制备电泳实验——连续电泳
仪器、耗材聚丙烯酰胺凝胶电泳琼脂糖电泳实验步骤1. 连续洗脱电泳使用连续洗脱的聚丙烯酰胺凝胶电泳或琼脂糖电泳能制备微克到毫克级的多肽,蛋白或核酸。装置可以是各种各样的。有的是把样品直接加在固体凝胶的表面,分子经过电泳分离后,由流动的缓冲液洗脱,纯化后的分子被浓缩,并由蠕动泵和部分收集器收集。2. 连续自由流动电泳连续自由流动电泳是一种经典的用于分析的电泳,分辨率不高。现在较多的用于制备,如多通道流动电泳技术能在每小时处理几十毫克样品,并具有较高的活力。3. 空间电泳在地面实验中,对流和样品沉降是自由溶液电泳分离的两大限制因子。但在空间的微重力条件下,这两个因子可以被忽略,因而在空间使用连续自由流电泳可以得到高产量和高质量的分离纯化样品。国际上对空间电泳的探索开始于 50 年代。1971 年,美国 Apollo-14 开始了第一次空间电泳实验,尽管没有成功,但在此基础上,70 年代末美国和西德在空间或空间实验室都成功地分离了细胞。......阅读全文
制备电泳实验——连续电泳
仪器、耗材聚丙烯酰胺凝胶电泳琼脂糖电泳实验步骤1. 连续洗脱电泳使用连续洗脱的聚丙烯酰胺凝胶电泳或琼脂糖电泳能制备微克到毫克级的多肽,蛋白或核酸。装置可以是各种各样的。有的是把样品直接加在固体凝胶的表面,分子经过电泳分离后,由流动的缓冲液洗脱,纯化后的分子被浓缩,并由蠕动泵和部分收集器收集。2. 连
不连续电泳中,其不连续体现在几个方面
不连续电泳有四个不连续性,即凝胶浓度的不连续性、缓冲液离子成分的不连续性、缓冲液pH梯度的不连续性及电位梯度的不连续性。由于浓缩胶的堆积作用,可使样品(即使是稀样品)在浓缩胶和分离胶的界面上先浓缩成一窄带,然后在一定浓度(或一定浓度梯度)的凝胶上进行分离。由于不同孔径凝胶的分子筛作用,使不连续电泳的
连续自由流动电泳的定义
中文名称连续自由流动电泳英文名称continuous free flow electrophoresis定 义在无固定相的电解质溶液中电泳分离的同时,用与电场方面垂直的液流连续引出并分部收集所分离的各组分的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
连续自由流动电泳的定义
中文名称连续自由流动电泳英文名称continuous free flow electrophoresis定 义在无固定相的电解质溶液中电泳分离的同时,用与电场方面垂直的液流连续引出并分部收集所分离的各组分的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
连续流动电泳的定义
中文名称连续流动电泳英文名称continuous flow electrophoresis定 义在所分离的物质到达电泳装置某部位,以连续液流冲洗并分部收集从该电泳部位走出各组分的技术。属制备型电泳。常用的如聚丙烯酰胺凝胶连续流动电泳。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
连续流动电泳的定义
中文名称连续流动电泳英文名称continuous flow electrophoresis定 义在所分离的物质到达电泳装置某部位,以连续液流冲洗并分部收集从该电泳部位走出各组分的技术。属制备型电泳。常用的如聚丙烯酰胺凝胶连续流动电泳。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
不连续凝胶电泳的概念
中文名称不连续凝胶电泳英文名称discontinuous gel electrophoresis定 义在一个凝胶电泳系统中不同部位的pH、离子强度、缓冲液成分或凝胶孔隙大小不同的凝胶电泳。其目的在于提高电泳分离的范围和分辨率。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
不连续凝胶电泳的原理
不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳基本原理不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳包含了两种以上的缓冲液成分、pH值和凝胶孔径,而且在电泳过程中形成的电位梯度亦不均匀。由此产生的浓缩效应、电荷效应和分子筛效应。1.浓缩效应 样品在电泳开始时,通过浓缩胶被浓缩成高浓度的样品薄层(一般能浓缩几百倍),然后再被分离。当通电后,在样
