放射自显影原位杂交玻片的压片固定实验_姆萨染色
实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒吉姆萨染色液（Fisher)710 mmol L磷酸钠缓冲液pH 6.8 (500 mmol L原液按1:50稀释）50%、70%、95% 和100% 乙醇、二甲苯封片介质为Permount (Fisher)或 Gelvatol (现称 Airvol来自Air Productsand Chemicals)仪器、耗材玻璃染色盘13个平头镊Whatman 3 MM 滤纸条42℃温箱实验步骤1) 将显影的玻片置于玻片架上，浸入盛有水的染色盘中。2) 在染色盘中，准备以下各组液体：1个盘：用pH 6.8 10 mmol/L磷酸钠缓冲液配制的25倍稀释的吉姆萨染液；3个盘：水。脱水系列溶液（可重复使用）：3个盘：分别盛50%、70%和95%乙醇；2个盘：盛有100%乙醇；3个盘：盛有二甲苯。3) 在25倍稀释的吉姆萨染液中染玻片20 s (依染色时间决定染色的强弱）。将玻片在水中浸泡3次，每次2......阅读全文
方案27.8－原位杂交中的放射自显影技术
实验方法原理将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交，然后通过放射自显影将杂交位点显影。实验材料糖原琼脂糖二硫苏糖醇二硫苏糖醇试剂、试剂盒焦碳酸二乙酯DEPC-水酚-氯仿-异戊醇乙酸钠无水乙醇层析柱流动相缓冲液苯酚氯仿-界戊醇闪烁液组织洗涤液NaCl-DEPCEDTA蛋白酶K缓冲液蛋白酶
方案27.8－原位杂交中的放射自显影技术
实验方法原理 将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交，然后通过放射自显影将杂交位点显影。 实验材料 糖原 琼脂糖
酸性磷酸酶的显示方法（Comori法）
一、实验目的1. 掌握Comori 法的基本原理和方法。2. 观察酸性磷酸酶在细胞内的分布状况。二、实验原理酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基，在PH5.0 的环境中，磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的，所以再经过与硫化铵作用，形成棕黑色的硫化铅沉淀，由此就能显示酸性璃酸酶在细胞内的存在
血细胞染色—吉姆萨染色法
吉姆萨（Giemsa）染色法吉姆萨染液由天青，伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为
原位杂交组织化学实验技术3
（四）杂交后处理（post hybridisation treatment） 杂交后处理包括系列不同浓度，不同温度的盐溶液的漂洗。在原位杂交组织化学的实验程序中，这也是一个重要的环节 。特别因为大多数的原位杂交实验是在低严格度条件下进行的，非特异性的探针片段粘附在组织切片上，从而增强了背景染色。R
酸性磷酸酶的显示方法
实验概要酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基。在pH5.0的环境中，磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的，所以再经过与硫化铵作用，形成棕黑色的硫化铅沉淀，由此就能显示酸性磷酸酶在细胞内的存在与分布。主要试剂10％中性福尔马林(pH6.8～7.1)酸性磷酸酶作用液2％β—甘油磷酸钠 4ml1％
使用载玻片的压片法和装片法的介绍
1、压片法是将生物材料置于载玻片和盖片之间，施加一定压力，将组织细胞压散的一种制片方法。 2、装片法是将生物材料采取整体封固制成玻片标本的方法，用此法可制成临时或永久性装片。 装片材料有：微小生物如衣藻、水绵、变形虫、线虫；水螅，植物的叶表皮；昆虫的翅、足、口器，人的口腔上皮细胞等。 装片
辐射对植物染色体的诱变作用实验
实验方法原理 物理射 线的电离辐射，具有非常短的波长以及相应的较大频率，其穿透力很大，在空气中γ-射线，射程可达几百米，速度为30万公里/秒。因此，对植物给予一定剂量的照射，很容易引起基因突变和染色体畸变，常见的有染色体粘着，着丝点区域断裂，破坏纺锤丝形成，染色体或染色单体的断裂等细胞学现象
辐射对植物染色体的诱变作用实验
