放射自显影原位杂交玻片的压片固定实验_姆萨染色

实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒吉姆萨染色液(Fisher)710 mmol L磷酸钠缓冲液pH 6.8 (500 mmol L原液按1:50稀释)50%、70%、95% 和100% 乙醇、二甲苯封片介质为Permount (Fisher)或 Gelvatol (现称 Airvol来自Air Productsand Chemicals)仪器、耗材玻璃染色盘13个平头镊Whatman 3 MM 滤纸条42℃温箱实验步骤1) 将显影的玻片置于玻片架上,浸入盛有水的染色盘中。2) 在染色盘中,准备以下各组液体:1个盘:用pH 6.8 10 mmol/L磷酸钠缓冲液配制的25倍稀释的吉姆萨染液;3个盘:水。脱水系列溶液(可重复使用):3个盘:分别盛50%、70%和95%乙醇;2个盘:盛有100%乙醇;3个盘:盛有二甲苯。3) 在25倍稀释的吉姆萨染液中染玻片20 s (依染色时间决定染色的强弱)。将玻片在水中浸泡3次,每次2......阅读全文

体内哺乳动物骨髓细胞微核试验1

1范围本规范规定了哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验的基本原则、要求和方法。本规范适用于化妆品原料的染色体畸变检测。2规范性引用文件GB 14924实验动物与饲料标准OECD Guidelines for Testing of Chemicals(No.481,Adopted:21,July 1997

植物根尖压片实验

实验方法原理 有丝分裂是植物细胞分裂,体细胞增殖的主要方式,在有丝分裂过程中,细胞核内染色体准确地复制,并有规律地,均匀地分配到两个子细胞中,使子细胞和母细胞具有同样数目和形态结构的染色体,保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中,如根尖组织,茎尖组织,居间分生组织,愈伤组织等,细胞

植物根尖压片实验

实验方法原理有丝分裂是植物细胞分裂,体细胞增殖的主要方式,在有丝分裂过程中,细胞核内染色体准确地复制,并有规律地,均匀地分配到两个子细胞中,使子细胞和母细胞具有同样数目和形态结构的染色体,保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中,如根尖组织,茎尖组织,居间分生组织,愈伤组织等,细胞常

概述巨细胞病毒的诊断方法

  唾液、尿液、子宫颈分泌液等标本离心沉淀,将脱落细胞用姬姆萨染色镜检,检查巨大细胞及核内和浆内嗜酸性包涵体,可作初步诊断。  分离培养可将标本接种于人胚肺纤维母细胞中,由于CMV生长周期长,细胞病变出现慢,为了快速诊断,可将培养24小时的感染细胞固定,用DNA探针进行原位杂交,检测CMV DNA。

骨髓有核细胞总数的检查过程

  检查方法:骨髓检查。  检查过程:  (1) 选择穿刺部位。  (2) 麻醉。  (3) 固定穿刺针长度。  (4) 医生左手拇指和示指固定穿刺部位,右手持骨髓穿刺针与骨面垂直刺入,若为胸骨穿刺则应与骨面成30o-40o角刺入。当穿刺针针尖接触骨质后,沿穿刺针的针体长轴左右旋转穿刺针,并向前推进

人类巴氏小体的观察

一、目的 1,掌握人类x小体(巴氏小体)玻片标本制作方法 2,观察识别巴氏小体形态特征及所在部位, 鉴定个体的性别。 二、原理 巴氏小体又称X小体:正常女性,位于间期细胞核中,紧贴核膜内缘,大小约1~1.5 um,呈现三角或椭圆形小体,数量为x染色体数减一。巴氏小体是由于女性两个X染色体中的一个失活

洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验_压片法

实验方法原理有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中,细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。 分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中

洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验

实验方法原理 有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中,细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中

吞噬功能实验_小鼠巨噬细胞吞噬功能测定

实验材料小鼠试剂、试剂盒生理盐水淀粉溶液鸡红细胞肝素瑞士-姬姆萨染液仪器、耗材注射器毛细管显微镜离心机实验步骤一、操作过程小鼠腹腔注射10 g/L 淀粉溶液2 ml↓ 24 h 后,小鼠腹腔注射2%鸡红细胞1 ml↓30 min 后,小鼠脱臼处死,腹腔内注射0.2 ml 肝素注射液,揉动腹部↓毛细管

淋巴细胞转化实验1

[实验原理] T淋巴细胞表面具有植物血凝素(PHA)和刀豆蛋白(ConA)等非特异性有丝分裂原受体,在体内或体外遇到有丝分裂原刺激后,可转化为淋巴母细胞,依其细胞转化程度可测定T细胞的应答功能,称为淋巴细胞转化试验。 淋巴母细胞的主要特点: (1)形态学改变:细胞体积明显增大

