核酸的定量测定实验——地衣酚显色法

实验方法原理RNA 与浓盐酸共热时发生降解, 产生的核糖又可转变为糖醛, 在FaCl3 或CuCl2催化下, 糖醛与3 , 5-二羟基甲苯( 地衣酚、苔黑酚)反应形成绿色复合物, 该产物在670 nm 处有最大吸收。当RNA 浓度为20~250 μg/ ml 时光密度与RNA 浓度成正比。实验材料蛋白质试剂、试剂盒RNANaOH蒸馏水地衣酚浓盐酸FaCl3·6H2O仪器、耗材722 分光光度计水浴吸量管实验步骤1. RNA 标准曲线的制作: 取试管6 支, 按下表所示添加试剂。 加毕混匀, 于沸水浴中加热20 min , 取出置自来水中冷却,以零号管为对照, 于670 nm 处测光密度值。以光密度为纵坐标,RNA 浓度为横坐标作图, 绘制标准曲线。2. 样品测定: 取试管3 支, 两支为样品管, 一支为空白管,在样品管中加入1 . 0 ml 样品液, 空白管操作......阅读全文

蛋白质的定量测定实验

试剂、试剂盒 Bradford 试剂牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液Tris-缓冲盐溶液仪器、耗材 微量滴定板分光光度计或酶联仪实验步骤 材料与设备牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 (2 mg/ml 水溶液)Bradford 试剂(CoomassiePlus,PierceChemicalCo.)

蛋白质的定量测定实验

试剂、试剂盒Bradford 试剂牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液Tris-缓冲盐溶液仪器、耗材微量滴定板分光光度计或酶联仪实验步骤材料与设备牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 (2 mg/ml 水溶液)Bradford 试剂(CoomassiePlus,PierceChemicalCo.)分光光

蛋白质的定量测定实验

            试剂、试剂盒 Bradford 试剂 牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 Tris-缓冲盐溶液 仪器、耗材

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定1

原理细胞内大部分RNA 均与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。因此分离RNA时必须使RNA与蛋白质解离,并除去蛋白质。除去蛋白质的方法主要有:(1)用氯仿-辛醇混合液剧烈振荡,使蛋白质变性。(2)在冷的2mol/L盐酸胍溶液中沉淀RNA,大部分蛋白质仍处于溶解状态。(3)以去污剂如十二烷基硫

蛋白质的定量测定实验(Lowry法、考马氏亮蓝G-250染色法..

2、血清蛋白质测定稀释血清(或其它蛋白样品溶液),准确吸取0.1ml血清,置入50ml容量瓶中,用生理盐水稀释至刻度(此为稀释500倍,其它蛋白样品酌情而定)。再取三只试管,分别标以1、2、3号,按下表操作。混匀后室温放置15分钟,在595nm波长比色,计算蛋白质浓度。

核酸的纯化,浓缩和定量

一、核酸的纯化  在分子克隆的所有操作中,最基本的操作是核酸的纯化。其关键步骤是去蛋白质,通常只要用酚/氯仿。氯仿抽提核酸的溶液即可。每当需要把克隆有某一些所用的酶灭活或去除以便进行下一步时,可进行这种抽提。然而,如要从细胞裂解液等复杂的分子混合物中纯化核酸,则要先用某些蛋白水解酶消化大部分蛋白质后

比色法蛋白质定量

比色法蛋白质定量    蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。    比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry 等几种方法。

核酸扩增荧光定量检测

如果怀疑有乙肝的情况,那么需要到医院进行专业的检查,比如做核酸扩增荧光定量检测之类的,当然核酸扩增荧光定量检测还可以测量其他方面的情况,比如测解脲脲原体,接下来我们来了解一下核酸扩增荧光定量检测的相关情况吧。核酸扩增荧光定量检测检查什么核酸方面的检查有核酸扩增荧光定量检测检查,那么核酸扩增荧光定量检

核酸定量内标与外标

众所周知,在实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)中模板的浓度对数值与结果Ct值呈线性关系,Ct值越小,浓度越高。根据所选取定量数学模型的差别,主要有外标定量法(外标法)和内标定量法(内标法)两种定量方法。这些数学模型就像特殊标记的尺子,把得到的Ct值测量为浓度值

核酸检测实验室如何评价荧光定量PCR仪!

