蛋白酶的测定实验——偶氮酪蛋白测定法
实验方法原理酪蛋白的敏感性鉴定可以通过这个实验得到很大程度的改善。含氮的基团与酪蛋白的共价键被蛋白水解时切断,用 TCA 上清液测定它们的颜色变化。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒磷酸钾偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)三氯乙酸仪器、耗材分光光度计实验步骤0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液0.2 ml 蛋白酶溶液25℃ 时培养 30 min 后,加 0.2 ml 10% 三氯乙酸停止反应,离心 5 min。于 340 nm 处测上清液的吸收值,1U 是指 1 h 内,能使吸收值变化 1 的酶量。注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 8.00.2% 偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)溶于 0.1 mol/L 磷酸钾溶液,pH 8.010% 三氯乙酸(TCA,质量浓度)展......阅读全文
脑脊液总蛋白测定实验
实验方法原理磺基水杨酸为生物碱试剂,能沉淀蛋白质,但对白Pr的沉淀能力比球Pr强,加入Na2SO4后,同样浓度的ALB和球Pr呈浊,趋于一致,与标准Pr浓度对比定量测定.试剂、试剂盒磺基水杨酸-硫酸钠试剂Pr标准液实验步骤1. 取4支试管,分别标明标本管,标本空白管标准管,试剂空白管,向标本管和标本
脑脊液总蛋白测定实验
实验方法原理 磺基水杨酸为生物碱试剂,能沉淀蛋白质,但对白Pr的沉淀能力比球Pr强,加入Na2SO4后,同样浓度的ALB和球Pr呈浊,趋于一致,与标准Pr浓度对比定量测定.试剂、试剂盒 磺基水杨酸-硫酸钠试剂Pr标准液实验步骤 1. 取4支试管,分别标明标本管,标本空白管标准管,试剂空白管,向标本管
血清粘蛋白测定实验
实验方法原理0.6 mol/L 过氯酸测定血清中蛋白质时粘蛋白不被沉淀,而存留于滤液中,再加磷钨酸使粘蛋白沉淀,然后以酚试剂测定其中蛋白质的含量。实验步骤注意事项1、本法影响因素很多。正常值观察报告不一,故无论用蛋白或酪AA表示结果,均须说明所采用的方法及正常值。2、操作中血清与154mmol/L氯
DNA结合蛋白测定实验
实验材料 质粒DNA试剂、试剂盒 dNTPDNA聚合酶Klenow酶TETAE溴化乙锭TEMED过硫酸铵BSA仪器、耗材 培养箱离心管实验步骤 1. 用一种或多种限制性内切酶在100 μl 体积中消化10 μg 质粒人,产生25~100 bp 的含有结合位点的DNA片段,并至少有一端是5’突出的
DNA结合蛋白测定实验
实验方法原理 本分析方法是一种简单、快速和极为灵敏的用于检测粗制提取物中序列特异性的DNA结合蛋白的方法。在电泳时,与末端标记的DNA片段特异结合的蛋白质阻滞了片段的迁移,因而产生对应于蛋白-DNA复合物的清晰电泳条带。
DNA结合蛋白测定实验
本实验主要用于检测粗制提取物中序列特异性的DNA结合蛋白。实验方法原理本分析方法是一种简单、快速和极为灵敏的用于检测粗制提取物中序列特异性的DNA结合蛋白的方法。在电泳时,与末端标记的DNA片段特异结合的蛋白质阻滞了片段的迁移,因而产生对应于蛋白-DNA复合物的清晰电泳条带。实验材料质粒DNA试剂、
血清粘蛋白测定实验
实验方法原理0.6 mol/L 过氯酸测定血清中蛋白质时粘蛋白不被沉淀,而存留于滤液中,再加磷钨酸使粘蛋白沉淀,然后以酚试剂测定其中蛋白质的含量。实验步骤一、实验试剂:1. 154mmol/L氯化钠溶液.2. 1.8mol/L过氯酸:取含水量为70%-72%过氯酸28ml,加蒸馏水稀释200ml并标
胃蛋白酶原的概述
