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蛋白质的定量测定实验

试剂、试剂盒Bradford 试剂牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液Tris-缓冲盐溶液仪器、耗材微量滴定板分光光度计或酶联仪实验步骤材料与设备牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 (2 mg/ml 水溶液)Bradford 试剂(CoomassiePlus,PierceChemicalCo.)分光光度计 (可在 595nm 处测量的) 或酶联仪 (带 595-nm 滤光片的)微量滴定板(ImmulonTM2,Dynatech Laboratories,Inc.)试剂Tris-缓冲盐溶液(TBS)(配方,见"试剂的配制" PP.184~189)操作程序1) 用 TBS 配制成一系列稀释度的 BSA 标准溶液,BSA 含量分別为:2000、1000、500、250、125、62.5 和 31.25ug/ml。每个待测的未知样品亦用 TBS 配制成一组倍比稀释的样品液。2) 各取 5ul BSA 稀释液和未知样品稀......阅读全文

知识分享:蛋白质含量的测定方法

  实验原理:   蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法、双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法,即考马斯亮蓝法(Bradford法)。其中Bra

蛋白质测定方法

蛋白质测定方法在生化研究中经常涉及到,它是很多实验的基础。因此,了解蛋白质测定方法相当重要。目前,常用的蛋白质测定方法有 以下五种方法:凯氏定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)、紫外吸收法和考马斯亮蓝法(Bradford法)。在这 五种测定法中,考马斯亮蓝法(Br

血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定-4

V 蛋白质含量测定一、双缩脲法测定蛋白质浓度(一)目的了解并掌握双缩脉法测定蛋白质浓度的原理和方法。(二)原理具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应,在碱性溶液中蛋白质与硫酸铜形成紫色络合物,在 540nm 处有最大吸收。在一定浓度的范围内,蛋白质浓度与双缩脲反应所呈的颜色深浅成正比,可用比色

IDMS法测定血清中的生长激素

图1.  生长激素的IDMS测定法示意图:将“指纹碎片”T6以胰蛋白酶进行蛋白质水解,并对分析溶质予以富集后,借助于RP-LC-MS/MS进行定量测定。 在医学上,为了进行早期诊断以及对疾病进行医疗控制,经常需要对血清中的所谓标记蛋白质进行量化。这些蛋白质分子尺寸微小,结构

蛋白质组最新研究进展

  蛋白质组(Proteome)的概念最先由Marc Wilkins提出,指由一个基因组,或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。 蛋白质组的概念与基因组的概念有许多差别,它随着组织、甚至环境状态的不同而改变。 在转录时,一个基因可以多种mRNA形式剪接,一个蛋白质组不是一个基因组的直接产物,蛋白质组中蛋

蛋白质含量的测定方法(一)

实验原理:蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法、双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法,即考马斯亮蓝法(Bradford法)。其中Bradford法

蛋白质标准曲线的制作(马斯亮蓝法)

一、实验目的和内容目的: 学习考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度的原理和方法内容:制作测定蛋白质浓度的标准曲线。制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量。考马斯亮蓝法测定蛋

定量蛋白质组学方法分类介绍

  【蛋白研究系列专题】-4丨定量蛋白质组学方法,您值得拥有   1 背景和意义    从生命活动的直接执行者——蛋白质的角度研究生命现象和规律(特别是疾病防治和病理研究)已成为研究生命科学的主要手段。而这些研究往往离不开对细胞、组织或器官中含有蛋白质种类和表达量的研究。对处不同时期、不同条件下

蛋白质结构预测(protein structure prediction)

一种生物体的基因组规定了所有构成该生物体的蛋白质,基因规定了组成蛋白质的氨基酸序列。虽然蛋白质由氨基酸的线性序列组成,但是,它们只有折叠成特定的空间构象才能具有相应的活性和相应的生物学功能。了解蛋白质的空间结构不仅有利于认识蛋白质的功能,也有利于认识蛋白质是如何执行其功能的。确定蛋白质的结构对于生物

紫外分光光度计——蛋白质含量测定

一、实验目的  1.学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理。  2.掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术。  3.掌握TU-1901紫外可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。  二、实验原理  1.紫外-可见分光光度法,是以

CEInfinite: 全柱成像新技术 拓展蛋白质分析无限想象空间

出色的重复性和超高分辨率   CE-WCID(全柱成像毛细管等电聚焦电泳仪)具有超高的蛋白质pI点的分辨率(△pI<0.01),这个指标无人能比。 蛋白质pl点的测定举例:△pI<0.01,7分钟完成实验   蛋白质药物主要成分和降解产物的pl点测定和重复性的考

蛋白质组学概念的起源和发展

  蛋白质组学的诞生和发展,离不开多学科和技术的逐渐交叉融合。这些学科技术包括(但不限于)基因组学、生物化学、分析化学、自动化、基于电磁场的精密质谱仪、信号处理、数理统计和计算机科学。近年来,分子医学、大数据技术和人工智能的发展,进一步加速推动了蛋白质组学的成长,使之在精准医疗领域展示出越来越大的应

LC-MS技术临床应用培训班报告(二)

  分析测试百科网讯2016年4月20日,液相色谱-质谱(LC-MS)技术临床应用培训班在上海中山医院举办。纽约州罗彻斯特大学临床质谱实验室主任兼北美华人临床化学学会(NACCCA)主席张岩教授、金域临床质谱检测中心赵蓓蓓、中国科学院生物物

