T7RNA聚合酶/启动子表达实验2

实验材料蛋白质试剂、试剂盒氨基酸混合物M9培养基甲硫氨酸甲醇仪器、耗材荧光显微镜离心机分光光度计实验步骤1. 将含有待表达基因的片段亚克隆于pT7-5、pT-6或pT7-7中,转化一种标准大肠杆菌菌株,此菌株不应带有可指导T7 RNA聚合酶合成的质粒。转化物涂布于氨苄青霉素平皿,于37℃温育培养过夜。 2. 挑取独立的转化菌落于LB/氨苄青霉素培养基中,37℃培养,通过小量制备方法获得质粒DNA。以限制性酶谱分析确证基因正确插入与否。 3. 从pGP1-2转化大肠杆菌K38株涂布LB/卡那霉素平皿上,30℃下培养过夜(24 h)。挑取单个的转化菌落于LB/卡那霉素培养基中,30℃培养。4. 将一含有Pt7控制下的待表达基因的载体转化入大肠杆菌K38/pGP1-2,于LB/卡那霉素培养基上生长(转化期间细胞可经热激处理),将转化物涂布于LB/氨苄青霉素......阅读全文

Cesium-Chloride-Purification-of-T7

SummaryCleaner stocks of T7 that concentrates and purifies T7 bacteriophage.ProtocolGrow 100mL of permissive cells to a density of 108 to 109 cells/ml

mRNA-Amplification-with-T7-RNA-Polymerase

MaterialsMessageAmp II aRNA Amplication Kit (Cat #1751, Ambion)100% EthanolRNA samples (e.g. 1 µg RNA per sample)ProcedureReverse transcriptionVerify

T7-DNA聚合酶测序技术

一、概述T7 DNA聚合酶最初具有5'→3'聚合酶活性以及单链和双链3'→5'外切酶活性。当T7 DNA聚合酶用适当方法处理后,可使3'→5'外切酶活力明显下降。改造后的T7 DNA聚合酶又称T7测序酶。使用T7测序酶得到的测序数据具有在每个碱

梅特勒超越系列滴定仪T7

产品简介品牌Mettler-Toledo/梅特勒-托利多应用范围通用型仪器种类通用电位滴定仪 梅特勒超越系列滴定仪T7 除了具备超越系列滴定仪系列的诸多优点,如 One Click 一键滴定、即插即用和方法数据库等,还具有如下主要优点:直接扩展电导率测量和滴定更灵活的方法循环升级至 T9任务列表连续

Expression-Protocol-in-M9-Minimal-Media-via-T7-Promoter

The following protocol has been used successfully to 15N or 13C/15N label our proteins using our pET1120/BL21(DE3) expression system: Preparing M9 min

T7-RNA聚合酶/启动子表达实验

基本方案 备选方案 备选方案2             实验材料 载体 试剂、

T7-RNA聚合酶/启动子表达实验

实验材料 载体试剂、试剂盒 氨苄青霉素卡那霉素pGP裂解缓冲液仪器、耗材 培养箱分光光度计离心机实验步骤 1.  将含有待表达基因的片段亚克隆于pT7-5、pT-6或pT7-7中,转化一种标准大肠杆菌菌株,此菌株不应带有可指导T7 RNA聚合酶合成的质粒。转化物涂布于氨苄青霉素平皿,于37℃温育培养

派克T7系列变速驱动叶片泵应用优势

派克T7系列变速驱动叶片泵应用优势液压传动在我们日常生活中的应用可谓非常广泛,凭借其功率密度高、控制准以及性能持久等优势,液压在工业领域也如鱼得水。  现代工业机械对液压的要求在不断提升,除了这些传统优势,液压系统还需要更高效、噪音更低且排放更小。在传统液压技术中,电机的运行速度无法调控,电机一直以

Expression-Protocol-in-M9-Minimal-Media-via-T7-Promoter

Expression Protocol in M9 Minimal Media via T7 PromoterThe following protocol has been used successfully to 15N or 13C/15N label our proteins using ou

T7-RNA聚合酶/启动子表达实验1

在适宜的条件下,T7 RNA聚合酶/启动子系统表达的基因产物可占细胞总蛋白的25%以上,但多数情况下产量比这个比例要低得多。实验材料载体试剂、试剂盒氨苄青霉素卡那霉素pGP裂解缓冲液仪器、耗材培养箱分光光度计离心机实验步骤1.  将含有待表达基因的片段亚克隆于pT7-5、pT-6或pT7-7中,转化

T7-RNA聚合酶/启动子表达实验3

实验材料噬菌体试剂、试剂盒PEGIPTG仪器、耗材培养箱离心机实验步骤1.  制备从M13噬菌体mGP1-2原种,加PEG溶液沉淀浓缩噬菌体。重悬噬菌体于M9培养基,滴定其滴度。 2.  将由“基本方案”步骤1所得的含T7 启动子表达质粒转化M13许可性大肠杆菌细胞,转化物涂布于氨苄青霉素平皿上,3

T7-RNA聚合酶/启动子表达实验2

实验材料蛋白质试剂、试剂盒氨基酸混合物M9培养基甲硫氨酸甲醇仪器、耗材荧光显微镜离心机分光光度计实验步骤1.  将含有待表达基因的片段亚克隆于pT7-5、pT-6或pT7-7中,转化一种标准大肠杆菌菌株,此菌株不应带有可指导T7 RNA聚合酶合成的质粒。转化物涂布于氨苄青霉素平皿,于37℃温育培养过

pF1A-T7载体的基本信息和质粒图谱

pF1A T7载体载体基本信息载体名称pF1A T7载体抗性Ampicillin载体长度3455 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy numberpF1A T7载体质粒图谱

