蛋白酶的测定实验——偶氮酪蛋白测定法

实验方法原理酪蛋白的敏感性鉴定可以通过这个实验得到很大程度的改善。含氮的基团与酪蛋白的共价键被蛋白水解时切断,用 TCA 上清液测定它们的颜色变化。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒磷酸钾偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)三氯乙酸仪器、耗材分光光度计实验步骤0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液0.2 ml 蛋白酶溶液25℃ 时培养 30 min 后,加 0.2 ml 10% 三氯乙酸停止反应,离心 5 min。于 340 nm 处测上清液的吸收值,1U 是指 1 h 内,能使吸收值变化 1 的酶量。注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 8.00.2% 偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)溶于 0.1 mol/L 磷酸钾溶液,pH 8.010% 三氯乙酸(TCA,质量浓度)展......阅读全文

蛋白酶K的妙用

蛋白酶 K,威力巨大的广谱蛋白酶,95C 加热10 分钟,则完全失活。数年前首次使用它,是替代 DEPC 处理 RNA 抽提用的离心管和枪头,效果不错;后来又用于处理 RNase-Free的水,效果也是一级棒。从此就再也不用 DEPC 了。现在将它的细节公开,与大家分享。 配制 RNA 裂解试剂时,

胃蛋白酶原的概述

  胃蛋白酶原是由主细胞合成的,并以不具有活性的酶原颗粒形式贮存在细胞内。当细胞内充满酶原颗粒时,它对新的酶原产生负反馈作用。持续的刺激可使主细胞内的颗粒历释放而完全消失,便分泌仍继续进入,说明酶原也可以不经过颗粒的形式直接释放出来。  分泌入胃腔内的胃蛋白酶原在胃酸的作用下,从分子中分离出一个小分

弹性蛋白酶的用途

在医学临床主要用于治疗高血脂症,防止动脉粥样硬化、脂肪肝。也可用于肉类和水产加工中的嫩化。

蛋白酶的催化过程

1. 称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为 0.25 %,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调 PH 到 7.2 左右)或 PBS ( D-hanks )液中。搅拌混匀,置于 4℃ 内过夜。2. 用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器( 0.22 微米微孔滤膜)

菠萝蛋白酶的毒性

毒性类别:有毒物质毒性分级:高毒急性毒性:腹腔-大鼠 LD50: 85 毫克/公斤; 腹腔-小鼠 LD50: 37 毫克/公斤可燃性危险特性热分解排出刺激烟雾储运特性库房通风低温干燥灭火剂:水,泡沫,沙土,二氧化碳,干粉

蛋白酶的生产现状

蛋白酶的商品生产始于20世纪初,30年代微生物蛋白酶开始用在食品和制革工业。近 20 年来,微生物蛋白酶的研究蓬勃开展。20世纪50年代初,日本学者首先发现霉菌中存在几种类型的蛋白酶,特别是酸性蛋白酶。20世纪60年代初,荷兰开始生产添加碱性蛋白酶的洗涤剂。国际市场上商品蛋白酶80-100种以上。

胰蛋白酶的作用

胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在 pH 为 8.0 、温度为 37℃ 时,胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+ 、 Mg2

蛋白酶的应用分析

蛋白酶是最重要的一种工业酶制剂,能催化蛋白质和多肽水解,广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。在干酪生产、肉类嫩化和植物蛋白改性中都大量的使用蛋白酶。此外,胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶和氨肽酶都是人体消化道中的蛋白酶,在它们的作用下,人体摄入的蛋白质被水解成小分子肽和氨基酸。目前在焙烤工业

弹性蛋白酶的性状

弹性蛋白酶的性状:1.其外观呈淡黄色至深黄色粉末,也可是浅褐至深褐色液体。可溶于水,不溶于乙醇,有吸湿性。2.纯胰弹性蛋白酶,由240个氨基酸残基组成的单一肽链,相对分子质量约为25000,等电点为9.5。3.弹性蛋白酶 可使结缔组织蛋白质中的弹性蛋白消化分解,包括肽键结合的、酰胺结合的和酯结合的进

