用酸沉淀法浓缩蛋白质实验——丙酮沉淀法

实验材料含蛋白质的样品试剂、试剂盒丙酮(或其他有机溶剂如乙醇或甲醇)仪器、耗材Eppendorf 管(小塑料离心管)Eppendorf 管离心机(小型台式离心机)混旋器实验步骤1. 加 1 ml冷丙酮(-20℃)至 200 ul 样品溶液,混匀。2. -20℃: 放置 10 min。3. 小型台式离心机离心 5 min。4. 弃去上清液,使沉淀风干。5. 于 1~2 倍沉淀体积的缓冲液中再悬浮沉淀。注意事项1. 反复用丙酮洗涤和沉淀蛋白质 。2. 通过延长 -20℃ 的放置时间,达 2 h 以上,再用 27 000 × g 离心 10 min,可以定量沉淀小于 1 ug 蛋白质。3. 中性盐提高蛋白质在有机溶剂中的溶解度,二价阳离子降低蛋白质在有机溶剂中的溶解度。......阅读全文

苯丙酮尿症的简介

  苯丙氨酸是人体必需的氨基酸之一。正常人每日需要的摄入量约为200~500毫克,其中1/3供合成蛋白,2/3则通过肝细胞中苯丙氨酸羟化酶(PAH)的转化为酪氨酸,以合成甲状腺素、肾上腺素和黑色素等。苯丙氨酸转化为酪氨酸的过程中,除需PAH外,还必须有四氢生物蝶呤(BH4)作为辅酶参与。基因突变有可

丙酮酸激酶的作用

  丙酮酸激酶使磷酸烯醇式丙酮酸和ADP变为ATP和丙酮酸,是糖酵解过程中的主要限速酶之一,有M型和L型两种同工酶,M型又有M1及M2亚型。M1分布于心肌、骨骼肌和脑组织;M2分布于脑及肝脏等组织。L型同工酶主要存在于肝、肾及红细胞内。心肌细胞坏死后,PK释放入血,PK的测定可用于诊断心肌梗死。

丙酮的危险性概述

  健康危害:急性中毒主要表现为对中枢神经系统的麻醉作用,出现乏力、恶心、头痛、头晕、易激动。重者发生呕吐、气急、痉挛,甚至昏迷。对眼、鼻、喉有刺激性。口服后,先有口唇、咽喉有烧灼感,后出现口干、呕吐、昏迷、酸中毒和酮症。  慢性影响:长期接触该品出现眩晕、灼烧感、咽炎、支气管炎、乏力、易激动等。皮

丙酮酸激酶测定介绍

  (1)原理:在二磷酸腺昔(ADP)存在的条件下丙酮酸激酶(PK),催化磷酸烯醇丙酮酸(PEP)转化成丙酮酸,在辅酶Ⅰ还原型(NADH)存在情况下,丙酮酸被LDH转化为乳酸。若标记荧光于NADH上,此时有荧光的NADH变为无荧光的NAD.  参考值:正常荧光在20min内消失。l5.0±1.99I

怎样预防苯丙酮尿症?

  1、遗传咨询:本病为常染色体隐性遗传。根据遗传规律可推断患儿的父母为杂合子(即致病基因携带者)患儿为纯合子,其发病率为25%。若本病息者选择配偶亦是此病患者,则后代100%为患者;若一方为患者,一方为携带者则子代50%为患者;若一方为患者或为杂合子,而另一方正常,则后代表现型正常,但是100%或

丙酮酸如何影响心情?

  丙酮酸可以通过多种途径影响心情。首先,丙酮酸是大脑的主要能源之一,它可以影响大脑中的神经递质合成和功能,从而影响情绪和行为。  其次,丙酮酸可以通过血液循环到达大脑,影响大脑中的葡萄糖代谢和能量供应。当血糖水平下降时,丙酮酸水平也会下降,这可能导致情绪低落、疲劳和注意力不集中等症状。  此外,丙

丙酮的生态学数据

1、生态毒性LC50:4740~6330mg/L(96h)(虹鳟鱼);10mg/L(48h)(水蚤);2100mg/L(48h)(卤虫)LD50:5000mg/L(24h)(金鱼)EC50:8600mg/L(5min)(发光菌,Microtox毒性测试);10mg/L(48h)(水蚤)2、生物降解性

试样中丙酮含量的测定

密度计法1、测量原理 由密度计在被测液体中达到的平衡状态时抽浸没的深度读出该液体的密度。2、仪器、设备1) 密度计:Ⅰ型,分度值0.0005g/㎤2)恒温水浴:20±0.1℃3)玻璃量筒:4)温度计:0-50℃,分度值0.1℃3、 测定步骤1)将待测试样注入清洁、干燥的量筒内,不得有气泡,将量筒置于