实验方法原理物理射 线的电离辐射，具有非常短的波长以及相应的较大频率，其穿透力很大，在空气中γ-射线，射程可达几百米，速度为30万公里/秒。因此，对植物给予一定剂量的照射，很容易引起基因突变和染色体畸变，常见的有染色体粘着，着丝点区域断裂，破坏纺锤丝形成，染色体或染色单体的断裂等细胞学现象。可通过细
辐射对植物染色体的诱变作用实验
实验方法原理：物理射 线的电离辐射，具有非常短的波长以及相应的较大频率，其穿透力很大，在空气中γ-射线，射程可达几百米，速度为30万公里/秒。因此，对植物给予一定剂量的照射，很容易引起基因突变和染色体畸变，常见的有染色体粘着，着丝点区域断裂，破坏纺锤丝形成，染色体或染色单体的断裂等细胞学现象。可
吉姆萨染液的染色步骤
根据需要量，配好工作液，此工作液常温可保存两周。按常规方法制备血涂片，待血膜干后,用甲醇固定 2 ～ 3 分钟；将血涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加稀释好的染色液，使覆盖全部血膜，室温染色15～30分钟。用自来水缓慢从玻片一端冲洗(注意勿先倒去染液或直接对血膜冲洗)，凉干后镜检。
吉姆萨染液的染色步骤
根据需要量，配好工作液，此工作液常温可保存两周。按常规方法制备血涂片，待血膜干后,用甲醇固定 2 ～ 3 分钟；将血涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加稀释好的染色液，使覆盖全部血膜，室温染色15～30分钟。用自来水缓慢从玻片一端冲洗(注意勿先倒去染液或直接对血膜冲洗)，凉干后镜检。
植物组织化学显微镜标本片制作方法_压片法
实验方法原理将植物的幼嫩器官如根尖、茎尖和幼叶等经过处理后，被涂抹或压在载玻片上，使组织成一薄层然后进行观察的制片方法。染色后可做临时的观察标本，也可以经过脱水、透明等步骤制成永久的玻片标本。实验材料植物的幼嫩器官如根尖、茎尖和幼叶试剂、试剂盒酒精仪器、耗材玻片镊子实验步骤1 幼根的培养取洋葱或大蒜
大葱花粉母细胞涂片及观察实验
实验方法原理 减数分裂是配子形成过程中发生的一种特殊方式的细胞分裂，在减数分裂过程中染色体只复制一次，而细胞却连续分裂两次，因此一个二倍体的性母细胞便形成为四个单倍体的性细胞。实验材料 大葱蚕豆试剂、试剂盒 卡诺氏固定液苯酚品红染色液乙醇仪器、耗材 显微镜载玻片盖玻片实验步骤 一、材料和方法 1.
小鼠骨髓细胞染色体标本制作
实验方法原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高度的分裂能力，本实验采用这一材料，通过前处理，低渗，固定，制片，染色等步骤制得染色体标本，可观察到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析。实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 秋水仙素姬姆萨染液固定液低渗液生理盐
酸性磷酸酶的显示方法实验步骤
实验试剂1. 10％中性福尔马林(pH6．8～7．1)甲醛 10ml 蒸馏水 90ml 醋酸钠 2g2. 酸性磷酸酶作用液蒸馏水 90ml 0．2mol／L醋酸缓冲液(pH4．6) 12ml 5％硝酸铅 2ml3. 2％β—甘油磷酸钠 4ml先将蒸馏水和醋酸缓冲液混合，随后分成大致相等的两份，一份中
酸性磷酸酶的显示方法
实验试剂1. 10％中性福尔马林(pH6．8～7．1)甲醛 10ml 蒸馏水 90ml 醋酸钠 2g2. 酸性磷酸酶作用液 蒸馏水 90ml 0．2mol／L醋酸缓冲液(pH4．6) 12ml 5％硝酸铅 2ml3. 2％β—甘油磷酸钠 4ml 先将蒸馏水和醋酸缓冲液混合，随
小鼠骨髓细胞染色体标本制作——秋水仙素处理法
实验方法原理由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高度的分裂能力，本实验采用这一材料，通过前处理，低渗，固定，制片，染色等步骤制得染色体标本，可观察到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析。实验材料小白鼠试剂、试剂盒秋水仙素姬姆萨染液固定液低渗液生理盐水仪器
显微镜玻片制作方法
显微镜玻片制作方法有以下三种：1．涂片法涂片法是将材料均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织、精巢、花药等。涂片时应注意：（1）载玻片必须清洁。（2）载玻片要持平。（3）涂层须均匀。涂抹液滴在载玻片中间偏右，用解剖刀刃或牙签等涂匀。（4