玻片凝集实验的方法

人类ABO 血型鉴定试验(玻片法)1.原理人类ABO血型抗原有A和B两种。A型红细胞膜上有A抗原,B型红细胞上有B抗原,AB型有A和B两种抗原,而O型则不含有A和B抗原。据此,如分别将抗A和抗B血清与待测红细胞混合,抗A和/或抗B血清与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集,根据其凝集状况便可判

吉姆萨染色法知识点

吉姆萨染色对细胞核和寄生虫着色较好。原理:同瑞氏染色。染液组成:天青、伊红、甲醇、纯甘油。记忆方法:血红蛋白,嗜酸性颗粒(碱性蛋白质):具有嗜酸性——伊红结合;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质(酸性蛋白质):具有嗜碱性——亚甲蓝结合。

原代悬浮细胞吉姆萨染色法

原代悬浮细胞吉姆萨染色法涂片法:1. 用含有5%—10%血清的等渗液将培养的细胞调制成密度为106个/ml的细胞悬液;2. 将1滴细胞悬液滴于一张载玻片的一端,用另一块干净的载玻片,按照血液涂片法将细胞铺展于载玻片上;3. 载玻片在空气中干燥后,再用甲醇固定;4. 对涂有细胞的载玻片进行染色;5.

原代悬浮细胞吉姆萨染色法

原代悬浮细胞吉姆萨染色法涂片法:1. 用含有5%—10%血清的等渗液将培养的细胞调制成密度为106个/ml的细胞悬液;2. 将1滴细胞悬液滴于一张载玻片的一端,用另一块干净的载玻片,按照血液涂片法将细胞铺展于载玻片上;3. 载玻片在空气中干燥后,再用甲醇固定;4. 对涂有细胞的载玻片进行染色;5.

骨髓有核细胞总数的注意事项及检查过程

  注意事项  不适合做检查的人群:血友病及弥漫性血管内凝血,如无特殊需要,勿作骨髓穿刺检查。  术前准备:病人按照医生吩咐摆好体位。  检查过程  检查方法:骨髓检查。  检查过程:  (1) 选择穿刺部位。  (2) 麻醉。  (3) 固定穿刺针长度。  (4) 医生左手拇指和示指固定穿刺部位,

石蜡切片或细胞的原位杂交实验

细胞RNA的原位杂交实验用于在混杂的细胞群体和组织中、定位特异的mRNA在细胞中的存在位置。实验材料石蜡切片试剂、试剂盒HCl二甲苯乙醇SSCPBS链霉蛋白酶甘氨酸DTTRNA酶消化液乙酸铵仪器、耗材染色盘加湿盒载玻片烘箱水浴锅培养箱实验步骤1.  准备脱蜡/再水化系统(可重复使用数次)及0.2 m

LSCM细胞固定和染色

细胞固定和染色除了上述使用多聚甲醛固定细胞的方法外,还有一种普遍使用的方法是:培养细胞在 - 20 °C 预冷的甲醇中孵育 5 min。但这种方法对于固定表达荧光蛋白的细胞及 FRET 实验中并不推荐。这是因为:这种处理方法是沉淀细胞内的蛋白,而不是使蛋白质发生交联。此外,为了尽可能减少抗体的用量,

细胞、细胞器及组分的分离与观察2

细胞器标记酶的测定是评价细胞器内膜组分和分离纯度的主要依据,如线粒体内膜上分布有细胞色素氧化酶,该酶使詹纳斯绿B染料保持在氧化状态呈现蓝绿色,从而使线粒体显色,而胞质中的染料被还原成无色。詹纳斯绿B是一种活体染料,能对动植物的细胞或组织在活体状态下进行无毒害的染色。由于染料(碱性染料)的胶粒表面带有

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基...(二)

3.2 染色体制备无论是荧光染色还是 FISH,分裂期和分裂间期的染色体制备均于载物片上进行。建议使用蛋白水解酶对材料进行预处理,以去除细胞壁和细胞质,再将样品置于载玻片上,滴上乙酸,然后盖上玻片压片。所有操作均于室温下进行,除非是特殊说明。在洗涤和材料准备时使用小培养皿,方法见 2. 2 节。(

水稻根尖染色体标本制备

1.取材: 选取水稻种子,充分浸种后,将它们摆在铺有滤纸的培养皿内,在约28℃条件下发芽培养,当胚根长至1~1.5cm时,剪下备用。2.预处理 压片法:采用0.1%秋水仙素处理2h左右去壁低渗法可采用以下四种方法处理处理方法 0.002mol/L8-羟基喹啉 α-溴萘饱和溶液 低温(-4℃) 卡诺氏