丙酮的主要用途

丙酮是重要的有机合成原料,用于生产环氧树脂,聚碳酸酯,有机玻璃,医药,农药等。亦是良好溶剂,用于涂料、黏结剂、钢瓶乙炔等。也用作稀释剂,清洗剂,萃取剂。还是制造醋酐、双丙酮醇、氯仿、碘仿、环氧树脂、聚异戊二烯橡胶、甲基丙烯酸甲酯等的重要原料。在无烟火药、赛璐珞、醋酸纤维、喷漆等工业中用作溶剂。在油脂

关于丙酮的急救措施介绍

  皮肤接触:脱去污染的衣着,用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。  眼睛接触:提起眼睑,用流动清水或生理盐水冲洗。就医。  吸入:迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难,给输氧。如呼吸停止,立即进行人工呼吸。就医。  食入:饮足量温水,催吐。就医。

丙酮的分子结构数据

摩尔折射率:15.97摩尔体积(cm3/mol):75.1等张比容(90.2K):156.5表面张力(dyne/cm):18.8极化率(10-24cm-3):6.33

如何预防苯丙酮尿症?

  进行遗传咨询:苯丙酮尿症是一种遗传性疾病,如果家族中有患者,建议进行遗传咨询,了解患病风险和遗传方式,以便及时采取预防措施。  新生儿筛查:苯丙酮尿症的早期诊断和治疗非常重要,建议所有新生儿进行苯丙酮尿症筛查,以便及早发现和治疗。  饮食控制:苯丙酮尿症患者需要限制饮食中的苯丙氨酸摄入量,建议在

丙酮酸激酶活性测定

【测定原理】PK 活性测定的原理基本同PK 荧光斑点试验,主要不同的是用紫外分光光度法定量测定结果。在10 分钟内、波长340nm 下,测定孵育液中NADH 吸光度的变化,通过测定单位时间内NADH 减少的量来计算PK 的活性。由于PK 是一种变构酶,在低浓度磷酸烯醇丙酮酸(PEP)时,PK

苯丙酮尿症的病因

苯丙氨酸是人体必需的氨基酸之一。正常人每日需要的摄入量约为200~500毫克,其中1/3供合成蛋白,2/3则通过肝细胞中苯丙氨酸羟化酶(PAH)的转化为酪氨酸,以合成甲状腺素、肾上腺素和黑色素等。苯丙氨酸转化为酪氨酸的过程中,除需PAH外,还必须有四氢生物蝶呤(BH4)作为辅酶参与。基因突变有可能造

丙酮流量表的应用

应用进行工业炉窑热平衡测试,对于掌握工业炉窑的热能利用情况,提高产品质量,为企业节能降耗,降低成本,其经济效益无疑是巨大的。在实际测试的过程中,涡轮流量计因其精度高,测量范围宽,耐压高,且有数字信号输出,在工业锅炉热平衡测试中得到首先选用。本文对涡轮流量计在工业锅炉热平衡测试中使用的若干问题进行必要

丙酮酸脱羧酶

丙酮酸脱羧酶是一种催化丙酮酸脱羧生成乙醛的酶(EC4.1.1.1)。它也被称为2-氧代酸羧化酶、α-酮酸羧化酶和丙酮酸脱羧酶。在厌氧条件下,这种酶参与酵母中发生的发酵过程,尤其是酵母属,通过发酵产生乙醇。它也存在于某些鱼类(包括金鱼和鲤鱼)中)在氧气不足的情况下,它允许鱼进行乙醇发酵(以及乳酸发酵)

丙酮的化学性质

丙酮是脂肪族酮类具有代表性的的化合物,具有酮类的典型反应。例如:与亚硫酸氢钠形成无色结晶的加成物。与氰化氢反应生成丙酮氰醇。在还原剂的作用下生成异丙醇与频哪酮。丙酮对氧化剂比较稳定。在室温下不会被硝酸氧化。用酸性高锰酸钾强氧化剂做氧化剂时,生成乙酸、二氧化碳和水。在碱存在下发生双分子缩合,生成双丙酮

丙酮的泄漏应急处理介绍

  应急处理:迅速撤离泄漏污染区人员至安全区,并进行隔离,严格限制出入。切断火源。建议应急处理人员戴自给正压式呼吸器,穿防静电工作服。尽可能切断泄漏源。防止流入下水道、排洪沟等限制性空间。  小量泄漏:用砂土或其它不燃材料吸附或吸收。也可以用大量水冲洗,洗水稀释后放入废水系统。  大量泄漏:构筑围堤

丙酮酸激酶测定介绍

丙酮酸激酶测定:包括荧光斑点试验和PK活性检测。 (1)原理:在二磷酸腺昔(ADP)存在的条件下丙酮酸激酶(PK),催化磷酸烯醇丙酮酸(PEP)转化成丙酮酸,在辅酶Ⅰ还原型(NADH)存在情况下,丙酮酸被LDH转化为乳酸医学`教育网搜集整理。若标记荧光于NADH上,此时有荧光的NADH变为无荧光的

