核酸的定量测定实验——地衣酚显色法
实验方法原理RNA 与浓盐酸共热时发生降解, 产生的核糖又可转变为糖醛, 在FaCl3 或CuCl2催化下, 糖醛与3 , 5-二羟基甲苯( 地衣酚、苔黑酚)反应形成绿色复合物, 该产物在670 nm 处有最大吸收。当RNA 浓度为20～250 μg/ ml 时光密度与RNA 浓度成正比。实验材料蛋白质试剂、试剂盒RNANaOH蒸馏水地衣酚浓盐酸FaCl3·6H2O仪器、耗材722 分光光度计水浴吸量管实验步骤1. RNA 标准曲线的制作: 取试管6 支, 按下表所示添加试剂。 加毕混匀, 于沸水浴中加热20 min , 取出置自来水中冷却,以零号管为对照, 于670 nm 处测光密度值。以光密度为纵坐标,RNA 浓度为横坐标作图, 绘制标准曲线。2. 样品测定: 取试管3 支, 两支为样品管, 一支为空白管,在样品管中加入1 . 0 ml 样品液, 空白管操作......阅读全文
核酸的定量测定实验——地衣酚显色法
实验方法原理RNA 与浓盐酸共热时发生降解, 产生的核糖又可转变为糖醛, 在FaCl3 或CuCl2催化下, 糖醛与3 , 5-二羟基甲苯( 地衣酚、苔黑酚)反应形成绿色复合物, 该产物在670 nm 处有最大吸收。当RNA 浓度为20～250 μg/ ml 时光密度与RNA 浓度成正比。实验材料蛋
地衣酚显色法测定RNA含量
原理 核糖核酸与浓盐酸共热时，即发生降解，形成的核糖继而转变为糠醛，后者与3，5-二羟基甲苯（地衣酚）反应呈鲜绿色，该反应需用三氯化铁或氯化铜作催化剂，反应产物在670nm处有最大吸收。RNA在20～250μ g范围内，光吸收与RNA的浓度成正比。地衣酚反应特异性较差，凡戊糖均有此反应，DNA和其他
地衣酚显色法测定RNA含量实验原理和操作步骤
【实验原理】 RNA与浓盐酸共热时发生降解，产生的戊糖又可转变为糠醛，在FeCl3或CuCl2催化下，糠醛与地衣酚（3,5—二羟基甲苯）反应形成绿色复合物，该产物在670nm处有最大吸收。当RNA浓度为20μg／m1~250μg／m1时，吸光度与 RNA浓度成正比。 【实验材料】
酵母RNA的提取及含量测定（地衣酚显色法）
一、实验目的 （1）熟悉酵母RNA的提取方法（2）掌握地衣酚显色法测定酵母RNA含量的原理和方法二、实验原理 RNA与浓盐酸共热时，即发生降解，形成的核糖继而转变成糠醛，后者与3， 5-二羟甲苯反应呈鲜绿色，该反应需用三氯化铁和氯化铜作催化剂，反应产物在670nm处有最大吸收。RNA在20－25
核酸的定量测定实验
实验方法原理 核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外吸收高峰在260 nm 波长处。一般在260 nm 波长下, 每1 ml 含1 μg RNA 的溶液光吸收值为0.022 , 每1 ml 含1 μg DNA 的溶液光吸收值约为0.020 , 故测定
核酸的定量测定实验
紫外分光光度法 地衣酚显色法 二苯胺法 实验方法原理 核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外
核酸的定量测定实验——二苯胺法
实验方法原理DNA 分子中2-脱氧核糖残基在酸性溶液中加热降解, 产生2-脱氧核糖并形成ω-羟基-γ-酮基戊醛, 后者与二苯胺试剂反应生成蓝色化合物, 其反应为： 蓝色化合物在595 nm 处有最大吸收峰, 且DNA 在40～400 μg 范围内时, 光密度与DNA 浓度呈正比。在反应液中加入少量乙
动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和...
