亲和柱的制备实验_配基固相化技术
实验方法原理溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是这样偶联的亲和柱多次重复使用时，将会有少量配体脱落，所以反复使用的亲和柱应考虑选择其他活化的介质。异脲键的形成伴有荷电基团的增加，将会影响离子交换作用。为了克服这一影响要在纯化时采用至少 0.1 mol／L 的缓冲盐液。该固相化方法简便廉价，并可广泛用于蛋白质、核酸和凝素。实验材料溴化氰活化的琼脂糖凝胶试剂、试剂盒盐酸偶联缓冲液阻断缓冲液仪器、耗材玻璃漏斗玻璃棒真空泵实验步骤1. 取 2 g 溴化氰活化的琼脂糖凝胶加入玻璃漏斗内 1 mmol/L 盐酸中，用玻棒轻轻搅动 20 min直至介质完全溶胀。静置待混悬的介质沉降后，用真空泵吸去液体。1 g 干凝胶可以获得 3.5 ml 溶胀胶；2. 用 200 ml 1 mmol/L 盐酸洗介质，共3次，每次洗后吸去液体；3. 用偶联缓冲液（0.1......阅读全文
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验12
方案12 用 SYPRO Ruby 进行荧光染色实验材料含蛋白质样品的凝胶试剂、试剂盒固定液SYPRO Ruby 染料仪器、耗材聚丙烯塑料平皿往复式或定轨式摇床UV或蓝光透射仪实验步骤1.将胶放入聚丙烯塑料平皿中，其中应有足够的固定溶液，使凝胶在平皿中能自由漂浮。在摇床上摇动 30 min。如果是多
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验9
方案9 胶体考马斯亮蓝染色实验暂未评分点评实验，有机会获丁当奖励 +收藏固相化 pH 梯度双向凝胶电泳实验标签：双向凝胶电泳蛋白质 固相化pH 蛋白质与蛋白质组学实验指南 第四章双向电泳是研究蛋白质组学的一种有效方法。与单向电泳相比，它能从复杂的蛋白质混合物中分离出更多的成分。电泳时，蛋白质迁移速度
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验7
方案7 垂直SDS 平板凝胶制备：同时灌制多梯度凝胶实验实验方法原理对于分离宽分子量范围的蛋白质，梯度 SDS-PAGE 凝胶可提供最佳分析方法，产生更清晰的蛋白质点。通过减少凝胶中孔的尺寸，可使扩散减少。但是，梯度凝胶重复性较差，所以通常用多凝胶灌制装置来同时灌制，制作一套凝胶来进行同一系列的实验
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验5
方案5 第一向：蛋白质的等电聚焦电泳实验实验方法原理这里所描述的分离蛋白质的两种方法都是基于蛋白质所带净电荷的多少，使用固相化的 pH 梯度凝胶进行的 IEF 技术。这些方法作为双向凝胶分离的第一向，除了利用传统的水平电泳仪进行 IPG 凝胶的等电聚焦外（方案 5 方法 A)，还能在自带的电泳槽里使
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验18
方案18 用印度墨水染色膜上的蛋白质实验材料转膜蛋白试剂、试剂盒印度墨水PBS吐温-20溶液实验步骤1.将膜浸人吐温-20 溶液中，轻摇 10 min。2.弃去吐温-20 溶液。3.重复步骤1与2三次。4.将膜转人印度墨水中，轻摇染色 2~18 h。5.弃去染液，用吐温-20 溶液洗膜，轻摇 5 m
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验6
方案6 垂直 SDS 平板凝胶的制备：均一凝胶的灌制实验实验方法原理蛋白质通过 IEF 进行分离之后，可进行第二向电泳，即 SDS-PAGE。本方案详细介绍了灌制均一 SDS-PAGE 凝胶的方法。均一凝胶（具完全相同的%T和％c) 对特殊分子量范围的蛋白质有较好的分离效果，因其灌制方法简单而被普遍
亲和色谱法
一、基本理论（一）原理 在生物体内，许多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有与某些相对应的专一分子可逆结合的特性。例如抗原和抗体、酶和底物及辅酶、激素和受体、RNA和其互补的DNA等，都具有这种特性。生物分子之间这种特异的结合能力称为亲和力，根据生物分子间亲和吸附和解离的原理，建立起来的