胃蛋白酶原是由主细胞合成的,并以不具有活性的酶原颗粒形式贮存在细胞内。当细胞内充满酶原颗粒时,它对新的酶原产生负反馈作用。持续的刺激可使主细胞内的颗粒历释放而完全消失,便分泌仍继续进入,说明酶原也可以不经过颗粒的形式直接释放出来。 分泌入胃腔内的胃蛋白酶原在胃酸的作用下,从分子中分离出一个小分
蛋白酶k的作用
值得注意的是,蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果.EDTA缓冲液可以替代蛋白
胰蛋白酶的作用
胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在 pH 为 8.0 、温度为 37℃ 时,胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+ 、 Mg2
蛋白酶的应用分析
蛋白酶是最重要的一种工业酶制剂,能催化蛋白质和多肽水解,广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。在干酪生产、肉类嫩化和植物蛋白改性中都大量的使用蛋白酶。此外,胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶和氨肽酶都是人体消化道中的蛋白酶,在它们的作用下,人体摄入的蛋白质被水解成小分子肽和氨基酸。目前在焙烤工业
弹性蛋白酶的性状
弹性蛋白酶的性状:1.其外观呈淡黄色至深黄色粉末,也可是浅褐至深褐色液体。可溶于水,不溶于乙醇,有吸湿性。2.纯胰弹性蛋白酶,由240个氨基酸残基组成的单一肽链,相对分子质量约为25000,等电点为9.5。3.弹性蛋白酶 可使结缔组织蛋白质中的弹性蛋白消化分解,包括肽键结合的、酰胺结合的和酯结合的进
弹性蛋白酶的性状
弹性蛋白酶的性状:1.其外观呈淡黄色至深黄色粉末,也可是浅褐至深褐色液体。可溶于水,不溶于乙醇,有吸湿性。2.纯胰弹性蛋白酶,由240个氨基酸残基组成的单一肽链,相对分子质量约为25000,等电点为9.5。3.弹性蛋白酶 可使结缔组织蛋白质中的弹性蛋白消化分解,包括肽键结合的、酰胺结合的和酯结合的进
弹性蛋白酶的性状
弹性蛋白酶的性状:1.其外观呈淡黄色至深黄色粉末,也可是浅褐至深褐色液体。可溶于水,不溶于乙醇,有吸湿性。2.纯胰弹性蛋白酶,由240个氨基酸残基组成的单一肽链,相对分子质量约为25000,等电点为9.5。3.弹性蛋白酶 可使结缔组织蛋白质中的弹性蛋白消化分解,包括肽键结合的、酰胺结合的和酯结合的进
弹性蛋白酶的性状
弹性蛋白酶的性状:1.其外观呈淡黄色至深黄色粉末,也可是浅褐至深褐色液体。可溶于水,不溶于乙醇,有吸湿性。2.纯胰弹性蛋白酶,由240个氨基酸残基组成的单一肽链,相对分子质量约为25000,等电点为9.5。3.弹性蛋白酶 可使结缔组织蛋白质中的弹性蛋白消化分解,包括肽键结合的、酰胺结合的和酯结合的进
弹性蛋白酶的用途
在医学临床主要用于治疗高血脂症,防止动脉粥样硬化、脂肪肝。也可用于肉类和水产加工中的嫩化。
胃蛋白酶原的组成
胃蛋白酶原是胃蛋白酶的前体,根据其生化性质和免疫原性将其分成2个亚群,1-5组分的免疫原性相同,称为胃蛋白酶原I,主要由胃底腺的主细胞和黏液颈细胞分泌;组分6和7被称为胃蛋白酶原II,除由胃底腺的主细胞和黏液颈细胞分泌外,贲门腺和胃窦的幽门腺的黏液颈细胞以及十二指肠上段也能产生胃蛋白酶原II。
蛋白酶的生产现状
蛋白酶的商品生产始于20世纪初,30年代微生物蛋白酶开始用在食品和制革工业。近 20 年来,微生物蛋白酶的研究蓬勃开展。20世纪50年代初,日本学者首先发现霉菌中存在几种类型的蛋白酶,特别是酸性蛋白酶。20世纪60年代初,荷兰开始生产添加碱性蛋白酶的洗涤剂。国际市场上商品蛋白酶80-100种以上。
弹性蛋白酶的结构
弹性硬蛋白是一种由丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等非极性氨基酸残基交联而成的网状结构,它可以耐受酸碱处理,并能抵抗一般蛋白酶的消化。
