蛋白质染色实验——非氨盐银染法
实验材料蛋白质试剂、试剂盒DTT硝酸银碳酸盐显影液柠檬酸仪器、耗材摇床实验步骤1. 将凝胶置于玻璃或聚乙烯容器中，加入100 ml 固定液，在旋转摇床中缓慢摇动30 min。 2. 倾去固定液，将凝胶浸没在脱色液中，缓慢摇动30 min。 3. 倾去脱色液，加50 ml 10%戊二醛，在通风橱中缓慢摇动10 min。 4. 倾去戊二醛，用水彻底洗凝胶2 h，期间换水几次以保证获得低本底水平。5. 倾去水，以100 ml ug/ml 的DTT浸泡凝胶30 min。 6. 倾去DTT溶液，不用冲洗，直接加入100 ml 0.1%硝酸银溶液，缓慢摇动30 min。7. 倾去硝酸银溶液，用小量水快速冼凝胶1次，然后用小量碳酸盐显影液快速洗2次。8. 将凝胶浸泡在100 ml 碳酸盐显影液中缓慢摇动，直至......阅读全文
蛋白质染色实验——非氨盐银染法
实验材料蛋白质试剂、试剂盒DTT硝酸银碳酸盐显影液柠檬酸仪器、耗材摇床实验步骤1. 将凝胶置于玻璃或聚乙烯容器中，加入100 ml 固定液，在旋转摇床中缓慢摇动30 min。 2. 倾去固定液，将凝胶浸没在脱色液中，缓慢摇动30 min。 3. 倾去脱色液，加50 ml 10%戊二醛，在通风橱
蛋白质染色实验——银染法
实验材料蛋白质试剂、试剂盒脱色液戊二醛硝酸银洗印显影液仪器、耗材培养箱摇床实验步骤1. 将聚丙烯酰胺凝胶放在塑料容器并以5倍体积的固定液覆盖，在旋转摇床中缓慢摇动30 min 以上。 2. 倾去固定液，加5倍凝胶体积的脱色液，缓慢摇动60 min 以上。 3. 倾去脱色液，加5倍凝胶体积的10
蛋白质染色实验——快速银染法
实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲醛固定液硫代硫酸钠干胶液甲醇仪器、耗材摇床透析膜实验步骤1. 将凝胶置于塑料容器中，加入50 ml 甲醛固定液，在旋转摇床中缓慢摇动10 min。 2. 倾去固定液，用水冼两次，每次5 min，缓慢摇动。 3. 倾去水，凝胶浸泡在0.2 g/l 硫代硫酸钠溶液中1 m
银染实验
试剂、试剂盒甲醇（50% 和5%v v)二硫苏糖醇AgNO3柠檬酸（固态)显影液实验步骤试剂甲醇（50% 和5%v/v)10umol/L二硫苏糖醇（DTT)AgNO3(0.1%w/v)柠檬酸（固态)显影液操作程序此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下，凝胶在旋转平台上缓慢摇动
银染实验
银染实验 试剂、试剂盒 甲醇（50% 和5%v v) 二硫苏糖醇 AgNO3
银染实验
试剂、试剂盒 甲醇（50% 和5%v v)二硫苏糖醇 AgNO3柠檬酸（固态)显影液实验步骤 试剂甲醇（50% 和5%v/v)10umol/L二硫苏糖醇（DTT)AgNO3(0.1%w/v)柠檬酸（固态)显影液操作程序此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下，凝胶在旋转平台上缓
银染实验用水指南
SDS聚丙烯酰胺凝胶染色是蛋白质研究的一个基础方法。染色方法有很多，实际应用中，考马斯亮蓝染色（考染）和银染是运用的最多的方法。考马斯亮蓝G250在游离状态下呈红色，它与蛋白质结合后变为蓝色，结合物在595 nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。银染实验中
蛋白质染色实验
考马斯亮蓝染色 银染法 非氨盐银染法 快速银染法 实验方法原理 1. 凝胶中蛋白质的定位可用考马斯亮蓝染料染色或银染色。前者简便
银染
1．将固定液中的凝胶摇动过夜或至少1小时。2．将保温液中的凝胶轻微振荡2小时。3．去离子水清洗凝胶3次，每次20分钟。4．将硝酸银溶液中凝胶轻微振荡30分钟。5．用去离子水快速洗胶30秒。6．将定影液中凝胶摇动5～30分钟，时间由所加的蛋白质量决定。7．如果已经达到所需的颜色深度，将凝胶放到定影液中
PCR－产物电泳银染实验
