细胞凋亡的形态:生化性质实验——吖啶橙或溴化乙锭染色

实验材料细胞试剂、试剂盒染液仪器、耗材试管实验步骤1c)将1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃试管的底部。加入25μL细胞悬浮液,用手腕轻柔地混合。2c)将10μL的该混合液放在一干净的显微镜载玻片上,盖上22 mm2的盖玻片。用一 落射光显微镜的40×到60×的干物镜和一适合观察荧光素的滤光片结合起来检查。3c)计数至少200个细胞,记录以下四个细胞状态的每一个数值:①有正常核的活细胞 (VN;有结构的亮绿色染色质);②有凋亡核的活细胞(VA;高浓缩或碎片化的亮 绿染色质);③正常核的死细胞(NVN;有结构的亮橙色染色质);④有凋亡核的死细胞(NVA;高浓缩或碎片化的亮橙色染色质)。溴化乙锭只能染死细胞。它插入DNA,使DNA呈现橙色;与RNA的结合很弱,呈现出微红色。因此死细胞有明亮橙色的染色质(溴化乙锭远超过吖啶橙),而且,它的细胞质如果有任何残留,就会呈现深红色。4c)计算凋亡细胞的百分比(凋亡指数)和坏死......阅读全文

细胞凋亡的形态:生化性质实验——吖啶橙或溴化乙锭染色

实验材料细胞试剂、试剂盒染液仪器、耗材试管实验步骤1c)将1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃试管的底部。加入25μL细胞悬浮液,用手腕轻柔地混合。2c)将10μL的该混合液放在一干净的显微镜载玻片上,盖上22 mm2的盖玻片。用一 落射光显微镜的40×到60×的干物镜和一适合观察荧光

细胞凋亡的形态:生化性质实验——吖啶橙染色

实验材料细胞试剂、试剂盒染液仪器、耗材试管实验步骤1b)将1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃试管的底部。加入25μL细胞悬浮液,转动手腕轻柔地混合。2b)将10μL的该混合液放在一干净的显微镜载玻片上,盖上22 mm2的盖玻片。用一 落射光显微镜的40×到60×的干物镜和一适合观察荧

细胞凋亡的形态:生化性质实验——台盼蓝染色

实验方法原理实验材料细胞试剂、试剂盒染料混合物:0.01%台盼蓝l00μg ml吖啶橙或 100μg ml吖啶橙+100 μg ml溴化乙锭所有试剂都在PBS中制备约5×105〜5×106细胞 ml的细胞悬浮液在完全的RMPI 1640培养基仪器、耗材12 mm×75 mm的玻璃试管显微镜载玻片和2

细胞凋亡的形态:生化性质实验

实验方法原理 实验材料 细胞试剂、试剂盒 染料混合物:0.01%台盼蓝l00μg ml吖啶橙或 100μg ml吖啶橙+100 μg ml溴化乙锭所有试剂都在PBS中制备约5×105〜5×106细胞 ml的细胞悬浮液在完全的RMPI 1640培养基仪器、耗材 12 mm×75 mm的玻璃试管显微镜载

细胞凋亡的形态:生化性质实验

使用活体荧光染料的显微镜定量凋亡指数和细胞活力(台盼蓝染色) 吖啶橙染色 吖啶橙或溴化乙锭染色             实验方法原理

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色

AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅

细胞凋亡检测实验——细胞凋亡的形态学检测

实验方法原理根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。仪器、耗材光学显微镜倒置显微镜荧光显微镜共聚焦激光扫描显微镜透射电子显微镜实验步骤一、光学显微镜和倒置显微镜1.  未染色细胞凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞

培养细胞的染色实验——吖啶橙染色荧光观察法

实验方法原理吖啶橙(Acridine Oringe:AO)是一种常用荧光染料,用于直接染色观察活细胞或固定染色观察细胞均可。吖啶橙对DNA和RNA都能染色,快速、简便和有一定的特异性。吖啶橙对活细胞毒性小,配成2×10-4~1×10-4 可用于直接染色观察法更好。实验材料细胞试剂、试剂盒酒精PBSC

吖啶橙的基本信息介绍

  简称:AO  AO能与无机酸形成盐,具有绿色荧光。如果再稀释的话,便水解成游离的AO,而呈现紫色荧光。  吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色测定PC12细胞凋亡(acridine orange/ethidium bromide, AO/EB):  (1)细胞爬片:在6孔培养板中预先置入玻璃盖玻片,接种细

AOEB双染试剂盒说明书

产品简介:吖啶橙能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,与双链DNA结合后发出绿色荧光,溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者很容易判别。在荧光显微

凋亡细胞形态变化

细胞凋亡在形态学上分为三个阶段:1.凋亡的起始:细胞表面完整,未失去选择通透性;细胞质中,线粒体大体完整,内质网囊腔膨胀;细胞核内染色质固缩;2.凋亡小体形成:细胞核染色质断裂成大小不等的片段,与细胞器聚集在一起,形成凋亡小体。细胞表面发泡,产生许多泡状或芽状突起,形成单个的凋亡小体;3.凋亡小体逐