采用T7•-Tag-Affinity-Purification-Kit提取细菌蛋白的操作步骤

不同的蛋白质分离纯化的方法不同,但蛋白质分离纯化的操作步骤基本类似,那么如何进行细菌蛋白的提取呢?这里总结细菌蛋白的提取的实验试剂、操作步骤以及一些注意事项。实验试剂采用T7• Tag Affinity Purification KitT7•Tag抗体琼脂。B/W缓冲液:4.29mM Na2HPO4

pF1K-T7载体的基本信息和质粒图谱

pF1K T7载体载体基本信息载体名称pF1K T7载体抗性Kanamycin载体长度3450 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega筛选标记Neomycin/G418(Geneticin)拷贝数High copy numberpF1K T7载体质粒图谱

用-T7-噬菌体-DNA-聚合酶进行双脱氧测序反应

            试剂、试剂盒 去离子蒸馏水 二硫苏糖醇 dNTP 和 ddNTP 标记混合液和 ddNTP 延伸 终止混合液 甲酰胺上样缓冲液 测序酶稀释缓冲

pFN18A-HaloTag®-T7载体的基本信息和质粒图谱

pFN18A HaloTag® T7载体载体基本信息载体名称pFN18A HaloTag® T7载体抗性Ampicillin载体长度4377 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy numberpFN18A HaloTag® T7载体质粒

pF25A-ICE-T7载体的基本信息和质粒图谱

pF25A ICE T7载体载体基本信息载体名称pF25A ICE T7载体抗性Ampicillin载体长度3947 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy numberpF25A ICE T7载体质粒图谱

打破垄断,推陈出新!华大基因推出超强基因测序仪T7

  最近,华大发布其自主研发的最新超高通量基因测序仪——“MGISEQ-T7”。华大方面表示,基于华大多年来在核心技术上的自主研发与突破,目前的T7是全球日生产能力最强的基因测序仪,堪称“超级生命计算机”。据了解,基因测序仪是基因测序产业的上游核心,也是基因测序产业链上壁垒最高的部分。测序设备依赖进

pF25K-ICE-T7载体的基本信息和质粒图谱

pF25K ICE T7载体载体基本信息载体名称pF25K ICE T7载体抗性Kanamycin载体长度3942 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega筛选标记Neomycin/G418(Geneticin)拷贝数High copy numberpF25K I

pFN18K-HaloTag®-T7载体的基本信息和质粒图谱

pFN18K HaloTag® T7载体载体基本信息载体名称pFN18K HaloTag® T7载体抗性Kanamycin载体长度4372 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega筛选标记Neomycin/G418(Geneticin)拷贝数High copy n

用-T7-噬菌体-DNA-聚合酶进行双脱氧测序反应实验

本方案参照了 Tabor 和 Richardson(1987a,1989b,1990) 的方法,采用单链 DNA 模板进行 DNA 测序(有关单链 M13 噬菌体和质粒 DNA 制备,请参见第 3 章的方案 4、8 和第 12 章的方案 1)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕

用-T7-噬菌体-DNA-聚合酶进行双脱氧测序反应实验

试剂、试剂盒 去离子蒸馏水二硫苏糖醇dNTP 和 ddNTP标记混合液和 ddNTP 延伸 终止混合液甲酰胺上样缓冲液测序酶稀释缓冲液测序酶反应缓冲液含MgCl2测序酶酵母无机焦磷酸酶寡核苷酸引物模板 DNA放射性化合物仪器、耗材 离心机和转头微量离心管或微量滴定板实验步骤 材料缓充液和溶液去离子蒸

M13、T7和T4噬菌体系列的区别

M13丝状噬菌体一直是最流行的选择,广泛用于各种类型的研究。病毒外壳由五个不同的衣壳蛋白组成,包括一个主要衣壳pVIII(2,700拷贝)和四个次要衣壳(一端是pIII和pVI,另一端是pVII和pIX)。与T4和T7不同的是,M13是溶原性噬菌体,它在周质中组装,在不裂解宿主的情况下从细菌膜中分泌

T5-/-T7-/-T9-新超越系列电位滴定仪

T5            – 简便和通用型T7 – 灵活和扩展型T9            – 智能和强大型带StatusLight(状态指示灯)的触摸屏终端具有高亮度和高分辨率的触摸屏终端,通过电缆与主机相连,可以随意地放在任何位置。直观的StatusLight(状态指示灯)功能以及

pFC20A-HaloTag®-T7-SP6载体的基本信息和质粒图谱

pFC20A HaloTag® T7 SP6载体载体基本信息载体名称pFC20A HaloTag® T7 SP6载体抗性Ampicillin载体长度4422 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy numberpFC20A HaloTag

pFC30A-His6HaloTag®-T7载体的基本信息和质粒图谱

pFC30A His6HaloTag® T7载体载体基本信息载体名称pFC30A His6HaloTag® T7载体抗性Ampicillin载体长度4312 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy numberpFC30A His6Hal

pFN19A-HaloTag®-T7-SP6载体的基本信息和质粒图谱

pFN19A HaloTag® T7 SP6载体载体基本信息载体名称pFN19A HaloTag® T7 SP6载体抗性Ampicillin载体长度4428 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy numberpFN19A HaloTag

pFN29A-His6HaloTag®-T7载体的基本信息和质粒图谱

pFN29A His6HaloTag® T7载体载体基本信息载体名称pFN29A His6HaloTag® T7载体抗性Ampicillin载体长度4398 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy numberpFN29A His6Hal

pH6HTC-His6HaloTag®-T7载体的基本信息和质粒图谱

pH6HTC His6HaloTag® T7载体载体基本信息载体名称pH6HTC His6HaloTag® T7载体抗性Ampicillin载体长度3984 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy numberpH6HTC His6Hal