丙酮的物理性质

外观与性状:无色透明易流动液体,有微香气味,极易挥发熔点:-94.9℃沸点: 56.5℃密度:0.7899g/cm3饱和蒸气压:24kPa(20℃)临界温度:235.5℃临界压力:4.72MPa辛醇/水分配系数的对数值:-0.24引燃温度:465℃爆炸下限(V/V):2.2%爆炸上限(V/V):13

丙酮酸的去路介绍

糖酵解过程的产物丙酮酸有多种分支去路1.生成乙酰辅酶A:丙酮酸在有氧气和线粒体存在时进入线粒体,经丙酮酸脱氢酶复合体(表5-1-2)催化氧化脱羧产生NADH、CO2和乙酰辅酶A,乙酰辅酶A进入三羧酸循环和氧化磷酸化彻底氧化为CO2和H2O,释放的能量在此过程中可产生大量ATP。这是糖的有氧氧化过程。

丙酮的毒理学数据

1、急性毒性:LD50:5800mg/kg(大鼠经口);5340mg/kg(兔经口)2、刺激性:家兔经皮:395mg,轻度刺激(开放性刺激试验);家兔经眼:20mg,重度刺激。3、亚急性与慢性毒性:大鼠7.22g/m3,每天8h吸入染毒,共20个月,未发现临床及组织病理学改变。4、致突变性:细胞遗传

磷酸二羟丙酮的概念

磷酸二羟丙酮,生物学术语,是一种存在于生物中的糖酵解的中间产物。中文名磷酸二羟丙酮外文名DHAP,dihydroxyacetone phosphate概    念糖酵解以及糖异生的中间产物作    用甘油-3-磷酸经NAD+氧化成为DHAP学    科生物学

免疫沉淀法的主要类型

个别免疫沉淀法(IP):用来分离某个细胞萃取物中的已知特定蛋白质免疫共沉淀法(Co-IP):研究整个蛋白质复合体染色质免疫沉淀法(ChIP):用来研究DNA上的特定蛋白质RNA免疫沉淀法(RIP):和ChIP相近,但RNA免疫沉淀法是用来研究会与RNA结合的蛋白质RIP技术(RNA Binding

沉淀法制备纳米氧化铁

沉淀法由于成本低廉、操作简单,是液相化学合成高纯度纳米微粒采用的zui广泛的方法之一。 沉淀法制备过程: 1先在溶液环境中溶解一种或多种可溶性铁盐溶液; 2然后加入适当沉淀剂(OH-、C2O42-、CO32-等),形成不饱和的氢氧化物、水合氧化物和盐类; 3从溶液中析出,并将溶剂和溶液中原有的阴离子

分步沉淀法溶解沉银介绍

先将渣用水和稀释后的母液进行浆化、搅拌,可溶性的金属这时可溶解成一系列的硫酸盐溶液。在此之前,冶炼厂对银的回收几乎未找到较为合适的办法,致使大部分的银流失到铁渣中,大大降低了银的回收率。经过摸索,在原有设备的基础上,将碱液接到浆化浸出槽的上方,在边搅拌边浸出的同时,再加入碱液,直到pH值到一定值时,

关于化学沉淀法的应用介绍

  化学沉淀法经常用于处理含有汞、铅、铜、锌、六价铬、硫、氰、氟、砷等有毒化合物的废水。利用向废水中投加氢氧化物、硫化物、碳酸盐、卤化物等生成金属盐沉淀可以去除废水中的金属离子,向废水中投加钡盐可用于处理含六价铬的工业废水生成铬酸盐沉淀,向废水中投加石灰生成氟化钙沉淀可以去除水中的氟化物。

免疫沉淀法的技术特点

免疫沉淀法(Immunoprecipitation, IP)是一种研究蛋白质间交互作用的生物技术,这种技术是将蛋白质视为抗原,并利用抗体与之进行特异性结合的特性,来进行研究。这项技术可用来将含有上千种不同蛋白质的样品中,分离和浓缩出特定蛋白质。进行免疫沉淀法时,抗体需要和一个受质结合。

关于亚计量沉淀法的介绍

  取甲和乙两份等量放射性同位素溶液,各含待测元素。克,其放射性为Ao,放射性比度为w。将乙溶液加到含x克待测元素的试液中,进行同位素稀释后,其放射性比度为s1。如果从甲和乙(已与试液混合)溶液中分另l]等量沉淀出待测元素w0克,分别测得其放射性为Aa和Ab。  这样的方法就避免了用一般化学法定量,

水解沉淀法的制备方法介绍

  水解沉淀法就是利用碱性物质的水解释放OH-,常用的碱性物质有尿素、己二胺等,这些物质释放OH-的速度比较慢,在制备纳米Fe3O4微粒时有利于生成颗粒均匀的纳米颗粒,通常这种方法能制备出颗粒分布在7nm到39nm的纳米颗粒。