植物细胞周期观察

一、实验目的1.学会植物细胞、组织的固定、离析和压片方法,了解并初步掌握制作临时玻片和永久玻片的方法。2.观察有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化过程,着重了解分裂期内中、后期染色体变化的特征。二、实验原理植物根尖分生组织的细胞,依一定的程序有规律地进行着有丝分裂过程,植物种类不同,细胞周期所需

骨髓红细胞系统的检查过程

  检查方法:骨髓检查  检查过程:  (1) 选择穿刺部位  (2) 麻醉  (3) 固定穿刺针长度  (4) 医生左手拇指和示指固定穿刺部位,右手持骨髓穿刺针与骨面垂直刺入,若为胸骨穿刺则应与骨面成30°-40°角刺入。当穿刺针针尖接触骨质后,沿穿刺针的针体长轴左右旋转穿刺针,并向前推进,缓缓刺

骨髓单核细胞系统的检查过程

  检查方法:骨髓检查  检查过程:  (1) 选择穿刺部位  (2) 麻醉  (3) 固定穿刺针长度  (4) 医生左手拇指和示指固定穿刺部位,右手持骨髓穿刺针与骨面垂直刺入,若为胸骨穿刺则应与骨面成30o-40o角刺入。当穿刺针针尖接触骨质后,沿穿刺针的针体长轴左右旋转穿刺针,并向前推进,缓缓刺

如何制作动物染色体标本

 细胞处于活跃的增值状态或者通过人工的各种处理后,细胞进入分裂的动物组织科用于染色体的分析。由于在正常的动物骨髓内,细胞是处于不断分裂的,给其注射一定的秋水仙碱可以让许多细胞处于分裂的细胞停在细胞分裂中期,然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可分析的染色体标本。    实验用品  一、 材

细胞分裂的形态观察实验——减数分裂

实验方法原理减数分裂(Meiosis)是配子发生过程中的一种特殊有丝分裂,即染色体复制一次,而细胞连续分裂两次,结果使染色体数日减半的过程。减数分裂过程中体现了遗传三定律,所以说减数分裂在稳定种的遗传性状和繁殖中均起着重要作用。实验材料蝗虫试剂、试剂盒Carnoy固定液乙醇醋酸洋红染液醋酸二甲苯仪器

关于吉姆萨染色的基本信息介绍

  吉姆萨染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但该法对细胞核和寄生虫着色较好,结构显示更清晰,而胞质和中性颗粒则着色较差。为兼顾二者之长,可用复合染色法。即以稀释吉姆萨液代替缓冲液,按瑞特染色法染10min.或先用瑞特染色法染色后,再用稀释吉姆萨复染。  吉姆萨染色由天青,伊红组成。染色原理和结果与

关于中性杆状核粒细胞数的医学检查介绍

  1、检查名称  中性杆状核粒细胞数  2、分类  临床血液检查 > 白细胞  3、取材  血液  4、测定原理  血液在载玻片上推成均匀分布的细胞涂片,用复合染色剂使各种细胞的不同结构能区别着色,在显微镜下计数各类细胞的百分率即简称为白分。  5、试剂  下述瑞氏-姬姆萨复合试剂或快速染液可任选

植物花粉母细胞减数分裂制片实验

实验方法原理:减数分裂是生物在性母细胞成熟形成配子过程中发生的一种特殊有丝分裂,它包括连续两次的细胞分裂,第一次分裂是减数的,第二次是等数的。第一次分裂的前期较长,染色体变化较复杂,可细分为5个时期,即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。染色体在减数分裂的行为对遗传物质的分配和重组产生重大影响。

植物花粉母细胞减数分裂制片实验

实验方法原理 减数分裂是生物在性母细胞成熟形成配子过程中发生的一种特殊有丝分裂,它包括连续两次的细胞分裂,第一次分裂是减数的,第二次是等数的。第一次分裂的前期较长,染色体变化较复杂,可细分为5个时期,即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。染色体在减数分裂的行为对遗传物质的分配和重组产生重大影响。

植物花粉母细胞减数分裂制片实验

实验方法原理减数分裂是生物在性母细胞成熟形成配子过程中发生的一种特殊有丝分裂,它包括连续两次的细胞分裂,第一次分裂是减数的,第二次是等数的。第一次分裂的前期较长,染色体变化较复杂,可细分为5个时期,即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。染色体在减数分裂的行为对遗传物质的分配和重组产生重大影响。高