蛋白酶的基本用途
用途 酶制剂。黑曲霉主要用于水解蛋白的生产,如浓缩鱼蛋白、氨基酸调味料之类。米曲霉主要用于啤酒的抗寒(水解啤酒中蛋白质,避免冷藏后发生浑浊),焙烤制品(降低面团搅拌时间;水解面筋以增加面团柔软性;防止苏打饼干状面团进入烤炉时的卷曲;改进面包风味),肉类软化(水解肌肉蛋白和胶原蛋白,使肉类嫩化)等。酸
菠萝蛋白酶的制法
制法 由菠萝(Ananas comosus和A.bracteatus)果实及茎(主要利用其外皮)经压榨提取、盐析(或丙酮、乙 醇沉淀)再分离、干燥而得。
菠萝蛋白酶的用途
用途 酶制剂。主要用于啤酒抗寒(水解啤酒中的蛋白质,避免冷藏后引起的混浊);肉类软化(水解肌肉蛋白和胶原蛋白,使肉类嫩化);谷类预煮准备;水解蛋白质的生产中,以及面包、家禽、葡萄酒等中。活力单位为40万单位/g者,添加量在0.8~1.2mg/kg左右。
蛋白酶的生产现状
蛋白酶是最重要的一种工业酶制剂,能催化蛋白质和多肽肽键水解。它广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。各种生物体都能合成它,但唯有微生物蛋白酶具有生产价值,蛋白酶也是研究的比较深入的一种酶,已做成结晶或得到高度纯化物的蛋白酶达100多种,其中不少酶的一级结构以及立体结构也已阐明。蛋白酶的商品生
胃蛋白酶的功能
胃蛋白酶(英文名称:Pepsin)是一种消化性蛋白酶,由胃部中的胃粘膜主细胞(gastric chief cell)所分泌,功能是将食物中的蛋白质分解为小的肽片段。主细胞分泌的是胃蛋白酶原,胃蛋白酶原经胃酸或者胃蛋白酶刺激后形成胃蛋白酶,胃蛋白酶不是由细胞直接生成的。
蛋白酶K的应用
蛋白酶K已广泛应用在皮革、毛皮、丝绸、医药、食品、酿造等方面。皮革工业的脱毛和软化已大量利用蛋白酶,既节省时间,又改善劳动卫生条件。蛋白酶还可用于蚕丝脱胶、肉类嫩化、酒类澄清。临床上可作药用,如用胃蛋白酶治疗消化不良,用酸性蛋白酶治疗支气管炎,用弹性蛋白酶治疗脉管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶对外科
弹性蛋白酶的性状
1.其外观呈淡黄色至深黄色粉末,也可是浅褐至深褐色液体。可溶于水,不溶于乙醇,有吸湿性。2.纯胰弹性蛋白酶,由240个氨基酸残基组成的单一肽链,相对分子质量约为25000,等电点为9.5。3.弹性蛋白酶 可使结缔组织蛋白质中的弹性蛋白消化分解,包括肽键结合的、酰胺结合的和酯结合的进行加水分解。作用的
含锌蛋白酶的本质
含锌蛋白酶即在一类活性中心含锌离子的金属蛋白酶。属于基质金属蛋白酶(MMPs)的一种。
蛋白酶的基本用途
用途 酶制剂。黑曲霉主要用于水解蛋白的生产,如浓缩鱼蛋白、氨基酸调味料之类。米曲霉主要用于啤酒的抗寒(水解啤酒中蛋白质,避免冷藏后发生浑浊),焙烤制品(降低面团搅拌时间;水解面筋以增加面团柔软性;防止苏打饼干状面团进入烤炉时的卷曲;改进面包风味),肉类软化(水解肌肉蛋白和胶原蛋白,使肉类嫩化)等。酸
蛋白酶的应用介绍
蛋白酶已广泛应用在皮革、毛皮、丝绸、医药、食品、酿造等方面。皮革工业的脱毛和软化已大量利用蛋白酶,既节省时间,又改善劳动卫生条件。蛋白酶还可用于蚕丝脱胶、肉类嫩化、酒类澄清。临床上可作药用,如用胃蛋白酶治疗消化不良,用酸性蛋白酶治疗支气管炎,用惮性蛋白酶治疗脉管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶对外科化
弹性蛋白酶的性状
弹性蛋白酶的性状:1.其外观呈淡黄色至深黄色粉末,也可是浅褐至深褐色液体。可溶于水,不溶于乙醇,有吸湿性。2.纯胰弹性蛋白酶,由240个氨基酸残基组成的单一肽链,相对分子质量约为25000,等电点为9.5。3.弹性蛋白酶 可使结缔组织蛋白质中的弹性蛋白消化分解,包括肽键结合的、酰胺结合的和酯结合的进