动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和紫外吸收法[附2]二苯胺显色法测定DNA含量原理脱氧核糖核酸中的2-脱氧核糖在酸性环境中与二苯胺试剂一起加热产生蓝色反应，在595nm处有最大光吸收。 DNA在40-400 g范围内，光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛，可以
核酸的定量测定实验——紫外分光光度法
实验方法原理核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外吸收高峰在260 nm 波长处。一般在260 nm 波长下, 每1 ml 含1 μg RNA 的溶液光吸收值为0.022 , 每1 ml 含1 μg DNA 的溶液光吸收值约为0.020 , 故测定未知浓度R
动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定2
试剂和器材试剂1.DNA标准溶液(须经定磷确定其纯度)：取小牛胸腺DNA钠盐以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成200 µg/mL的溶液。2.样品待测液：准确称取DNA干燥制品以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成100 µg/mL左右的溶液。在测定RNA制品中的DNA含量时，要求RNA制品的每mL待
核酸纯度、浓度与分子量测定实验——Ethidium－bromide染色法
实验方法原理利用一系列不同浓度的DNA标准溶液（0、2.5、5、10、20、30、40、50 ng/ml），或已知浓度的DNA marker，和未知浓度DNA样品一起进行琼脂糖凝胶电泳，以EB染色后，在凝胶图象分析仪上观察，比较标准浓度及未知浓度的亮度，来求取DNA 的含量；比较DNA样品与DNA
核酸的定量
核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长 260 nm。 每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的d
核酸的定量
核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDN
核酸的定量测定实验中所用到的公式和计算过程
定磷法是一经典的但至今仍被经常采用的方法，它具有灵敏、简便的特点。各种含磷有机物经硫酸或过氯酸水解，使有机磷消化成为无机磷。无机磷在酸性条件下，与钼酸盐（常用钼酸铵或钼酸钠）反应生成磷钼酸盐络合物。用还原剂处理，磷钼酸盐络合物被还原生成钼蓝，在660nm处有最大光吸收峰。在一定浓度范围内，颜色的深浅
蛋白质的定量测定——福林酚法(Folin—酚试剂法)
实验原理 Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法。以后在生物化学领域得到广泛的应用。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这个方法的优点是灵敏度高，比双缩脲法灵敏得多，缺点是费时较
福林酚法定量测定蛋白质
实验概要本实验用福林酚法(Folin—酚试剂法)测定了蛋白质的含量。实验原理Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法。以后在生物化学领域得到广泛的应用。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏
叶绿素的定量测定实验
实验方法原理 根据叶绿素对可见光的吸收光谱，利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度，而后用公式计算出叶绿素含量，此法精确度高，且能在未经分离的情况下分别测出叶绿素a、b的含量。根据朗伯－比尔定律，某有色溶液的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比，即：D＝kCL式中k为比例常数，当溶液浓度以重量百
叶绿素的定量测定实验
实验方法原理根据叶绿素对可见光的吸收光谱，利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度，而后用公式计算出叶绿素含量，此法精确度高，且能在未经分离的情况下分别测出叶绿素a、b的含量。根据朗伯－比尔定律，某有色溶液的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比，即：D＝kCL式中k为比例常数，当溶液浓度以重量百分
叶绿素的定量测定实验