胰蛋白酶的介绍

中文名称: 胰蛋白酶 中文同义词: 胰蛋白酶;胰蛋白酶1:250(猪胰脏);胰蛋白酶1:300(猪胰脏);胰淀粉酶;胰液酵素;胰酶-EDTA溶液;胰蛋白酶1:250;蛋白酶类 英文名称: Trypsin 英文同义词: TRYPSIN;TRYPSIN, 1-250;TRYPSIN, 1-300;TRY

蛋白酶的主要应用

蛋白酶是最重要的一种工业酶制剂,能催化蛋白质和多肽水解,广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。在干酪生产、肉类嫩化和植物蛋白改性中都大量的使用蛋白酶。此外,胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶和氨肽酶都是人体消化道中的蛋白酶,在它们的作用下,人体摄入的蛋白质被水解成小分子肽和氨基酸。目前在焙烤工业

蛋白酶的应用介绍

  由于蛋白酶来源丰富,除从动、植物中提取外,还可由细菌大量发酵生产,已广泛应用于医疗、食品、制革、缫丝等工业,也可作为重要的生化试剂。例如胰凝乳蛋白酶用于白内障摘除手术,使手术简化,成功率提高;胰蛋白酶对清除坏死组织,消炎化脓,愈合伤口有明显效果;尿激酶、链激酶用于治疗静脉血栓,脉管炎;激肽释放酶

胰蛋白酶的作用

胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在 pH 为 8.0 、温度为 37℃ 时,胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+ 、 Mg2

碱性蛋白酶的简介

  碱性蛋白酶,指在碱性条件下能够水解蛋白质肽键的酶,最适pH在9~11范围内。广泛应用于洗涤剂、食品、医疗、酿造、丝绸、制革等行业。  碱性 蛋白酶,又称 丝氨酸蛋白酶。常见的有两种,一为Novo蛋白酶,另一为Carsberg蛋白酶,两者的性质和构造相近,分别含275和274个 氨基酸残基,由一条

胰蛋白酶的作用

胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在 pH 为 8.0 、温度为 37℃ 时,胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+ 、 Mg2

实验室水分活度值的测定法AW测定仪法测定原理

原理:在一定温度下主要利用AW测定仪中的传感器根据食品中水的蒸汽压力的变化,从仪器的表头上读出指针所示的水分活度。在样品测定前需用氯化钡和溶液校正AW测定仪的AW为9.000。

临床化学检查方法介绍唾液富酪蛋白介绍

唾液富酪蛋白介绍:  富酪蛋白是唾液中一族富含酪氨酸和脯氨酸的磷酸蛋白,其分子量为5.38kD,等电点为pH4.22。唾液富酪蛋白正常值:  2-6μmol/L。唾液富酪蛋白临床意义:  富酪蛋白能够维持唾液为一种过饱和的钙和磷酸盐溶液,这种唾液可防止釉质脱矿,刺激脱矿的牙釉质再矿化,使新萌出的牙齿

酪蛋白钠盐是什么?有哪些作用和特性?

一、定义:可称为酪蛋白酸钠、酪蛋白钠、酪酸钠或干酪素,是牛乳中主要蛋白质酪蛋白的钠盐,是一种安全无害的增稠剂和乳化剂,因为酪蛋白酸钠含有人体所需的各种氨基酸,营养价值很高,也可作为营养强化剂食用。其相对分子质量75000~375000。它是用碱性物(如q氧化na)处理酪蛋白凝乳,将水不溶性的酪蛋白转

碱性蛋白酶测试盒检测范围

碱性蛋白酶测试盒检测范围 测定意义:AKP 是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类,属于丝氨酸蛋白酶。此外,该酶还能够水解酯键、酰胺键,具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一,广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。测定原理:在碱性条件下, AKP 水解酪蛋白生成酪氨酸; 在碱性条件下, 酪