酸性磷酸酶的显示方法
1.目的与原理实验目的： 掌握Comori法的基本原理和方法。观察酸性磷酸酶在细胞内的分布状况。实验原理： 酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基。在pH5．0的环境中，磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的，所以再经过与硫化铵作用，形成棕黑色的硫化铅沉淀，由此就能显示酸性磷酸酶在细胞内的存
大葱花粉母细胞涂片及观察实验_涂片法
通过对植物花粉母细胞的制片，了解小孢子形成过程及减数分裂中染色体的变化情况，并进一步掌握植物细胞染色体的制片方法，掌握减数分裂过程中各时期染色体的基本特征。实验方法原理减数分裂是配子形成过程中发生的一种特殊方式的细胞分裂，在减数分裂过程中染色体只复制一次，而细胞却连续分裂两次，因此一个二倍体的性母细
中期染色体和间期核的原位杂交实验
实验材料含有人类中期染色体的载玻片或盖玻片试剂、试剂盒变性液乙醇Cot-1 DNA非同位素标记的 DNA 探针去离子甲醜胺基本杂交混合液甲酰胺SSC生物素检测溶液DAPI适当的抗褪色剂仪器、耗材玻片染色缸水浴箱相差显微镜盖玻片橡皮泥湿盒干燥的玻片盒指甲油实验步骤展开
酸性磷酸酶的显示方法
实验概要酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基。在pH5．0的环境中，磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的，所以再经过与硫化铵作用，形成棕黑色的硫化铅沉淀，由此就能显示酸性磷酸酶在细胞内的存在与分布。主要试剂1. 10％中性福尔马林(pH6．8～7．1)甲醛 10ml 蒸馏水 90ml 醋
血液涂片的制作与染色
做好血液涂片和正确染色是血液细胞检验的重要步骤，涂片和染色效果的好坏直接关系着检验的结果，必须以认真负责的态度注意操作过程的每一个环节。 一．玻片的清洁 1．一般清洗法 （1） 将玻片放入肥皂或洗衣粉水中煮沸20 分钟。 （2） 用热水将肥皂和血膜等污物洗去，再用自来水反复冲洗，最后再用蒸馏水冲洗
水稻根尖染色体标本制备
实验概要 水稻根尖染色体标本制备实验步骤1.取材： 选取水稻种子，充分浸种后，将它们摆在铺有滤纸的培养皿内，在约28℃条件下发芽培养，当胚根长至1～1.5cm时，剪下备用。2.预处理 压片法：采用0.1％秋水仙素处理2h左右 去壁低渗法可采用以下四种方法处理
细胞化学技术4
6、基本实验过程 用于大分子合成过程研究的放射自显影技术： 同位素标记示踪化合物→注入动物体内→ 取下器官或组织→切片→ 涂乳胶膜→自显影→显影和定影→染色→观察 用于大分子定位研究的放射自显影技术： 组织固定包埋→切片 ↓ 细胞化学反
植物染色体制片
实验概要掌握染色体制片方法，并自选材料进行染色体制片；学会染色体核型分析。主要试剂酒精、冰醋酸、甲醇、盐酸、铁矾、苏木精（或洋红、石炭酸品红）、秋水仙碱（或对二氯苯饱和水溶液、8-羟基奎啉、富民隆乳剂）、二甲苯、中性树胶、石碳酸、甲醛、山梨醇等。主要设备显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、吸水纸、纱布块、
DNA裂解分析实验_乙醇固定后PI染色
实验材料细胞试剂、试剂盒EDTA-PBS洗涤缓冲液乙醇RNA 酶PI 溶液仪器、耗材流式细胞计量术实验步骤1. 在 5 mmol/L EDTA-PBS 中洗 1X106 细胞，重悬于 300 μl 洗涤缓冲液中。加 700 μl 100% 的冰冷乙醇，滴加，并轻微搅拌。旋转搅拌混匀。2. 14000
植物根尖压片实验
实验方法原理 有丝分裂是植物细胞分裂，体细胞增殖的主要方式，在有丝分裂过程中，细胞核内染色体准确地复制，并有规律地，均匀地分配到两个子细胞中，使子细胞和母细胞具有同样数目和形态结构的染色体，保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中，如根尖组织，茎尖组织，居间分生组织，愈伤组织等，细胞
血涂片制备与染色及质量控制
血涂片是通过特定的方法将血液按一定方向均匀涂开的过程，微观上使细胞是由球形变为平面形或近平面形平铺在载玻片上。血涂片的显微镜检查是血液细胞形态学检查的基本步骤，特别是对于各种血液病的诊断和鉴别诊断，具有重要价值。血涂片制备是否合格、染色的好坏直接关系到检验结果的质量。（一）血涂片制备1.载玻片的准备