细胞死亡的形态学评价实验_光学及荧光显微术
实验材料细胞悬液试剂、试剂盒LenkostatHoechst 33258吖啶橙 溴化乙锭仪器、耗材光学显微镜荧光显微镜实验步骤一、旋转细胞制备的 Lenkostat 染色1. 在转瓶小室中加入 100 μl 细胞悬液,500 r/min 离心 2 分钟。载玻片风干至少 5 分钟。2. 在 Lenkostat 固定液中固定细胞 10 秒:2 mg/ml 孔雀石绿溶于 100% 甲醇。可滴去。3. 载玻片在 Lenkostat 溶液 1 中浸 10 秒钟使细胞质染色:0.1% 依红;0.1% 甲醛;0.4% 磷酸氢二钠;0.5% 磷酸二氢钾。可用纸巾吸干。4. 载玻片在 Lenkostat 溶液 2 中浸 10 秒复染细胞质:0.04% 亚甲蓝;0.04% 天青 A;0.4% 磷酸氢二钠;0.5% 磷酸二氢钾。冲去多余染料,风干载玻片。5. 在光学显微镜下观察确定是否获得了所需染色。如是,可用 Pemount 制作载玻片标本。6. ......阅读全文
细胞死亡的形态学评价实验_光学及荧光显微术
实验材料细胞悬液试剂、试剂盒LenkostatHoechst 33258吖啶橙 溴化乙锭仪器、耗材光学显微镜荧光显微镜实验步骤一、旋转细胞制备的 Lenkostat 染色1. 在转瓶小室中加入 100 μl 细胞悬液,500 r/min 离心 2 分钟。载玻片风干至少 5 分钟。2. 在 Lenko
细胞死亡的形态学评价实验
光学及荧光显微术 实验材料 细胞悬液 试剂、试剂盒
细胞死亡的形态学评价实验
光学及荧光显微术 实验材料 细胞悬液 试剂、试剂盒
什么是光学显微术?
中文名称光学显微术英文名称optical microscopy定 义用光作照明工具的显微术。应用学科机械工程(一级学科),光学仪器(二级学科),显微镜-显微镜一般名词(三级学科)
光学显微术的技术特点
中文名称光学显微术英文名称optical microscopy定 义用光作照明工具的显微术。应用学科机械工程(一级学科),光学仪器(二级学科),显微镜-显微镜一般名词(三级学科)
荧光显微术原理
在一百年前,斯托克(STOKES)发现自然界有许多物质能在较短波长光线照射下,发出较长波长的光线,也即这些物质在被紫外光、紫光、兰光或绿光照射后,能激发出兰色、绿色、黄色或红色的荧光,叫做光致荧光,于是在1911 年奥地利科学家K.Reichert*次制成有实用价值的荧光显微镜,采用碳弧灯作激发光源
显微荧光光度术
显微荧光光度术(microfluorometry),利用显微分光光度计对细胞内原有能发光的物质或对细胞内各种化学成分用不同的荧光经荧光探针标记后进行定位、定性和定量地测定,称为显微荧光光度术, 也称细胞荧光光度术(cytofluorometry)。它是一种微观而灵敏的方法,对于研究细胞的结构、功能及
徕卡荧光显微镜的荧光显微术的特点
荧光显微术是普通显微术的重大发展。它具有独特的优越性。荧光显微术是在黑暗的背景下观察标本的彩色图像,有良好的反衬,故观察清楚、方便,易于鉴别,眼睛也不易疲劳。由于荧光染色素的浓度极稀(仪1:100000)便能发出明亮的荧光,因此一般油机体众说是无毒的,为活体观察,如研究功能器官的过程和细微结构,某些
关于流式细胞术实验的室间质量评价
开展内部的质量控制使实验的受控项目达到一定的精密度。临床上往往只对实验结果是否可重复较敏感,若实验结果存在较稳定的系统误差,临床和实验室一般不易察觉,因此内部的质量控制还在于控制结果的不精密度。由专门机构定期向临床实验室分发质控品,要求各单位检测后返回测定结果,经过整理和统计,以数据和报告形式反
荧光镜检术荧光显微镜
荧光镜检术-荧光显微镜荧光镜检术是用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体,使之受激发后而产生长波长的荧光,然后观察。荧光镜检术广泛应用于生物,医学等领域。1.荧光镜检术一般分为透射和落射式两种类型。(1)透射式:激发光来自被检物体的下方,聚光镜为暗视野聚光镜,使激发光不进入物镜,而使荧光进入物镜
