免疫沉淀的培养细胞的裂解实验_悬浮生长的细胞的裂解
实验材料细胞实验步骤①细胞在480g的离心力条件下离心10min，弃去上清。②用冷PBS洗细胞两次，然后将洗过的细胞置于冰上。③重新悬浮沉淀，使1.0ml裂解液（冷却到4℃)中含大约1X107〜5X107个细胞。④冰上孵育细胞15min，并不时地振动小管。⑤4℃条件下20000g离心裂解液10min。⑥小心地把上清移到另一个小管中，应确保不要碰到沉淀物。将裂解液置于冰上，以备免疫沉淀所用。细胞裂解液可以使用干冰和乙醇的混合物迅速冰冻，-70℃条件下可以长期储存。但是，通过免疫沉淀分离的蛋白复合物的分析，建议使用新制备的细胞裂解液。展开......阅读全文
免疫沉淀的培养细胞的裂解实验_悬浮生长的细胞的裂解
实验材料细胞实验步骤①细胞在480g的离心力条件下离心10min，弃去上清。②用冷PBS洗细胞两次，然后将洗过的细胞置于冰上。③重新悬浮沉淀，使1.0ml裂解液（冷却到4℃)中含大约1X107〜5X107个细胞。④冰上孵育细胞15min，并不时地振动小管。⑤4℃条件下20000g离心裂解液10min
免疫沉淀的培养细胞的裂解实验_单层培养的细胞的裂解
实验方法原理培养的动物细胞一般使用温和去垢剂来裂解。如果低浓度的去垢剂就能引起细胞的充分裂解（如1%NP-40或1%TritonX-100)，那么这对目标蛋白的影响可能比匀浆方法更温和。去垢剂的选择必须根据免疫沉淀所用的抗体的识别表位的性质来决定。实验材料单层细胞或悬浮细胞试剂、试剂盒裂解缓冲液PB
用于免疫沉淀的培养细胞的裂解实验
实验方法原理 培养的动物细胞一般使用温和去垢剂来裂解。如果低浓度的去垢剂就能引起细胞的充分裂解（如1%NP-40或1%TritonX-100)，那么这对目标蛋白的影响可能比匀浆方法更温和。去垢剂的选择必须根据免疫沉淀所用的抗体的识别表位的性质来决定。实验材料 单层细胞或悬浮细胞试剂、试剂盒 裂解缓冲
用于免疫沉淀的培养细胞的裂解实验
方法A:单层培养的细胞的裂解 方法B:悬浮生长的细胞的裂解 实验方法原理 培养的动物细胞一般使用温和去垢剂来裂解。如果低浓度的去垢剂就能引起细胞的充
标记裂解培养细胞实验
基本方案 温和去垢剂裂解法（对贴壁细胞）基本方案 温和去垢剂裂解法（对非贴壁细胞）SDS煮沸法裂解细胞实验方法原理实验材料待标记的培养细胞 试剂、试剂盒37℃标记培养液
32－P－标记裂解培养细胞实验——SDS煮沸法裂解细胞
实验材料待标记的培养细胞固相化金黄色葡萄球菌（可选）试剂、试剂盒37℃标记培养液1 Ci／ml H3(32)PO4(溶于 HCl)冰冷 Tris 平衡盐水(TBS) ／磷酸盐平衡盐水(PBS)SDS裂解缓冲液RIPA 校正液免疫沉淀洗液仪器、耗材橡皮细胞刮子Sorvall 冷冻离心机(或其他)树脂玻
培养细胞标记和裂解物的制备实验——温和去污裂解法
实验材料培养细胞试剂、试剂盒DMEMHClTBSTris仪器、耗材微量离心管Plexiglas盒吸头细胞刮子冷冻离心机实验步骤1. 培养待标记的细胞至适当的生长期。 对于贴壁细胞： 2a. 吸去培养液，用37℃的含血清不加标记物的标记培养液洗尽残存的含磷酸盐培养液，吸尽该培养液。 3a. 加入
32－P－标记裂解培养细胞实验
基本方案 温和去垢剂裂解法（对贴壁细胞） 基本方案 温和去垢剂裂解法（对非贴壁细胞） SDS煮沸法裂解细胞 实验方法原理
32－P－标记裂解培养细胞实验
实验方法原理 实验材料 待标记的培养细胞试剂、试剂盒 37℃标记培养液1 Ci／ml H3(32)PO4(溶于 HCl)冰冷 Tris 平衡盐水(TBS) ／磷酸盐平衡盐水(PBS)温和裂解缓冲液／RIPA 裂解缓冲液仪器、耗材 树脂玻璃挡板(1 in 厚)取液器吸头树脂玻璃盒37℃微量离心管一次性