蛋白质胰蛋白酶磷酸肽图谱制定实验1

实验材料含 32P 标记的蛋白质的样品试剂、试剂盒荧光墨水/染料碳酸氢铵2-巯基乙醇SDS载体蛋白(溶于去离子水中)三氯乙酸(TCA)乙醇过氧化氢甲酸TPCK-处理的胰蛋白酶(溶于去离子水/ HCl )电泳缓冲液绿色标记染料层析缓冲液仪器、耗材单边剃刀刀片/手术刀片闪烁计数器1.7 ml 微量离心管

胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验

胰蛋白酶切蛋白质样品的制备双向薄层电泳与层析分离多肽片段反向高效液相层析绘制多肽图谱实验材料蛋白质                                                          试剂、试剂盒甲醇                                  

胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验

胰蛋白酶切蛋白质样品的制备 双向薄层电泳与层析分离多肽片段 反向高效液相层析绘制多肽图谱             实验材料 蛋白质

胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 甲醇电泳缓冲液仪器、耗材 凝胶电泳实验步骤 1. 用单向或者双向凝胶电泳将 32P 标记的目的蛋白质与其他不需要的成分分开。2. 电泳结束后,用 50% 甲醇清洗三次,时间控制在 6 小时,去处 SDS 和电泳缓冲液将凝胶放在两张塞热玢膜(Bio-Rad) 之间吸干。用

关于酚妥拉明的测定法介绍

  取本品约25mg,精密称定,置25mL量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取5mL,置50mL量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取20μL,注入液相色谱仪,记录色谱图;另取甲磺酸酚妥拉明对照品,同法测定。按外标法以酚妥拉明峰面积计算,即得。  【类别】肾上腺素受体阻滞药。  【贮藏】遮光

常用的-ELISA-测定法介绍

①测定抗体的间接法  首先将已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反应板的凹孔内。加待测抗体(如需筛选的杂交瘤细胞株的组织培养上清液);保温后洗涤以除去未结合的杂蛋白质,加酶标抗抗体;保温后洗涤,加底物保温30min 后,加酸或碱中止酶促反应,用目测或光电比色测定抗体含量。②测定抗原的双抗体夹心法  首先将

甲氧基测定法的原理

  化学反应  这个反应用于测定甲氧基含量,测定时,取一定量的含甲氧基的化合物和过量的氢碘酸一起加热,把生成的碘甲烷借蒸馏从反应混合物中分出,然后用重量法或滴定法测定。

底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定

实验原理酶促反应速度与底物浓度的关系可用米氏方程来表示:式中,v──反应初速度(微摩尔浓度变化/min);V──最大反应速度(微摩尔浓度变化/min);[S]──底物浓度(mol/L);Km──米氏常数(mol/L)。这个方程表明当已知Km及V时,酶反应速度与底物浓度之间的定量关系。Km值等于酶促反

胃蛋白酶测定的临床意义及注意事项

  临床意义  胃蛋白酶分泌减少见于胃癌、萎缩性胃炎、慢性胃炎。胃扩张、慢性十二指肠炎、恶性贫血以及甲状腺功能减退等。  结果偏低可能疾病:  慢性胃炎  注意事项  检查前禁忌:食用大量食物,影响检查过程。  检查时要求: 血液中胃蛋白酶同工酶原水平能更准确地反映胃黏膜的情况。患者服从医生指示,做

测定α1抗胰蛋白酶(AAT)的临床意义

肝脏合成,α1-抗胰蛋白酶是α1-区带显色的主要成份。是血液中最主要的蛋白酶抑制剂,可抑制多种蛋白酶的活性。一般认为α1-抗胰蛋白酶的主要功能是对抗由多形核白细胞吞噬作用时释放的溶酶体蛋白水解酶。临床意义(1)浓度升高:见于急性炎症、外科手术(急性时相反应蛋白)妊娠、长期服用可的松、雌激素等药物也可

胃蛋白酶测定的注意事项及检查过程

  注意事项  检查前禁忌:食用大量食物,影响检查过程。  检查时要求: 血液中胃蛋白酶同工酶原水平能更准确地反映胃黏膜的情况。患者服从医生指示,做好相关检查。  检查过程  取试管6支,其中3支各精密加入对照品溶液1ml,另3支各精密加入供试品溶液1ml,置37℃±0.5℃水浴中,保温5分钟,精密