固相萃取仪的技术
在固相萃取中最通常的方法是将固体吸附剂装在一个针筒状柱子里，使样品溶液通过吸附剂床，样品中的化合物或通过吸附剂或保留在吸附剂上（依靠吸附剂对溶剂的相对吸附）。“保留”是一种存在于吸附剂和分离物分子间吸引的现象，造成当样品溶液通过吸附剂床时，分离物在吸附剂上不移动。保留是三个因素的作用：分离物、溶
固相膜的技术要求
1.孔径：用于穿流法的膜一般选择0.4μm左右，用于横流法的膜可选择5～10μm。 2.流速：孔径大，流速快。 3.蛋白质结合力：吸附力很强，以μg/cm2表示。 4.均一性：优质的膜应具有良好的均一性，这样才能保证试剂批内的均一性。
固相萃取技术的原理
固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取中，固相对分离物的吸附力比溶解分离物的溶剂更大。当样品溶液通过吸附剂床时，分离物浓缩在其表面，其他样品成分通过吸附剂床；通过只吸附分离物而不吸附其他样品成分的吸附剂，可以得到高纯度和浓缩的分离物。
固相萃取技术的方法
固相萃取技术的方法1.选择SPE 小柱或滤膜 首先应根据待测物的理化性质和样品基质, 选择对待测物有较强保留能力的固定相。若待测物带负电荷, 可用阴离子交换填料, 反之则用阳离子交换填料。若为中性待测物, 可用反相填料萃取。SPE 小柱或滤膜的大小与规格应视样品中待测物的浓度大小而定。对于浓度较低的
固相萃取技术的原理
固相萃取装置在过去的二十多年中，固相萃取作为化学分离和纯化的一个强有力工具出现了。从痕量样品的前处理到工业规模的化学分离，吸附剂萃取在制药、精细化工、生物医学、食品分析、有机合成、环境和其他领域起着越来越重要的作用。固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取中，固相对分离物的吸附力比溶解
固相萃取技术的原理
固相萃取装置在过去的二十多年中，固相萃取作为化学分离和纯化的一个强有力工具出现了。从痕量样品的前处理到工业规模的化学分离，吸附剂萃取在制药、精细化工、生物医学、食品分析、有机合成、环境和其他领域起着越来越重要的作用。固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取中，固相对分离物的吸附力比溶解
固相萃取技术的原理
固相萃取装置在过去的二十多年中，固相萃取作为化学分离和纯化的一个强有力工具出现了。从痕量样品的前处理到工业规模的化学分离，吸附剂萃取在制药、精细化工、生物医学、食品分析、有机合成、环境和其他领域起着越来越重要的作用。固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取中，固相对分离物的吸附力比溶解
固相萃取技术的分类
1.正相固相萃取所用的吸附剂都是极性的．取决于目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用，其中包括了氢键，π—π键相互作用，偶极－偶极相互作用和偶极－诱导偶极相互作用以及其他的极性－极性作用。2.反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物通常是非极性的或极性较弱的，主要是靠非极性－非极性相
固相膜的技术要求
1.孔径：用于穿流法的膜一般选择0.4μm左右，用于横流法的膜可选择5～10μm。2.流速：孔径大，流速快。3.蛋白质结合力：吸附力很强，以μg/cm2表示。4.均一性：优质的膜应具有良好的均一性，这样才能保证试剂批内的均一性。
固相萃取技术概述
它利用分析物在不同介质中被吸附的能力差将标的物提纯，有效的将标的物于干扰组分分离，大大增强对分析物特别是痕量分析物的检出能力，提高了被测样品的回收率。SPE技术自上世纪70年代后期问世以来，发展迅速，广泛应用于环境、制药、临床医学、食品等领域。
固相微萃取技术
固相微萃取(Solid Phase Microextraction, SPME)是九十年代兴起并迅速发展的新型的、环境友好的样品前处理技术，无需有机溶剂，操作也很简便。该技术使用的是一支携带方便的萃取器，适于室内使用和野外的现场取样分析，也易于进行自动操作。这对样品数量多、操作周期短的常规分析极为重
固相萃取技术——概述
