蛋白酶的测定实验——偶氮酪蛋白测定法
实验方法原理酪蛋白的敏感性鉴定可以通过这个实验得到很大程度的改善。含氮的基团与酪蛋白的共价键被蛋白水解时切断,用 TCA 上清液测定它们的颜色变化。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒磷酸钾偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)三氯乙酸仪器、耗材分光光度计实验步骤0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液0.2 ml 蛋白酶溶液25℃ 时培养 30 min 后,加 0.2 ml 10% 三氯乙酸停止反应,离心 5 min。于 340 nm 处测上清液的吸收值,1U 是指 1 h 内,能使吸收值变化 1 的酶量。注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 8.00.2% 偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)溶于 0.1 mol/L 磷酸钾溶液,pH 8.010% 三氯乙酸(TCA,质量浓度)展......阅读全文
麻醉大鼠动脉血压的测定实验(直接测定法)
实验材料大鼠试剂、试剂盒氨基甲酸乙酯戊巴比妥钠普鲁卡因注射液肝素仪器、耗材大鼠实验台聚乙烯医用塑料导管压力换能器多通道生理信号采集记录仪器实验步骤(1)颈总动脉测量动脉血压:取体重为200~250g左右的大白鼠,用20%氨基甲酸乙酯注射液0.5ml/100g或者1.5%戊巴比妥钠注射液0.2ml/1
麻醉大鼠动脉血压的测定实验(直接测定法)
实验材料 大鼠试剂、试剂盒 氨基甲酸乙酯戊巴比妥钠普鲁卡因注射液肝素仪器、耗材 大鼠实验台聚乙烯医用塑料导管压力换能器多通道生理信号采集记录仪器实验步骤 (1)颈总动脉测量动脉血压:取体重为200~250g左右的大白鼠,用20%氨基甲酸乙酯注射液0.5ml/100g或者1.5%戊巴比妥钠注射液0.2
胰凝乳蛋白酶_用-SUPHEPA-测定
实验材料α-胰凝乳蛋白酶试剂、试剂盒三甲醇胺-NaOH三甲醇胺-NaOHN-琥珀酰-L-苯丙氨酰对硝基苯胺仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」在 25℃。测定 405 nm 吸光值增加,对硝基苯胺的吸收系数为 ε405=10.2×103 l(mol · cm)展开 注意事项其他
胰凝乳蛋白酶_用-GLUPHEPA-测定
实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾GLUPHEPA仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」测定 25℃、405 nm 处光吸收值的增加,对硝基苯胺的吸收系数 ε405=10.2×103 l(mol · cm)。注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.610 mmol/
蛋白质浓度测定-FolinPhenol-(Lowry)测定法
目的要求(1)学习Folin-phenol法测定蛋白质含量的原理及方法。(2)制备标准曲线,测定未知样品中蛋白质含量。原理目前蛋白质含量测定有两类方法,一类是利用蛋白质的物理化学性质,如折射率、比重、紫外吸收等测定得知;另一类是利用化学方法测定蛋白质含量,如微量凯氏定氮、双缩脉反应、Folin-ph
角蛋白酶的理化性质
目前已分离纯化的角蛋白酶的分子量差异较大,从十几kDa到几百kDa不等。较小的为单体酶,有报道来自Nesternkonia spAL-20的角蛋白酶,分子量为18kDa,较大的为复合酶,如嗜热厌氧菌产的角蛋白酶可达200kDa以上。大部分角蛋白酶的分子量集中在30~70kDa之间,如HSIN-HUN
木瓜蛋白酶的酶活性的测定
本方法仅适用于木瓜蛋白酶。 基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。酶活单位在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。试液制备1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.
维生素B2-(核黄素)-荧光测定法实验_荧光测定法2
实验方法原理核黄素在pH 4~9 的条件下,用450 nm波长的光激发,可发出波长为520 nm的荧光。在核黄素的含量为0.1~10 μg范围内,荧光的强度,与核黄素浓度成正比,硫代硫酸钠可消除核黄素的荧光性。实验材料核黄素试剂、试剂盒荧光红钠 硫代硫酸钠 盐酸仪器、耗材荧光分光光度计 容量瓶实验步
维生素B2-(核黄素)-荧光测定法实验_荧光测定法1
实验方法原理核黄素能形成一种具有黄绿色荧光的黄色溶液。它在稀溶液中,440~500 nm波长下测定的荧光强度与核黄素的浓度成正比。根据其在还原后的荧光差数,可测定核黄素的含量。实验材料核黄素试剂、试剂盒高锰酸钾溶液 荧光红钠 硫代硫酸钠 冰醋酸仪器、耗材荧光分光光度计 玻璃器实验步骤溶液配制:1.