悬浮培养细胞生长曲线的绘制实验
实验方法原理以三种不同细胞浓度进行系列细胞培养，每天计数细胞直至平台期。实验步骤材料无菌悬浮细胞培养培养液，l00 mlD-PBSA(细胞计数用）24 孔板非无菌装培养板的塑料盒CO2 温箱或 5% C02 以充盈塑料盒操作步骤1. 如单层培养那样（见方案 21.8 ) 将生长液中的细胞悬液以不同浓
悬浮培养细胞生长曲线的绘制实验
实验方法原理以三种不同细胞浓度进行系列细胞培养，每天计数细胞直至平台期。实验步骤 材料 无菌 悬浮细胞培养 培养液，l00 ml D-PBSA(细胞计数用） 24 孔板 非无菌 装培养板的塑料盒 CO2 温箱或 5% C02 以充盈塑料盒 操作步骤 1. 如单层培养那样（见方案 21.8
悬浮培养细胞生长曲线的绘制实验
实验方法原理 以三种不同细胞浓度进行系列细胞培养，每天计数细胞直至平台期。实验步骤 材料无菌悬浮细胞培养培养液，l00 mlD-PBSA(细胞计数用）24 孔板非无菌装培养板的塑料盒CO2 温箱或 5% C02 以充盈塑料盒操作步骤1. 如单层培养那样（见方案 21.8 ) 将生长液中的细胞悬液以不
培养细胞标记和裂解物的制备实验
实验材料 培养细胞试剂、试剂盒 DMEMHClTBSTris仪器、耗材 微量离心管Plexiglas盒吸头细胞刮子冷冻离心机实验步骤 1. 培养待标记的细胞至适当的生长期。 对于贴壁细胞： 2a. 吸去培养液，用37℃的含血清不加标记物的标记培养液洗尽残存的含磷酸盐培养液，吸尽该培养液。 3a.
培养细胞标记和裂解物的制备实验
温和去污裂解法 SDS煮沸法 实验材料 培养细胞 试剂、试剂盒
培养细胞标记和裂解物的制备实验
温和去污裂解法 SDS煮沸法 实验材料 培养细胞 试剂、试剂盒
氮舱减压法裂解培养细胞实验
实验方法原理 通过来自增压舱中的氮气减压膨胀来破碎细胞是一种快速、有效的细胞和组织的匀浆方法，能释放完整的细胞器和制备细胞膜。该方法的原理很简单：细胞放在一个压力舱中，在高压下（约5500kPa，相当于800psi)氮气首先被溶解在细胞中，当压力突然消失时，氮从溶液中迅速气化，并引起细胞膜的拉伸和扩
氮舱减压法裂解培养细胞实验
实验方法原理通过来自增压舱中的氮气减压膨胀来破碎细胞是一种快速、有效的细胞和组织的匀浆方法，能释放完整的细胞器和制备细胞膜。该方法的原理很简单：细胞放在一个压力舱中，在高压下（约5500kPa，相当于800psi)氮气首先被溶解在细胞中，当压力突然消失时，氮从溶液中迅速气化，并引起细胞膜的拉伸和扩展
氮舱减压法裂解培养细胞实验
基本方案 实验方法原理 通过来自增压舱中的氮气减压膨胀来破碎细胞是一种快速、有效的细胞和组织的匀浆方法，能释放完整的细胞器和制备细胞膜。该方法的原理很简单：细
细胞裂解方法：化学裂解、酶裂解和机械裂解
裂解方法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解。化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法，通常会很少使DNA 断裂。这两种方法（包括SDS 和溶菌酶处理等）提取纯化DNA中常用的方法。机械裂解可以更均一的裂解细胞，同化学裂解相比，机械处理具有更高的裂解效率和更低的选择性。机械处理可以更剧烈和全面的裂解细胞，
用于激酶分析的细胞裂解实验
实验材料培养细胞（贴壁贴壁细胞在100 mm 组织培养板中约 70% 生长成片／悬浮细胞浓度 为 10^6 细胞／ml）试剂、试剂盒PBS裂解缓冲液蛋白酶抑制剂储存液仪器、耗材微量离心机实验步骤1. 用预冷的 PBS 洗细胞 2 次，将最后的洗液尽可能吸尽。2. 加入 0.75 ml 裂解缓冲液重悬
