是11～16种蛋白质组成
抗NOR90抗体的简介
抗NOR-90抗体，又称抗核仁组织区抗体、抗核仁编组区抗体等，属于抗核仁抗体，其靶抗原为位于核仁编组区的一种90kD蛋白，也称为人类上游结合因子，可积极参与rRNA转录的调节。抗NOR-90抗体检测主要运用放射免疫沉淀法（IP)和蛋白印迹法。间接免疫荧光法为抗NOR-90抗体重要的筛选实验，阳性
抗NOR90抗体的概述
抗NOR-90抗体，又称抗核仁组织区抗体、抗核仁编组区抗体等，属于抗核仁抗体，其靶抗原为位于核仁编组区的一种90kD蛋白，也称为人类上游结合因子，可积极参与rRNA转录的调节。抗NOR-90抗体检测主要运用放射免疫沉淀法（IP)和蛋白印迹法。间接免疫荧光法为抗NOR-90抗体重要的筛选实验，阳性
关于抗PMScl抗体的
科学家在皮肌炎（PM）与系统性硬化症相重叠的患者血清中首先报道了抗PM-1抗体，此自身抗体因多见于PM患者而得名，但后来研究发现该自身抗体更多见于PM和系统性硬化症（Scl)相重叠的患者中，故又称为抗PM-Scl抗体。抗PM-Scl抗体靶抗原主要位于核仁的颗粒部分，免疫沉淀法示靶抗原是由11〜1
免疫学实验抗丙型肝炎抗体检测（抗HCVIg）介绍
丙型肝炎抗体检测（抗-HCV-Ig）介绍： 丙型肝炎抗体是由丙型肝炎病毒（HCV）所引起。机体感染HCV后，在血清中抗体出现较晚。丙型肝炎抗体检测（抗-HCV-Ig）正常值： 抗-HCIgM阴性，抗-HCIgG阴性。丙型肝炎抗体检测（抗-HCV-Ig）临床意义： 抗-HCV-IgA是丙型肝炎诊
关于染色质免疫沉淀法的基本介绍
染色质免疫沉淀法（Chromatin immunoprecipitation，ChIP）是研究体内DNA与蛋白质相互作用的重要工具。它可以灵敏地检测目标蛋白与特异DNA片段的结合情况，还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系。 核小体组蛋白可以发生多种翻译后的共价修饰，如乙酰化、甲基化、磷酸化、泛
关于染色质免疫沉淀的基本信息介绍
染色质免疫沉淀（英语：Chromatin Immunoprecipitation, ChIP）被用来研究细胞内DNA与蛋白质相互作用，具体来说就是确定特定蛋白（如转录因子）是否结合特定基因组区域（如启动子或其它DNA结合位点）——可能定义顺反组。 ChIP还被用来确定基因组上与组蛋白修饰相关的
关于染色质免疫沉淀法改变分析介绍
是研究转录调控蛋白和相应核苷酸序列结合的常用方法，但是由于许多转录调控蛋白有相似或相同的DNA结合位点，这种体外分析获取的结果不一定能真实地反映体内转录调控蛋白和DNA结合的状况。染色质免疫沉淀分析（ChIP）是基于体内分析发展起来的方法，它能真实、完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白，是确定
免疫沉淀（IP）常见问题分析与解决办法
免疫沉淀（IP）常见问题分析 问题 可能原因 解决办法 高背景 吸取了不溶于去污剂中的蛋白（沉淀） 离心后立刻吸取上清，如果发生了重悬，则需要再次离心
RNA免疫沉淀rPCR方法进行体内分离核糖核蛋白复合体实验
RNA 免疫沉淀-随机聚合链反应方法可用来鉴定细胞内 RNP 复合物中的 RNA 组分。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理RNA 免疫沉淀-随机聚合链反应方法可用来鉴定细胞内 RNP 复合物中的 RNA 组分。实验材料载体酵母 tRNARQ1 DNA 酶糖原小牛肠碱性磷酸酶
RNA免疫沉淀rPCR方法进行体内分离核糖核蛋白复合体实验
实验方法原理 RNA 免疫沉淀-随机聚合链反应方法可用来鉴定细胞内 RNP 复合物中的 RNA 组分。 实验材料 载体酵母 tRNA R