实验方法原理聚丙烯酰胺凝胶（PAG）是由丙烯酰胺单体和交联剂亚甲基双丙烯酰胺，在引发剂过硫酸胺（AP）提供自由基和催化剂四甲基乙二胺（TEMED）的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光线诱发聚合，所以其水溶液应贮藏在棕色瓶中，置低温 4℃ 更佳。由于其水溶液稳定性
PCR－产物电泳银染实验
常用的核酸电泳法有两种。①水平电泳：琼脂糖凝胶，紫外光下判断条带。此法经济省时，但分辨率较低。②垂直电泳：聚丙烯酰胺凝胶，可见光下判断条带。此法相对费力，但分辨率较高。分辨率高是聚丙烯酰胺电泳法被优先用于克隆性基因重排条带判断的关键。在聚丙烯酰胺凝胶上较宽弥散被判断为假阳性（阴性）的条带，在琼脂糖胶
PCR－产物电泳银染实验
实验方法原理 聚丙烯酰胺凝胶（PAG）是由丙烯酰胺单体和交联剂亚甲基双丙烯酰胺，在引发剂过硫酸胺（AP）提供自由基和催化剂四甲基乙二胺（TEMED）的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光线诱发聚合，所以其水溶液应贮藏在棕色瓶中，置低温 4℃ 更佳。由于其水溶液稳定性较差，通常 2 个月内用完为好。
银染实验的操作流程
实验目的检测聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质。实验原理在碱性条件下，用甲醛将蛋白带上的硝酸银（银离子）还原成金属银，以使银颗粒沉积在蛋白带上。染色的程度与蛋白中的一些特殊的基团有关，不含或者很少含半胱氨酸残基的蛋白质有时候呈负染。银染的详细机制还不是非常清楚。试剂：乙醇、冰醋酸（纯乙酸）、乙酸钠、硫代硫酸钠
低背景的蛋白质银染方法
我们做蛋白质电泳的人都知道，银染色很灵敏，有很强的说服力，但通常胶背景较深，不易扫描。在这里介绍一下低背景的蛋白质银染方法。Step Reagent Time/minFix 50%EtOH, 12%HAC, 0.1%HCHO, 38%H2O 60Rinse 50% EtOH 5 min, 3 tim
银染实验的操作注意事项
1．固定时间较长，则加一步水洗30min，以免胶太脆而破碎。2．甲醛在使用前加入。3．最好多配制一份显色液，第一次显色到溶液变混浊时换一份显色液，显色到点清晰。4．显色过程很快，要注意把握时间，避免染色过度。5．银染液和显色液需要预冷。6．所用器皿要很洁净，不用手直接接触，以免杂蛋白污染！7．清洗用
银染的应用
主要是用于垂直凝胶电泳中低丰度蛋白的检测，如内源性GST-Pulldown、Co-IP等实验中相互作用蛋白的研究 。
SSR银染方法
SSR银染方法(轻轻震荡)1、固定10%乙醇+0.5%冰乙酸 6min×2次2、染色0.2% AgNO3 12min3、漂洗（1）蒸馏水 1-2min（2）0.002% Na2S2O3 1-2min（3）显色1.5%NaOH + 0.4%甲醛（4）保存0.75%Na2CO3
异染颗粒染色配制及染色方法实验
异染颗粒染色配制及染色方法实验可以用于：（1）检测白喉杆菌的存在；（2）异染颗粒与菌体对比度好。实验方法原理用于白喉棒状杆菌染色，异染颗粒可明显地被显示出来，标本直接涂片或细菌涂片均可用改良阿伯特法染色来观察异染颗粒。实验材料白喉杆菌试剂、试剂盒甲苯胺兰孔雀绿冰醋酸乙醇仪器、耗材培养基载玻片实验步骤
异染颗粒染色配制及染色方法实验
实验方法原理 用于白喉棒状杆菌染色，异染颗粒可明显地被显示出来，标本直接涂片或细菌涂片均可用改良阿伯特法染色来观察异染颗粒。实验步骤 实验试剂：甲液：甲苯胺兰：0.15g 孔雀绿：0.2g冰醋酸： lml 95%乙醇：2ml蒸馏水： 100ml将各染料先溶于乙醇，然后加入水与冰醋酸的
低背景的蛋白质银染(silver－staining)方法
我们做蛋白质电泳的人都知道，银染色很灵敏，有很强的说服力，但通常胶背景较深，不易扫描。在这里介绍一下低背景的蛋白质银染方法。Step Reagent Time/minFix 50%EtOH, 12%HAC, 0.1%HCHO, 38%H2O 60Rinse 50% EtOH 5 min, 3 tim
核酸的银染方法