实验方法原理根据叶绿素对可见光的吸收光谱，利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度，而后用公式计算出叶绿素含量，此法精确度高，且能在未经分离的情况下分别测出叶绿素a、b的含量。根据朗伯－比尔定律，某有色溶液的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比，即： D＝kCL 式中k为比例常数，当溶液浓度以重量
荧光定量PCR实验中的核酸提取对照
可以使用内参基因，假病毒混合基质，灭活病毒混合基质来监控提取到扩增的流程。
DNA核酸浓度的测定实验
DNA核酸浓度的定量实验可以用于（1）对纯化的PCR产物进行浓度测定；（2）对纯化的酶切产物进行浓度测定；（3）对提取的质粒进行浓度测定。实验方法原理寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA可以定量溶于缓冲液，构成核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键，使核苷核和核酸在紫外线光具有特征性的吸收光谱，最大吸收
DNA核酸浓度的测定实验
实验方法原理 构成核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键，使核苷核和核酸在紫外线光具有特征性的吸收光谱，最大吸收峰为260nm。窄光带紫外分光光度计，长260nm．，比色杯光径1cm，1个吸光度值（1A）相当于50ug/ml双螺DNA，40ug/m1单螺旋DNA或RNA），20ug/ml寡核苷酸实验材料
福林酚比色法原理
原理蛋白质与福林(Folin)-酚试剂反应，产生蓝色复合物。作用机理主要是蛋白质中的肽键与碱性铜盐产生双缩脲反应，同时也由于蛋白质中存在的酪氨酸与色氨酸同磷钼酸-磷钨酸试剂反应产生颜色。呈色强度与蛋白质含量成正比，是检测可溶性蛋白质含量最灵敏的经典方法之一。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加
比色法血清镁测定实验
实验方法原理血清中镁，镉离子在碱性溶液中段与甲基麝香草酚蓝染色结合，呈或蓝紫色化合物加人EGTA可掩盖离子的干扰。实验步骤一、 实验试剂：1. 碱性缓冲液：称取无水亚硫酸钠2g，叠氮钠100mg，甘氨酸750mg和乙二醇-双-(2-氨基乙醚)四乙酸 [Ethylene glycol-bis(2-am
比色法血清镁测定实验
实验方法原理 血清中镁，镉离子在碱性溶液中段与甲基麝香草酚蓝染色结合，呈或蓝紫色化合物加人EGTA可掩盖离子的干扰。实验步骤 一、 实验试剂：1. 碱性缓冲液：称取无水亚硫酸钠2g，叠氮钠100mg，甘氨酸750mg和乙二醇-双-(2-氨基乙醚)四乙酸 [Ethylene glycol-bi
动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法...1
动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和紫外吸收法原理细胞内大部分RNA 均与蛋白质结合在一起，以核蛋白的形式存在。因此分离RNA时必须使RNA 与蛋白质解离，并除去蛋白质。除去蛋白质的方法主要有：（1）用氯仿－辛醇混合液剧烈振荡，使蛋白质变性。（2）在冷的2mol/L盐酸胍溶液
胆碱酯酶的测定实验_显色法
实验方法原理靛酚乙酸 → 靛酚＋乙酸颜色从红色变为蓝色。实验材料酶样品试剂、试剂盒靛酚乙酸磷酸钾仪器、耗材分光光度计实验步骤实验混合物：0.02 ml 酶样品对比 25℃ 时的标准曲线，测定 625 nm 处的吸收值。
谷丙转氨酶的活性测定实验_显色法
实验方法原理血清谷丙转氨酶（SGPT）能催化丙氨酸与酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸，丙酮酸在酸性条件下与2，4-二硝基苯肼可缩合成丙酮酸二硝基苯腙，该腙在碱性条件下呈现出橙红色，呈色深浅符合比尔定律，在520 nm处有最大吸收。SGPT 在肝脏中含量最高，由于肝细胞损害，该酶逸出血液，可使 SGPT 含
核糖核酸的测定
【实验原理】RNA分子中的核糖在浓酸中加热，脱水转变成糖醛，后者在氯化铁存在下，与地衣酚试剂（3，5-二羟基甲苯）反应，缩合成绿色化合物，在670nm处有最大吸收峰，从而可进行定量测定。待测样品中的RNA浓度在20～200µg/mL之间时，其吸光度与浓度成正比。反应式如下：核 糖 糖 醛 绿色化合物
蛋白质的定量测定实验
试剂、试剂盒 Bradford 试剂 牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 Tris-缓冲盐溶液 仪器、耗材