丹磺酰化法分析蛋白质N末端氨基酸实验
实验方法原理蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰胺薄膜层析分析DNS-氨基酸, 可确定蛋白质的N-末端氨基酸。此法灵敏度高, 也可用于蛋白质的氨基酸组成的测定。聚酰胺对极性物质的吸附作用是: 它能和被吸附物质间形成氢键, 这种氢键的强弱决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。层析时展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离物在聚酰胺表面发生吸附、解吸附、再吸附和再解吸附的连续过程, 就能导致分离物达到分离的目的。实验材料蛋白质试剂、试剂盒氨基酸丙酮丹磺酰氯盐酸碳酸氢钠甲酸水苯冰醋酸乙酸乙酯甲醇冰乙酸磷酸三钠乙醇三乙胺仪器、耗材真空干燥器水解管烘箱紫外分析灯玻璃试管聚酰胺薄膜实验步骤1. 标准氨基酸的丹磺酰化 分别称取2 . 3μmol 层析纯的氨基酸, 溶于0 . 5 ml 0 . 2......阅读全文
外肽酶的分类和性质
酶学委员会 (E. C.)列出了72种不同的外肽酶(http://www.expasy.ch/enzymes)。外肽酶只是在靠近多链的一侧末端起作用，在游离N端起作用的酶释放出单个的氨基酸残基、二肽或三肽（即分别为氨肽酶、二肽基肽酶和三肽基肽酶）；在游离C末端起作用的酶释放出单个的氨基酸残基（羧肽酶
外肽酶的分类介绍
酶学委员会 (E. C.)列出了72种不同的外肽酶(http://www.expasy.ch/enzymes)。外肽酶只是在靠近多链的一侧末端起作用，在游离N端起作用的酶释放出单个的氨基酸残基、二肽或三肽（即分别为氨肽酶、二肽基肽酶和三肽基肽酶）；在游离C末端起作用的酶释放出单个的氨基酸残基（羧
外肽酶的分类
外肽酶的分类酶学委员会 (E. C.)列出了72种不同的外肽酶(http://www.expasy.ch/enzymes)。外肽酶只是在靠近多链的一侧末端起作用，在游离N端起作用的酶释放出单个的氨基酸残基、二肽或三肽（即分别为氨肽酶、二肽基肽酶和三肽基肽酶）；在游离C末端起作用的酶释放出单个的氨基酸
蛋白质浓度分析实验
BRADFORD分析（BIORAD)BCA分析(PIERCE)三氯乙醇沉淀实验材料标准蛋白质 试剂、试剂盒BSA
蛋白质浓度分析实验
BRADFORD分析（BIORAD) BCA分析(PIERCE) 三氯乙醇沉淀 实验材料 标准蛋白质
组成蛋白质的氨基酸均为α氨基酸
氨基酸（amino acid）：含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称。生物功能大分子蛋白质的基本组成单位，是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物。氨基连在α-碳上的为α-氨基酸。组成蛋白质的氨基酸均为α-氨基酸。 基酸中包含的羧基（COOH），氨基（NH
氨基酸的化学性质介绍
氨基的反应：酰化反应；与亚硝酸反应；与醛反应；磺酰化反应；与DNFB反应；成盐反应。 羧基的反应氨基酸的羧基和其他羧酸一样，在一定条件下可以发生酰化、酯化、脱羧和成盐反应。 与水合茚三酮反应：α-氨基酸与水合茚三酮在弱酸性溶液中共热，经氧化脱氨生成相应的α-酮酸，进一步脱羧形成醛，水合茚三酮
氨基酸的化学性质
氨基的反应： 酰化反应； 与亚硝酸反应； 与醛反应； 磺酰化反应； 与DNFB反应； 成盐反应。 羧基的反应氨基酸的羧基和其他羧酸一样，在一定条件下可以发生酰化、酯化、脱羧和成盐反应。 与水合茚三酮反应：α-氨基酸与水合茚三酮在弱酸性溶液中共热，经氧化脱氨生成相应的α-酮酸，进
氨基酸的化学性质
氨基的反应：酰化反应；与亚硝酸反应；与醛反应；磺酰化反应；与DNFB反应；成盐反应。羧基的反应氨基酸的羧基和其他羧酸一样，在一定条件下可以发生酰化、酯化、脱羧和成盐反应。与水合茚三酮反应：α-氨基酸与水合茚三酮在弱酸性溶液中共热，经氧化脱氨生成相应的α-酮酸，进一步脱羧形成醛，水合茚三酮被还原成还原
氨基酸的化学性质