不连续非变性凝肢电泳实验
实验方法原理 非变性凝胶电泳通常是在高 pH(8.8)缓冲液条件下进行。这时,多数蛋白质带负电荷,并向阳极迁移。实验材料 蛋白质溶液试剂、试剂盒 丙烯酰胺双丙烯酰胺Tris 碱盐酸过硫酸铵TEMED甘氨酸甘油溴酚蓝甲醇冰醋酸仪器、耗材 Bio-Rad Min-Protean II 凝胶电泳槽微量注射
不连续非变性凝肢电泳实验
实验方法原理 非变性凝胶电泳通常是在高 pH(8.8)缓冲液条件下进行。这时,多数蛋白质带负电荷,并向阳极迁移。 实验材料 蛋白质溶液
不连续非变性凝肢电泳实验
非变性凝胶电泳,也称为天然凝胶电泳。在凝胶中蛋白质的分离取决于它所带电荷及分子大小。按丙烯酰胺凝胶孔径大小去筛分不同尺寸蛋白质的同时,在分离胶酸性 pH 条件下高电荷的蛋白质的泳动速度会更快。这种方法可以区分仅有一个电荷单位差别的分子。与 SDS-PAGE 电泳相比,非变性凝胶大大降低了蛋白质变性发
不连续凝胶电泳色谱仪分析的不连续性表现
不连续凝胶电泳色谱仪分析的不连续性表现在凝胶层、缓冲液离子组成、缓冲液pH和电位梯度的不连续。一、凝胶层的不连续性: 1、样品胶:为大孔胶,采用光聚合法制备。样品预先加在其中,起防止对流的作用,避免样品跑到上面的缓冲液中。目前电泳一般不制作此胶。 2、浓缩胶:为大孔胶,采用光聚合
不连续凝胶电泳色谱仪分析的不连续性表现
不连续凝胶电泳色谱仪分析的不连续性表现在凝胶层、缓冲液离子组成、缓冲液pH和电位梯度的不连续。一、凝胶层的不连续性:1、样品胶:为大孔胶,采用光聚合法制备。样品预先加在其中,起防止对流的作用,避免样品跑到上面的缓冲液中。目前电泳一般不制作此胶。2、浓缩胶:为大孔胶,采用光聚合法制备。起防止对流的作
不连续凝胶电泳的的定义和特点
中文名称不连续凝胶电泳英文名称discontinuous gel electrophoresis定 义在一个凝胶电泳系统中不同部位的pH、离子强度、缓冲液成分或凝胶孔隙大小不同的凝胶电泳。其目的在于提高电泳分离的范围和分辨率。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
聚丙烯酰胺凝胶不连续圆盘电泳实验
实验方法原理 利用各种载脂蛋白在一定pH下所带电荷数量及颗粒大小不同的差异,从而在电场中获得不同的迁移庇,达到分离测定的目的,试剂、试剂盒 考马斯蓝溴酚蓝水溶液冰醋酸实验步骤 一、实验试剂:1. 凝胶储备液制备及工作混合液比例表2. 脱色剂:乙醇1000ml,冰醋酸320ml加水至4000ml.3.
聚丙烯酰胺凝胶不连续圆盘电泳实验
实验方法原理利用各种载脂蛋白在一定pH下所带电荷数量及颗粒大小不同的差异,从而在电场中获得不同的迁移庇,达到分离测定的目的,试剂、试剂盒考马斯蓝溴酚蓝水溶液冰醋酸实验步骤一、实验试剂:1. 凝胶储备液制备及工作混合液比例表2. 脱色剂:乙醇1000ml,冰醋酸320ml加水至4000ml.3. 染色
不连续体系和连续体系的聚丙烯酰胺凝胶电泳比较有何区别
由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是:(1)使用两种不同浓度的凝胶系统;(2)配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不同,并且与电泳槽中电泳缓冲液的成分、pH也不相同。在实验
聚丙烯酰胺胶电泳色谱仪的不连续体系
聚丙烯酰胺胶电泳色谱仪的电泳体系有连续体系和不连续体系,连续体系是在整个电泳体系中采用的缓冲液成分、pH和凝胶孔径都相同,不连续体系是在电泳体系中采用两种以上的缓冲液成分、pH和凝胶孔径。其中不连续体系的盘状凝胶电泳zui为常用。一、盘状凝胶电泳体系组成:1、凝胶层:(1)样品胶:T = 3.1%,
蛋白质单向SDS凝胶电泳实验——连续SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
电泳可用于分离复杂的蛋白质混合物,研究蛋白质的亚基组成以及证实蛋白质的均一性等,还能纯化出蛋白质用于后续的研究工作。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,凝胶的孔径,蛋白质的电荷、大小、性质等因素共同决定了蛋白质的电泳迁移率。实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDS磷酸仪器、耗材电泳仪离心机实验步骤1. 按“Laemm