2014质谱沙龙年末巨献 再掀质谱临床应用热潮

  2014年12月28日,“北京市继续教育-质谱沙龙2014报告会”在首都医科大学附属北京朝阳医院举行。本次质谱沙龙活动由首都医科大学附属北京朝阳医院、AB SCIEX公司主办,北京艾米诺医学研究有限公司、分析测试百科网、默沙东

AB Sciex视频讲座“AB Sciex 电喷雾质谱在蛋白质组学中的应用”

  4月12日,AB Sciex 公司在分析测试百科网成功举办了题为“AB Sciex 电喷雾质谱在蛋白质组学中的应用”的网络视频讲座。AB Sciex 亚太应用支持中心的靳文海博士首先为大家简单介绍了蛋白质组学和质谱技术发展方向,接下来重

蛋白质紫外分光测定实验

蛋白质紫外分光测定实验             实验方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键

常用生物染色剂:考马斯亮蓝

考马斯亮蓝有G250和R250两种,在颜色索引(Colour Index)中给出了不同的编号(42655和42660)。亮蓝G和亮蓝R在冷水中分别为微溶和不溶,在热水和乙醇中分别为可溶和微溶。两种染料均能对固定的蛋白进行有效地染色,使用浓度为溶于甲醇:冰醋酸:水(50:10:40)的0.05%溶

定量蛋白质组学方法分类

1 背景和意义从生命活动的直接执行者——蛋白质的角度研究生命现象和规律(特别是疾病防治和病理研究)已成为研究生命科学的主要手段。而这些研究往往离不开对细胞、组织或器官中含有蛋白质种类和表达量的研究。对处不同时期、不同条件下蛋白质表达水平变化的研究,识别功能模块和路径,监控疾病的生物标志物,这些研究都

第十四届全国离子色谱学术大会报告(一)

  2012年9月17日~18日,第十四届全国离子色谱学术报告会在历史悠久的古城西安隆重召开,大会期间共有来自全国40多位离子色谱专家做大会报告,内容涉及离子色谱理论研究、检测方法建立、样品处理方法研究、联用技术、仪器功能开发等。分析测试百科网作为本届大会的应邀媒体,将对大会报告

Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

一、 实验目的1、 了解测定蛋白质的常用方法2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。二、 实验原理在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色复合物。在一定的条件下,蓝色深浅与蛋白质的量成正比。在波长540nm处测

Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

一、 实验目的1、 了解测定蛋白质的常用方法2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。二、 实验原理在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色复合物。在一定的条件下,蓝色深浅与蛋白质的量成正比。在波长540nm处测

Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

一、 实验目的1、 了解测定蛋白质的常用方法2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。二、 实验原理在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色复合物。在一定的条件下,蓝色深浅与蛋白质的量成正比。在波长540nm处测

蛋白质的定量测定——紫外(UV)吸收测定法

实验原理蛋白质分子中所含酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质在280nm波长处有最大吸收值。在一定浓度范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量成正比关系,可用作定量测定。紫外线吸收法测定蛋白质含量的优点是迅速,简便,不消耗样品,低浓度盐类不干扰测定。因此,广泛应用在柱层析分离中蛋白

2016年寒假生物医学大型仪器理论与实验技术培训班二轮通知

2016年寒假生物医学大型仪器理论与实验技术培训班二轮通知(2016年1月20~28日)   中国医学科学院基础医学研究所∕北京协和医学院基础学院在医学领域具有国内一流的影响力和知名度,以尖端的医学研究及出色的理论和实验教学成为著名的医 学科学研究与教育基地。为了培

蛋白质含量测定实验——folin—酚试剂法

蛋白质含量测定实验可以用于:(1)测定蛋白质浓度;(2)检测所提取的蛋白质含量。实验方法原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即f

国内外蛋白质组学大腕云集 聚焦生物质谱前沿技术

  2014年7月3日,全国生物质谱学术报告会--生物质谱前沿技术邀请报告会在上海复旦大学隆重召开。此次活动旨在积极促进我国生物质谱技术的发展和应用,加强国内外相关研究领域的专家学者之间的交流与合作,特邀瑞士苏黎世联邦技术学院分子系统生物学

蛋白质纯度测定实验

蛋白质纯度测定实验             实验步骤 在评价样品

2016暑假生物医学大型仪器理论与实验技术培训班通知

  点击此处下载完整盖章版培训班二轮通知   中国医学科学院基础医学研究所∕北京协和医学院基础学院在医学领域具有国内一流的影响力和知名度,以尖端的医学研究及出色的理论和实验教学成为著名的医 学科学研究与教育基地。为了培养生物医学领域创新

蛋白质含量的测定——考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)...

实验原理考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰G-250染料

2017年暑假生物医学大型仪器理论与实验技术培训班

(二轮通知 2017年7月10~19日,北京)  中国医学科学院基础医学研究所∕北京协和医学院基础学院在医学领域具有国内一流的影响力和知名度,以尖端的医学研究及出色的理论和实验教学成为著名的医学科学研究与教育基地。为了培养生物医学领域创新人才,现推出一年一度的,以尖端仪器和实战训练为特色的“大型仪器