氨基的反应：酰化反应；与亚硝酸反应；与醛反应；磺酰化反应；与DNFB反应；成盐反应。羧基的反应氨基酸的羧基和其他羧酸一样，在一定条件下可以发生酰化、酯化、脱羧和成盐反应。与水合茚三酮反应：α-氨基酸与水合茚三酮在弱酸性溶液中共热，经氧化脱氨生成相应的α-酮酸，进一步脱羧形成醛，水合茚三酮被还原成还原
生化与细胞所揭示tRNA－3’CCA末端在EcLeuRS分子内摆动
4月12日，国际学术期刊Nucleic Acids Research在线发表了中科院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所王恩多研究组题为The Yin and Yang of tRNA: proper binding of acceptor end determines the ca
cDNA末端快速扩增法的方法介绍
中文名称cDNA末端快速扩增法英文名称rapid amplification of cDNA end;RACE定 义从低丰度转录物中快速扩增cDNA片段，以获得具5'和3'端的全长cDNA的一种方法。应用学科遗传学（一级学科），分子遗传学（二级学科）
DNA测序——双脱氧链末端终止法
实验方法原理DNA聚合酶催化的DNA链延伸是在3'-OH末端上进行的。由于2’，3’-双脱氧三磷酸核苷酸(ddNTP)的3'-位脱氧而失去游离-OH，当它参入到DNA链后，3'-OH末端消失，使DNA链的延伸终止。 本实验根据此原理，将待测DNA片段插入单链噬菌体M13载体，
关于组蛋白修饰—基因调控的基本介绍
基因表达是一个受多因素调控的复杂过程.组蛋白是染色体基本结构-核小体中的重要组成部分，其N-末端氨基酸残基可发生乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化、多聚ADP糖基化等多种共价修饰作用.组蛋白的修饰可通过影响组蛋白与DNA双链的亲和性，从而改变染色质的疏松或凝集状态，或通过影响其它转录因子与结构基因启
丝氨酸羧肽酶的功能特点
丝氨酸羧肽酶(Seinecarboxypeptidases,SCP)又称酸性羧肽酶，是一类真核生物蛋白水解酶，亚基相对分子质量40000-75000，广泛存在于真菌、高等植物和动物组织。在酸性环境下，丝氨酸羧肽酶具有末端蛋白水解酶、酯酶和脱酰胺酶的话性，可同时参与多肽和蛋白质的加工、修饰与降解。由于
关于丝氨酸羧肽酶的基本介绍
丝氨酸羧肽酶(Seinecarboxypeptidases,SCP)又称酸性羧肽酶，是一类真核生物蛋白水解酶，亚基相对分子质量40000-75000，广泛存在于真菌、高等植物和动物组织。在酸性环境下，丝氨酸羧肽酶具有末端蛋白水解酶、酯酶和脱酰胺酶的话性，可同时参与多肽和蛋白质的加工、修饰与降解。
全国生物医药色谱会分会报告集锦(二)
2012年4月22日，全国生物医药色谱及相关技术学术交流会各分会在美丽的重庆大学虎溪校区继续进行。“理论与方法”分会场，侧重对色谱新理论及新方法的探讨。涉及当前生物医药领域的前沿、热门话题，有较高的学术性和前沿性。以下是个报告的精彩内容。中国科学院大连化学物理研究所 许国旺主任 首先来自中
Nature：科学家开发新化合物，革命肺癌治疗现状
根据一项发表于 Nature Chemical Biology 杂志的最新研究，美国肯塔基大学的科学家们发现了一种能够有效治疗肺癌和其他相关致命疾病的最新疗法。 根据美国国家癌症研究所的数据，癌症目前已经成为全球人类死亡的最主要原因之一。 在美国，肺癌则占癌症死亡的百分之二十五。同时，每两名确
蛋白质结构分析小帮手岛津蛋白测序仪PPSQ51A/53A梯度系列
在生物体内包含有各种功能的蛋白质，这些蛋白质经过处理后成为成熟蛋白质并被释放到细胞外，它们在相互作用下可能会导致疾病。为了了解这些疾病的病因、并在疾病的预防、诊断、治疗及药物开发研究等方面取得进展，鉴定微量样品氨基酸序列的蛋白质鉴定分析工作就变得越来越重要。蛋白质N-端的序列组成对于蛋白质整体的生物
多肽合成与修饰技术
实验技术：多肽 合成是一个固相合成顺序一般从C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来，经过不断的改进 和完善，到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术，表现出了经典液相合成