  荧光定量PCR的检测是一系列从采样、保存运输、样品处理、核酸提取、扩增等一系列流程的组合,任何一个环节出现问题都会导致最终结果的错误。虽然在前面一系列的文章中讲述了提取试剂、扩增试剂的评价但是这些仍远远不够,因此我在后续的文章中会尽可能覆盖到所有的检测环节。  荧光定量PCR的检测离不开荧光定量

微量分光光度计原理及应用

微量分光光度计能够快速准确的定量检测核酸、蛋白质等溶液。具有使用方便、消耗样品少(仅2μl)、不用预热、能迅速清理残留样品、不需要比色皿或其它样品定位装置、样品不需要稀释等特点,常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量,目前已成为众多实验室的常规仪器。工作原理超微量分光光度计进行浓度测定的原理是根

微量分光光度计原理及应用介绍

 微量分光光度计能够快速准确的定量检测核酸、蛋白质等溶液。具有使用方便、消耗样品少(仅2μl)、不用预热、能迅速清理残留样品、不需要比色皿或其它样品定位装置、样品不需要稀释等特点,常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量,目前已成为众多实验室的常规仪器。  工作原理  超微量分光光度计进行浓度测定

水杨酸钠的半衰期测定实验_比色法

通过比色法测定水杨酸的半衰期,水杨酸根与铁离子起反应,形成一种紫色络合物,根据紫色络合物的颜色进行比色得光密度,将光密度代入公式计算得半衰期。本实验目的是掌握药物血浆半衰期(t1/2)的测定方法及计算血浆半衰期(t1/2)实验方法原理水杨酸根与铁离子起反应,形成一种紫色络合物,根据紫色络合物的颜色进

微量分光光度计的应用及原理

  微量分光光度计能够快速准确的定量检测核酸、蛋白质等溶液。具有使用方便、消耗样品少(仅2μl)、不用预热、能迅速清理残留样品、不需要比色皿或其它样品定位装置、样品不需要稀释等特点,常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量,目前已成为众多实验室的常规仪器。   工作原理   超微量分光光度计进

真菌丝门II、地衣门观察实验

一、目的要求 掌握真菌门担子菌亚门和地衣门代表植物的形态构造和繁殖方式。观察担子果、子囊果和地衣标本,了解其多样性。 二、实验材料和试剂黑伞属(Agaricus)子实体、菌伞切片;银耳属(Tremella)子实体及浸制材料,地衣切片;数种担子菌、子囊菌标本;地衣标本,1%KOH水溶液。

核糖核酸酶(胰腺)的测定实验

实验方法原理RNaseⅠ分解 RNA 形成 3'-磷酸单核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸,以 Cp 或 Up 结尾形成一个 2',3'-环状磷酸中间体。实验材料酶样品试剂、试剂盒乙酸缓冲液乙酸铀酰-高氯溶液RNA(酵母)溶液核酸核酸酶仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「

核糖核酸酶(胰腺)的测定实验

基本方案             实验方法原理 RNaseⅠ分解 RNA 形成 3'-磷酸单核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸,以 Cp 或 Up 结尾形成一个 2'

兔肝RNA的制备及测定

实验原理: 细胞内大部份RNA均与蛋白质结合在一起,并且多以核蛋白的形式存在。因此,分离制备RNA  时,首先遇到的是必须使RNA与蛋白解离,并除去蛋白质。由于RNA的种类来源和存在形式不同,所用的制备方法各异,一般常用的方法有,盐酸胍法,去污剂法和苯酚法。其中,以苯酚法使用较为广泛。产品纯度高,适

红墨水染色法测定种子活性实验

实验方法原理 生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力,而死的细胞原生质膜丧失这种能力,于是红墨水染料可进入死细胞而使其染色。活细胞不能吸收红墨水所以不染色。这一原理仅适用于胚细胞,而胚乳细胞全部被红墨水染成红色,那么是否就判断胚乳细胞就是死细胞?所以染色机理不但与质膜透性有关,而且还与细胞(胚细

红墨水染色法测定种子活性实验

实验方法原理:生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力,而死的细胞原生质膜丧失这种能力,于是红墨水染料可进入死细胞而使其染色。活细胞不能吸收红墨水所以不染色。这一原理仅适用于胚细胞,而胚乳细胞全部被红墨水染成红色,那么是否就判断胚乳细胞就是死细胞?所以染色机理不但与质膜透性有关,而且还与细胞(胚细