细胞死亡的形态学评价实验

光学及荧光显微术             实验材料 细胞悬液 试剂、试剂盒

细胞死亡的形态学评价实验

光学及荧光显微术             实验材料 细胞悬液 试剂、试剂盒

细胞死亡的形态学评价实验_光学及荧光显微术

实验材料细胞悬液试剂、试剂盒LenkostatHoechst 33258吖啶橙 溴化乙锭仪器、耗材光学显微镜荧光显微镜实验步骤一、旋转细胞制备的 Lenkostat 染色1. 在转瓶小室中加入 100 μl 细胞悬液,500 r/min 离心 2 分钟。载玻片风干至少 5 分钟。2. 在 Lenko

细胞凋亡的染色观察

细胞凋亡1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台

细胞凋亡的染色观察

细胞凋亡 1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、

细胞凋亡检测实验——形态学检测法

细胞凋亡检测可应用于:(1)肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究;(2)临床诊疗,新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗;(3)对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价具有举足轻重的地位。实验方法原理根据凋亡细胞固有的形态特征,使用合适的显微镜检测凋亡细胞形态变化。

吖啶橙荧光染色

【临床意义】  红细胞系统细胞核发深绿色荧光。原始红细胞有时可看到粉红色核仁。粒细胞系统细胞核发黄绿色荧光。原始粒细胞有时也可看到粉红色的核仁。但嗜酸性粒细胞的细胞核发深绿色荧光,比红细胞系统还要深一些。  淋巴细胞核的荧光稍带灰绿色。  各系统细胞的胞浆内因含有核糖核酸(RNA),所以均发红色荧光

细胞凋亡的观察生化检验

细胞凋亡的观察:1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、

细胞凋亡的观察生化检验

细胞凋亡的观察:1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、

细胞凋亡的观察生化检验

细胞凋亡的观察: 1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染色:如果细胞膜

吖啶橙的理化性质

密度:1.169g/cm3熔点:165ºC沸点:468.6ºC闪点:237.2ºC折射率:1.71外观:棕色粉末

细胞凋亡的形态学检测

根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1.光学显微镜和倒置显微镜1. 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。2. 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化

细胞凋亡的形态学检测

根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1、光学显微镜和倒置显微镜(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边

细胞凋亡的形态学变化

形态学观察细胞凋亡的变化是多阶段的,细胞凋亡往往涉及单个细胞,即便是一小部分细胞也是非同步发生的。首先出现的是细胞体积缩小,连接消失,与周围的细胞脱离,然后是细胞质密度增加,线粒体膜电位消失,通透性改变,释放细胞色素C到胞浆,核质浓缩,核膜核仁破碎,DNA降解成为约180bp-200bp片段;胞膜有

细胞凋亡的形态学变化

形态学观察细胞凋亡的变化是多阶段的,细胞凋亡往往涉及单个细胞,即便是一小部分细胞也是非同步发生的。首先出现的是细胞体积缩小,连接消失,与周围的细胞脱离,然后是细胞质密度增加,线粒体膜电位消失,通透性改变,释放细胞色素C到胞浆,核质浓缩,核膜核仁破碎,DNA降解成为约180bp-200bp片段;胞膜有

细胞凋亡的形态学变化

形态学观察细胞凋亡的变化是多阶段的,细胞凋亡往往涉及单个细胞,即便是一小部分细胞也是非同步发生的。首先出现的是细胞体积缩小,连接消失,与周围的细胞脱离,然后是细胞质密度增加,线粒体膜电位消失,通透性改变,释放细胞色素C到胞浆,核质浓缩,核膜核仁破碎,DNA降解成为约180bp-200bp片段;胞膜有

细胞凋亡的形态学检测

根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1.光学显微镜和倒置显微镜1. 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。2. 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化

细胞凋亡的形态学观察

细胞凋亡(apoptosis)的命名主要是根据某些单个细胞死亡时细胞碎裂如花瓣或树叶散落般的形态学特征。目前对细胞凋亡的认识正不断得到深化,检测凋亡细胞的方法也逐渐增多,但形态改变仍是确定细胞凋亡的最可靠的方法。一、光学显微镜观察凋亡细胞的主要特征为核染色质致密深染,形成致密质块,有时可碎裂。在HE

细胞凋亡的形态学观察

细胞凋亡(apoptosis)的命名主要是根据某些单个细胞死亡时细胞碎裂如花瓣或树叶散落般的形态学特征。目前对细胞凋亡的认识正不断得到深化,检测凋亡细胞的方法也逐渐增多,但形态改变仍是确定细胞凋亡的最可靠的方法。一、光学显微镜观察凋亡细胞的主要特征为核染色质致密深染,形成致密质块,有时可碎裂。在HE