光学显微镜检测肿瘤细胞形态实验
光学显微镜检测肿瘤细胞形态可以:(1)辅助判断肿瘤细胞是否凋亡;(2)用于病理检查;(3)提取肿瘤细胞微细结构信息。实验方法瑞氏-吉姆萨混染法HE染色法实验方法原理吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。 1)嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物
光学显微镜检测肿瘤细胞形态实验
瑞氏-吉姆萨混染法 HE染色法 实验方法原理 吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。 1)嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与
光学显微镜检测肿瘤细胞形态实验
光学显微镜检测肿瘤细胞形态可以:(1)辅助判断肿瘤细胞是否凋亡;(2)用于病理检查;(3)提取肿瘤细胞微细结构信息。吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。 1)嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;2)细胞核蛋白和淋巴细胞 胞浆为酸性,与碱性
光学显微镜检测肿瘤细胞形态实验
瑞氏-吉姆萨混染法 HE染色法 实验方法原理 吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。 1)嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与
光学显微镜检测肿瘤细胞形态实验
实验方法原理 吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。1)嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;2)细胞核蛋白和淋巴细胞 胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;3)中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为
显微荧光光度术的功能介绍
显微荧光光度术(microfluorometry),利用显微分光光度计对细胞内原有能发光的物质或对细胞内各种化学成分用不同的荧光经荧光探针标记后进行定位、定性和定量地测定,称为显微荧光光度术, 也称细胞荧光光度术(cytofluorometry)。它是一种微观而灵敏的方法,对于研究细胞的结构、功能及
光学显微镜成像光路系统的调整及显微镜检术概要
成像光路系统的调整及显微镜检术概要显微镜成像光路系统的调整,是根据不同显微镜检术的需要而进行的。所谓显微镜检术(microscopy),概括而言就是以显微镜观察样品时所使用的照明方法,以及如何使样品所成的像能获得更良好反差的技术与方法。以下简述显微镜检术中已成熟的几种方法及对应的显微镜成像光路系统的
荧光显微镜的光学元件
荧光显微镜的光学元件,大都果用普通光学玻璃制造。它们对30 A以上的长波紫外线和可见光能很好地透过,因此完全能满足——殷荧光显微术的要求,只是在个别情况下,当标本必须用短波紫外线激发时,才需用石英玻璃或特种玻璃的聚光镜和反射执这时残破片也必须是特制晰但在进射光显檄术时,物镜和目镜只需用普通光学玻璃即
显微镜形态学观察细胞凋亡
显微镜检测法 实验方法原理 细胞凋亡发生时会出现一定的形态学特征,如胞膜有小泡生成,细胞固缩,核质浓缩,染色质凝聚,DNA降解,胞膜最终形成许多凋亡小体,然后
显微镜形态学观察细胞凋亡
显微镜检测法 实验方法原理 细胞凋亡发生时会出现一定的形态学特征,如胞膜有小泡生成,细胞固缩,核质浓缩,染色质凝聚,DNA降解,胞膜最终形成许多凋亡小体,然后
光学显微镜之荧光观察