所谓萃取法，就是从样品中提取组分，传统的方法是液-液萃取法 ( LLE)，即用液体作为提取剂。固相萃取（Solid Phase Extraction, SPE） 是19世纪70年代后期发展起来的样品前处理技术。它发展迅速，广泛应用于环境、制药、临床医学、食品等领域 。 固相萃取（SPE）是利用
固相微萃取技术如何提取固相纳米颗粒
顶空的意思就是顶部的空间，是指在热力学平衡的蒸汽相与被分析样同时存在于一个密闭系统中，取上部气体。固相微萃取(solid-phase microextraction,SPME)技术(是20世纪90年代兴起的一项新颖的样品前处理与富集技术，它最先由加拿大Waterloo大学的Pawliszyn教授
手动固相萃取装置与自动化固相萃取仪的介绍
手动固相萃取装置类似于溶剂过滤装置，所不同的是由萃取膜片取代过滤膜片。自动化固相萃取仪则可以自动完成大体积水样萃取的全过程。
固相萃取仪全自动固相萃取仪的技术特点
全自动固相萃取仪的技术特点1、全自动操作模式自动完成固相萃取全过程：柱活化-上样-柱淋洗-柱干燥-柱洗脱，自动完成柱切换等功能，实现批量样品的处理。2、双通道萃取双样品位上样，实现双通道的同时活化、同时上样、同时洗脱、同时干燥；根据样品数量可以升级为四通道、六通道和八通道。3、连续处理样品能力单机可
染料配基层析法纯化蛋白质实验——染料配基法
染料配基层析不是真正意义的亲和层析，因为它们并不是与它们结合的蛋白质的天然配基。然而染料柱能很好地结合蛋白质，并能导致满意地纯化蛋白质。事实上，有时这种结合甚至比正常的配基更紧。染料配基柱通常是廉价和稳定的，并且具有较高的蛋白质结合容量。所以染料配基层析能作为蛋白质纯化中有价值的步骤之一。来源：《蛋
一种新型固相萃取技术——固相微萃取
摘 要 固相微萃取技术是90年代初新发展起来的集采样、萃取、浓集、进样于一体的分析技术，具有操作简单易行，不必使用大量有机溶剂，且易实现自动化等优点。本文对该技术的实验方法、原理及其在药物分析、环境保护等领城中的应用进行了综述。关键词 固相微萃取 无溶剂萃取 样品前处理固相
固相萃取仪的技术特点
1、精确控速，单道流速0.01~10.85ml/min,支持大体积进样和正压洗脱，避免交叉污染； 2、无级数控操作、大屏幕显示、触摸屏与按键兼容操作，轻触按键、人体工程力学设计； 3、耐腐蚀顶板，机箱磷化和多层环氧树脂喷涂处理； 4、机箱结构方便维护，配有宝晶科技萃取工作软件模块，多种输出
固相微萃取技术的特点
集取样、萃取、浓缩和进样于一体,操作方便,耗时短,测定快速高效。 无需任何有机溶剂,是真正意义上的固相萃取,避免了对环境的二次污染。 仪器简单,无需附属设备,适于现场分析,也易于操作。 灵敏度高,可以实现超痕量分析,可以达到纳克每克级别的检测。
固相萃取技术的方法介绍
1.选择SPE 小柱或滤膜首先应根据待测物的理化性质和样品基质, 选择对待测物有较强保留能力的固定相。若待测物带负电荷, 可用阴离子交换填料, 反之则用阳离子交换填料。若为中性待测物, 可用反相填料萃取。SPE 小柱或滤膜的大小与规格应视样品中待测物的浓度大小而定。对于浓度较低的体内样品, 一般
固相萃取技术的工作原理
固相萃取（Solid Phase Extraction，简称SPE）是从20世纪80年代中期开始发展起来的一项样品前处理技术。由液固萃取和液相色谱技术相结合发展而来。主要用于样品的分离，纯化和富集。主要目的在于降低样品基质干扰，提高检测灵敏度。SPE技术基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗
固相萃取仪的技术特点
1、精确控速，单道流速0.01~10.85ml/min,支持大体积进样和正压洗脱，避免交叉污染； 2、无级数控操作、大屏幕显示、触摸屏与按键兼容操作，轻触按键、人体工程力学设计； 3、耐腐蚀顶板，机箱磷化和多层环氧树脂喷涂处理； 4、机箱结构方便维护，配有宝晶科技萃取工作软件模块，多种输出
固相萃取技术的基本步骤
SPE实质上是一种液相色谱分离，所用的吸附剂也与液相色谱固定相相同，只是在粒度上有所区别。SPE的一般做法是：利用选择性吸附与选择性洗脱的色谱分离原理，使液体样品通过吸附剂，保留其中的分析物，用适当强度溶剂洗除杂质，然后用少量溶剂洗脱分析物，达到快速分离净化与浓缩的目的。也有选择性吸附干扰杂质