用于激酶分析的细胞裂解实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 培养细胞（贴壁贴壁细胞在100 mm 组织培养板中约 7
用于激酶分析的细胞裂解实验
实验方法原理 实验材料 培养细胞（贴壁贴壁细胞在100 mm 组织培养板中约 70% 生长成片／悬浮细胞浓度 为 10^6 细胞／ml）试剂、试剂盒 PBS裂解缓冲液蛋白酶抑制剂储存液仪器、耗材 微量离心机实验步骤 1. 用预冷的 PBS 洗细胞 2 次，将最后的洗液尽可能吸尽。2. 加入 0.
细胞裂解液的制备
一、试剂准备1、新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液: 150 mM NaCL 1% NP-40 (去垢剂) 0.1% SDS (去垢剂) 2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入) 2ug/ml Leupeptin (
方案－21.9－悬浮培养细胞生长曲线的绘制实验
方案21.9 悬浮培养细胞生长曲线的绘制 实验方法原理 以三种不同细胞浓度进行系列细胞培养，每天计数细胞直至平台期。
红细胞裂解的实验方法步骤
IntroductionPrior to using lymphoid tissue cell suspensions for flow cytometric analysis and/or for in vitro functional assays, it is recommended to r
细胞/组织裂解液的制备
溶液准备 2×样品缓冲液：130mM Tris-HCl （ pH8.0 ） , 20% （ v/v ） 甘油 , 4.6% （ w/v ） SDS , 0.02% 溴酚蓝 , 2%DTT PBS （ pH7.4 ） :10mM Na2HPO4，1.8mM KH2PO4 ，50
于免疫印迹的动物培养细胞、酵母和细菌的裂解实验
实验方法原理 去垢剂裂解细胞法通常用于培养的动物细胞。典型的离子型去垢剂SDS(如2%SDS)能充分地裂解细胞。培养的动物细胞和细菌，如可以使用这种方式裂解。假如实验所用的抗体识别的抗原决定簇取决于自然空间构象，并对还原环境敏感，那么在裂解缓冲液中应除去二硫苏糖醇，并建议使用非还原/无脲的凝胶实验材
用于免疫印迹的动物培养细胞、酵母和细菌的裂解实验
实验方法原理去垢剂裂解细胞法通常用于培养的动物细胞。典型的离子型去垢剂SDS(如2%SDS)能充分地裂解细胞。培养的动物细胞和细菌，如可以使用这种方式裂解。假如实验所用的抗体识别的抗原决定簇取决于自然空间构象，并对还原环境敏感，那么在裂解缓冲液中应除去二硫苏糖醇，并建议使用非还原/无脲的凝胶实验材料
淋巴细胞介导的细胞裂解的定义
中文名称淋巴细胞介导的细胞裂解英文名称lymphocyte-mediated cell lysis定 义即细胞毒性T细胞或NK细胞可通过颗粒胞吐而分泌穿孔素和颗粒酶等效应分子，损伤靶细胞膜并使之裂解。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫学检测和诊断（三级学科）
淋巴细胞介导的细胞裂解的定义
中文名称淋巴细胞介导的细胞裂解英文名称lymphocyte-mediated cell lysis定 义即细胞毒性T细胞或NK细胞可通过颗粒胞吐而分泌穿孔素和颗粒酶等效应分子，损伤靶细胞膜并使之裂解。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫学检测和诊断（三级学科）