荧光现象荧光是指荧光物质在特定波长光照射下,几乎同时发射出波长更长光的过程(图1)。当特定波长(激发波长)的光照射一个分子(如荧光团中的分子)时,光子能量被该分子的电子吸收。接着,电子从基态(S0)跃迁至较高的能级,即激发态(S1’)。这个过程称为激发①。电子在激发态停留10-9–10-8秒,在此过
显微镜形态学观察细胞凋亡
实验方法原理细胞凋亡发生时会出现一定的形态学特征,如胞膜有小泡生成,细胞固缩,核质浓缩,染色质凝聚,DNA降解,胞膜最终形成许多凋亡小体,然后被邻近的巨噬细胞所吞噬。实验材料Hela细胞Jurkat细胞试剂、试剂盒蒸馏水盼蓝仪器、耗材光学显微镜倒置显微镜荧光显微镜共聚焦激光扫描显微镜透射电子显微镜实
显微镜形态学观察细胞凋亡——显微镜检测法
用透射电镜观察细胞凋亡可以用于:(1)可清楚地观察到细胞结构在凋亡不同时期的变化;(2)电镜形态学观察是迄今为止判断凋亡最经典、最可靠的方法, 被认为是确定细胞凋亡的金标准。实验方法原理细胞凋亡发生时会出现一定的形态学特征,如胞膜有小泡生成,细胞固缩,核质浓缩,染色质凝聚,DNA降解,胞膜最终形成许
xCELLigence系统实时检测神经毒性(二)
1.5 荧光与光学显微镜 在PEI包被 IbiTreat µ-Slide 8-孔反应板(德国Munich,Ibidi) 上培养皮质神经元细胞,培养 6 天。然后,将培养细胞固定于 +4°C 磷酸缓冲液(PBS)(pH 7.4) 多聚甲醛中。使用 0.2% Triton X-100/PBS
关于光学显微镜成像光路系统的调整及显微镜检术概要
显微镜成像光路系统的调整,是根据不同显微镜检术的需要而进行的。所谓显微镜检术(microscopy),概括而言就是以显微镜观察样品时所使用的照明方法,以及如何使样品所成的像能获得更良好反差的技术与方法。以下简述显微镜检术中已成熟的几种方法及对应的显微镜成像光路系统的调整方法。 1.透射光明视野
凋亡中线粒体功能评价实验_△ψm的流式细胞计量术分析
实验材料细胞试剂、试剂盒CMXRos 荧光染料PBS实验步骤1. 按“△ψm 的显微分析” 用 CMXRos 荧光染料培养约 5X105 细胞。2. 用 pH 7.2 的 PBS 将细胞洗 2 次,在水平摇床上用 4% 甲醛-PBS 溶液室温温育细胞沉淀 15 分钟,用以固定。固定细胞在进行流式细胞
光学显微镜的光学原理及配件
光学原理 显微镜是利用凸透镜的放大成像原理,将人眼不能分辨的微小物体放大到人眼能分辨的尺寸,其主要是增大近处微小物体对眼睛的张角(视角大的物体在视网膜上成像大),用角放大率M表示它们的放大本领。因同一件物体对眼睛的张角与物体离眼睛的距离有关,所以一般规定像离眼睛距离为25厘米(明视距离)处的放
光学显微镜的光学原理及配件
光学原理 显微镜是利用凸透镜的放大成像原理,将人眼不能分辨的微小物体放大到人眼能分辨的尺寸,其主要是增大近处微小物体对眼睛的张角(视角大的物体在视网膜上成像大),用角放大率M表示它们的放大本领。因同一件物体对眼睛的张角与物体离眼睛的距离有关,所以一般规定像离眼睛距离为25厘米(明视距离)处的放
荧光显微镜与光学显微镜的区别
荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别:1.照明方式通常为落射式,即光源通过物镜投射于样品上;2.光源为紫外光,波长较短,分辨力高于普通显微镜;3.有两个特殊的滤光片,光源前的用以滤除可见光,目镜和物镜之间的用于滤除紫外线,用以保护人目。荧光显微镜也是光学显微镜的一种,主要的区别是二者的激发波长不同。由
荧光显微镜与光学显微镜的区别
荧光显微镜与光学显微镜的区别荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别:1.照明方式通常为落射式,即光源通过物镜投射于样品上;2.光源为紫外光,波长较短,分辨力高于普通显微镜;3.有两个特殊的滤光片,光源前的用以滤除可见光,目镜和物镜之间的用于滤除紫外线,用以保护人目。荧光显微镜也是光学显微镜的一种,主要的