红墨水染色法测定种子活性实验

实验方法原理生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力,而死的细胞原生质膜丧失这种能力,于是红墨水染料可进入死细胞而使其染色。活细胞不能吸收红墨水所以不染色。这一原理仅适用于胚细胞,而胚乳细胞全部被红墨水染成红色,那么是否就判断胚乳细胞就是死细胞?所以染色机理不但与质膜透性有关,而且还与细胞(胚细胞

比色法蛋白质定量介绍

蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。比色方法一般有 BCA,Bradford,Lowry 等几种方法。Lowry 法:以最早期的 B

兔肝RNA的制备及测定实验原理和操作步骤

实验原理细胞内大部份RNA均与蛋白质结合在一起,并且多以核蛋白的形式存在。因此,分离制备RNA 时,首先遇到的是必须使RNA与蛋白解离,并除去蛋白质。由于RNA的种类来源和存在形式不同,所用的制备方法各异,一般常用的方法有,盐酸胍法,去污剂法和苯酚法。其中,以苯酚法使用较为广泛。产品纯度高,适合

如何在实验室测定水中的酚含量

酚类化合物:高效液相色谱法五氯酚:气相色谱法二氯酚和五氯酚:气相色谱-质谱法挥发酚有两种方法:1)4-氨基安替比林分光光度法(其中,含量较低的情况下建议用4-氨基安替比林萃取光度法;含量较高的情况下建议用4-氨基安替比林直接光度法)2)溴化滴定法含量很高的情况下,建议用滴定法,这样更准确。以上具体操

如何在实验室测定水中的酚含量

酚类化合物:高效液相色谱法五氯酚:气相色谱法二氯酚和五氯酚:气相色谱-质谱法挥发酚有两种方法:1)4-氨基安替比林分光光度法(其中,含量较低的情况下建议用4-氨基安替比林萃取光度法;含量较高的情况下建议用4-氨基安替比林直接光度法)2)溴化滴定法含量很高的情况下,建议用滴定法,这样更准确。以上具体操

蛋白质含量的测定实验——OLIN酚法

实验方法原理FOLIN 酚法所用的试剂有两部分组成。试剂甲可与蛋白质中的肽键起显色反应, 试剂乙在碱性条件下极不稳定, 易被酚类化合物还原成蓝色(蛋白质中的酚基将磷钼酸-磷钨酸还原成蓝色复合物)。在一定条件下, 蓝色强度与蛋白质的量成正比, 范围约在25~250 μg/ ml 蛋白质浓度。实验材料蛋

酵母核糖核酸的提取、水解及组成成分的鉴定

目的和要求 了解核糖核酸(RNA)的提取方法及其组成成分的定性测定。 原理 核酸在机体生命活动中具有重要意义,核酸可分为核糖核酸和脱氧核糖核酸两类。酵母中富含的核糖核酸在碱处理下成为可溶性的钠盐与蛋白质等其它成分分开,然后用乙醇提取。加酸水解核酸,可鉴定其组成成分。 用硫酸水解RNA时,可以生成磷酸

核酸定量分析方法

核酸定量分析 DNA 或 RNA(以260nm处的吸光值为基础) 1. 制备用蒸馏水稀释过的DNA 或 RNA 样品溶液 ( 典型稀释比为 1:100 或 5:500μl) 2. 使用紫外光源,在260 nm 处测定吸光值,也可以在280 nm 和230 nm 测定吸光值 (260/280 的光吸收

二苯胺DNA比色法定量测定试剂盒使用说明

主要用途二苯胺DNA比色法定量测定试剂是一种旨在通过二苯胺与DNA的特异性结合反应,借助可见光波长的吸光峰值的变化,比色测定样品中DNA的绝对含量或浓度的技术方法。其适用于各种原核生物和真核生物的细胞或组织DNA以及环境中DNA含量分析。产品即到即用,性能稳定,简易方便,无需样品纯化,定量准确。技术

二苯胺DNA比色法定量测定试剂盒使用说明

  二苯胺DNA比色法定量测定试剂盒产品说明书   主要用途   二苯胺DNA比色法定量测定试剂是一种旨在通过二苯胺与DNA的特异性结合反应,借助可见光波长的吸光峰值的变化,比色测定样品中DNA的绝对含量或浓度的技术方法。其适用于各种原核生物和真核生物的细胞或组织DNA以及环境中DNA含量分析。