核酸硝酸银染色：参考《锌对缺血再灌注大鼠肝脏金属硫蛋白一1基因表达的影响》营养学报2000年第22卷第4期294-297取PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳，所得凝胶进行硝酸银染色．程序如下：(1)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液中固定6 min；(2)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液
方案11－胶内蛋白质的硝酸银染色实验
实验材料通过电泳分离的凝胶内蛋白质试剂、试剂盒乙酸显影液固定液甲醇硫酸银水溶液终止反应液仪器、耗材塑料皿摇床实验步骤1.将凝胶放在塑料皿中（用一次性的塑料皿或者彻底洗过的塑料皿），加入足量的固定液以覆盖凝胶。固定 20 min, 并轻轻摇动。2.弃掉固定液，加人足量的 50% 甲醇覆盖胶，轻轻摇动
蛋白质凝胶染色法实验（二）
关键步骤通常如下所述。(1) 固定凝胶，以固定蛋白质条带，并移除凝胶中的干扰物质, 如 S D S 、缓冲液和盐，这些物质会结合银并造成背景染色。(2) 用能够结合蛋白质并提高银结合能力的物质, 或是能够干扰剩余未结合的银造成的背景染色的物质来孵育凝胶。总之，这些各种各样的方法都和敏化作用有关。(3
蛋白质凝胶染色法实验
实验步骤总蛋白质的检测1. 总蛋白质色度法染色简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群，使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度，那么银染法是可选择的色度方法。如果需要对切下的蛋白质进行质谱分析，则首选不会引入共价蛋白
鞭毛染色实验——硝酸银染色法
细菌的鞭毛很纤细，其直径通常为 0.01 ~0.02 μm， 所以，除了很少数能形成鞭毛束（由多根鞭毛构成）的细圈可以用相差显微镜直接观察到鞭毛束的存在外，一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到，而只能用电子显微镜观察。要用普通光学显微镜观察细菌的鞭毛，必须用鞭毛染色法。鞭毛染色方法很多，本实验
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I，其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁，因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I，其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁，因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活性。实验材料 HL-60细胞HeLa细胞试剂、试剂盒 Carnoy固定液HCl甲酸AgNO3蛋白胶硫代硫酸钠戊二醛乙醇丙酮醋酸铀柠檬酸铅染液仪器、耗材
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
近年来发现，虽然人的端着丝粒染色体短臂是28S、18S、和5.8S rRNA基因存在部位，称核仁形成区，但银染的物质不是rDNA和rRNA，而是与活性的rDNA转录有关的一类酸性蛋白质，容易将Ag离子还原为Ag的颗粒，从而在核仁形成区镀上银、呈棕黑色，称为银染核仁形成区。实验方法原理生化和免疫化学研
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I，其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁，因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活
蛋白质凝胶染色法实验
实验步骤 总蛋白质的检测 1. 总蛋白质色度法染色 简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群，使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度，那么银