实验室分析方法气相色谱酰化衍生化方法
酰化能降低羟基、氨基、巯基的极性,改善这些化合物的色谱性能,并提高这些化合物的挥发性,增加某些易氧化化合物的稳定性。当酰化时引入含有卤离子的酰基时,还可以提高使用ECD检测器的灵敏度。常用的酰化试剂有酰卤、酸酐和反应活性的酰化物。(1)乙酰化法:标准乙酰化法是将样品溶于氯仿中,与乙酸酐和乙酸在50℃
高效液相色谱中常用的柱前衍生化方法
液相色谱使用最多的是紫外检测器，为了使一些没有紫外吸收或紫外吸收很弱的化合物能被紫外检测器检测，往往通过衍生化反应在这些化合物的分子中引入有强紫外吸收的基团：2,4-二硝基苯、苯甲基、对硝基苯甲基、3,5-二硝基苯甲基、苯甲酸酯、对甲苯酰、对氯苯甲酸制、对硝基苯甲酸酯、对甲氧基苯甲酸酯、苯甲酰甲
高效液相色谱中常用的柱前衍生化方法
紫外衍生化反应 液相色谱使用最多的是紫外检测器，为了使一些没有紫外吸收或紫外吸收很弱的化合物能被紫外检测器检测，往往通过衍生化反应在这些化合物的分子中引入有强紫外吸收的基团：2,4-二硝基苯、苯甲基、对硝基苯甲基、3,5-二硝基苯甲基、苯甲酸酯、对甲苯酰、对氯苯甲酸制、对硝基苯甲酸酯、对甲氧基苯甲酸
蛋白质的分离实验——凝胶层析法
蛋白质分离纯化是用生物工程下游技术从混合物之当中分离纯化出所需要得目的蛋白质的方法。应用于（1） 化学物质的分离、提纯、浓缩;（2）染料、染料中间体的浓缩及脱盐（3）超细粉体生产过程中的产品回收;（4）生产废水中有用物质的提纯、回用;（5）海洋生物提取物的浓缩、提纯（6）氨基酸、蛋白质的浓缩、提纯。
疏水作用层析法纯化蛋白质实验
实验方法原理 在疏水层析的主要支持介质上含有大小不等的疏水侧链，烷基或芳香基，可是绝大多数情况起作用的是苯基或辛基。当碳氢链长度增加，即变得更疏水时，疏水强的少量蛋白质被吸附。这时疏水相互作用太强，需用极端方法洗脱，可能会导致蛋白质变性。苯基琼脂糖比辛基琼脂糖疏水性低，是疏水纯化中效果不错的常用介质
蛋白质染色实验——快速银染法
实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲醛固定液硫代硫酸钠干胶液甲醇仪器、耗材摇床透析膜实验步骤1. 将凝胶置于塑料容器中，加入50 ml 甲醛固定液，在旋转摇床中缓慢摇动10 min。 2. 倾去固定液，用水冼两次，每次5 min，缓慢摇动。 3. 倾去水，凝胶浸泡在0.2 g/l 硫代硫酸钠溶液中1 m
疏水作用层析法纯化蛋白质实验
疏水作用层析法 实验方法原理 在疏水层析的主要支持介质上含有大小不等的疏水侧链，烷基或芳香基，可是绝大多数情况起作用的是苯基或辛基。当碳氢链长度增加，即变得更
蛋白质印迹法实验的要点
蛋白质印迹法是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。在实验过程中有很多要点需要实验人员注意，小析姐整理了一些，希望对你的实验能有所帮助。 蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot，其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的
蛋白质印迹法实验的要点
1、样品质量。 所抽取样品的蛋白含量，蛋白变性是否充分等等，还有，蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外，蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对最终结果的可靠性有影响。 2、凝胶质量。 不连续SDS-PAGE胶对凝胶的要求较高，分离胶的PH值应在8.8
疏水作用层析法纯化蛋白质实验
疏水相互作用层析是以介质疏水基团和蛋白质疏水区域间的亲和作用为基础的。疏水力是浸在一种极性液体（如水）中的非极性物质的排斥力。胞膜蛋白都具有一个明显的疏水区域以锚定在膜上。可溶性蛋白质在外表面上可能存在疏水小区，它促进蛋白复合物的形成，也可能是疏水配基结合部位或活性部位。这些暴露的疏水区对疏水层析纯