连续切片
中文名称连续切片英文名称serial section定 义从同一组织包埋块上连续切成的切片系列。通过对连续切片的分析可构建细胞或组织的三维图像。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
小型连续发酵实验——连续培养法
在分批培养中,一次加入所有的培养基,不予补充,不再更换。随着微生物的活跃生长,培养基中营养物质逐渐消耗,有害代谢产物不断积累,细菌的对数生长期不可长时间维持。如果在培养器中不断补充新鲜营养物质,并及时不断地以同样速度排出培养物(包括菌体及代谢产物),理论上讲,对数生长期就可无限延长。实验方法原理在分
连续灭菌设备的常压连续杀菌概述
常压连续杀菌连续式喷淋杀菌机吸收了当前德国、意大利、日本等著名公司的先进技术全新设计而成,采用美国名牌REXNORD耐高温聚丙烯(CPP)网链,经特殊链轮进行输送,具有输送平稳,导热率很低,确保了各温区的温控精度。连续式喷淋杀菌机设有多个温区,温差梯度小,既能保证良好的杀菌效果,又可减少破瓶率,
【抗疫药】羟氯喹连续合成和连续分离
一、背景介绍 新型冠性病毒疫情蔓延全球,急需寻找有效药物。除了瑞德西韦,氯喹与羟氯喹同时被WHO和美国总统点名加入海外抗疫候选药物单用或组合应用的多国多中心临床试验(Solidarity Clinical Trial)。 美国选用氯喹/羟氯喹作为新型冠性病毒治疗候选药物的原因在于这是
不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪的三大效应
不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪是在电泳体系中采用两种以上的缓冲液成分、pH和凝胶孔径,其中不连续盘状凝胶电泳zui为常用。在不连续盘状凝胶电泳中存在样品的浓缩效应、凝胶的分子筛效应和电荷效应三大效应,由于这三种物理效应,使样品分离效果好,分辨率高。一、浓缩效应: 1、凝胶层的不连续性:(1)样品胶
酸尿素连续-PAGE
实验材料冷冻干燥后的蛋白样品或块状蛋白样品试剂、试剂盒丙烯酰胺二苯基碘酰氯贮存冰醋酸亚甲基蓝储存液槽缓冲液上样缓冲液对甲苯亚磺酸钠尿素仪器、耗材光源实验步骤1.按以下配方制备凝胶混合物(15% 丙烯酰胺、2.5mol/L 尿素、O.9mol/L 醋酸,PH2.7)。2.往微型胶模具中灌制凝胶。3.在
概述连续式冻干机
近年来,国内外开始探索和使用连续式真空冷冻干燥设备。连续式设备的特点是适于品种单一而产量庞大、原料充足的产品生产,特别适合浆状和颗粒状制品的生产。连续式设备容易实现自动化控制,简化了人工操作和管理,其主要缺点是成本高。 随着GMP认证的结束,国产的优秀医药用冻干设备全面进入了现代化阶段,功
连续波的特点
中文名称:连续波 英文名称:continuous wave 应用学科:机械工程(一级学科);光学仪器(二级学科);激光器件和激光设备-激光器件技术参数(三级学科) 一种无线电通讯模式特点是:收发频率不同,上行下行之间没有时隙。
核酸电泳(RNA电泳与DNA电泳)
(一)DNA的凝胶电泳:凝胶电泳是分子克隆的中心技术之一。琼脂糖凝胶用于分离大于200~1000bp的片段;操作简单、快速,且分离范围广,分辨率高。2.聚丙烯酰胺凝胶用于分离5-500bp的片段; 效果好、分辨率极高,相差1bp的DNA片断就能分开,能容纳相对大量的DNA ,用于核苷酸多态性的分析。
岩石动态开裂快速连续到非连续分析方法研究获进展
深部地下工程在爆破开挖、地震作用下的岩体开裂破坏实质是一个动态的过程,准确分析模拟其过程需要建立岩石动态开裂破坏过程的连续到非连续数值模拟分析方法。经典细胞自动机方法计算无需组装总体刚度矩阵,极大节省计算内存,但是计算效率相比传统有限元等方法有所降低,因此,在传统的连续到非连续细胞自动机方法的基
建立岩石开裂破坏过程模拟的连续非连续软件分析系统
岩石开裂破坏过程及其导致的工程灾害是深部岩石工程遇到的难点和重点,但其具体机制仍不清楚。中国科学院武汉岩土力学研究所副研究员晏飞、研究员潘鹏志等,开发完成了岩石开裂破坏过程分析模拟的二维连续-非连续细胞自动机软件系统,通过对工程中岩爆发生过程模拟,揭示岩爆孕育演化过程,获得岩爆发生机理。 研究