蛋白酶的按蛋白酶作用分类
按蛋白酶作用的最适 pH 可以分为 pH2.5-5.0 的酸性蛋白酶、pH9.5-10.5 的碱性蛋白酶、pH7-8 的中性蛋白酶。根据蛋白酶的活性中心和最适反应 pH 可以分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和活性中心有两个羧基的酸性蛋白酶。
糜蛋白酶测试盒实验操作
糜蛋白酶,又称胰凝乳蛋白酶,是胰腺分泌的一种蛋白水解酶,能迅速分解变性蛋白质。糜蛋白酶的功能与 胰蛋白酶相似,但是具有分解能力强、毒性低和不良反应小等优点。临床上糜蛋白酶用于痰液稀化,对脓性和非 脓性痰液均有效;也用于创伤或手术后伤口愈合,如白内障摘除。糜蛋白酶催化 BTEE 水解,产物在 256
蛋白酶的作用及蛋白酶的种类
蛋白酶是一种活性酶,它分为很多种,每种都可以用作不同的地方。下面我为大家带来了蛋白酶的作用,仅供参考,谢谢阅读。 蛋白酶的种类 1.木瓜蛋白酶 木瓜蛋白酶,是一种蛋白水解酶,可将抗体分子水解为3个片段。是番木瓜中含有的一种低特异性蛋白水解酶,活性中心含半胱氨酸,属巯基蛋白酶,应用于啤酒及
酪蛋白激酶的基本信息
中文名称酪蛋白激酶英文名称casein kinase;CK定 义催化肽链中邻近酸性氨基酸残基的丝氨酸/苏氨酸磷酸化的酶。包括酪蛋白激酶1(CK1)和酪蛋白激酶2(CK2)。近来发现也能磷酸化酪氨酸残基,具有广谱底物特异性,因而具有多种生物功能。最初因能磷酸化酪蛋白而得此名,事实上CK2在体内并不参
酸水解酪蛋白的功能及作用
功能及作用编辑 1、饲料: a、增香增鲜,促进动物食欲。该产品谷氨酸含量高,具有调节口感,促进食欲之功效。 b、快速补充动物营养,增强饲料的利用率。该产品所有氨基酸均为水解游离氨基酸,无消化损失;由于多种氨基酸的复合效应,可增强其他营养物质的吸收利用;亦可利用氨基酸对微量元素的结合能力,增
酸水解酪蛋白的注意事项
1、本品吸潮,未用完时务必密闭防潮。 2、饲料中添加时,在其它原料粉碎后再添加混合,以免粘附设备。 3、包装规格:100克---500克(塑料瓶装)、每袋10kg、20kg 采用聚乙烯无毒塑料内衬袋包装,外用牛皮纸复合包装袋。
关于酪蛋白胶粒的Holt模型介绍
由Holt等(1998,2003)提出,在该模型中,酪蛋白胶粒是由酪蛋白分子缠结在一起,形成一个网状凝胶结构。在这一结构中,胶体磷酸钙微簇(colloidal calcium phosphate nanoclusters)对胶粒结构起稳定作用,它与钙敏性酪蛋白中的磷酸丝氨酸簇结合在一起,形成内部
关于β酪蛋白的基本信息介绍
β-酪蛋白(β-CN)广泛存在于哺乳动物(牛、牦牛、山羊、马、兔等)和人的乳汁中,是由乳腺腺泡上皮细胞合成的磷酸化蛋白质。 β-CN在人初乳中的含量为 0.26 mg/100 mL,在成熟乳中含量为 0.3-0.5 mg/100 mL,占总酪蛋白含量的 50 % ~ 85 %。人乳中的酪蛋白为
关于酪蛋白的详细说明介绍
酪蛋白是哺乳动物包括母牛,羊和人奶中的主要蛋白质。牛奶的蛋白质,主要以酪蛋白(Casein)为主,人奶以白蛋白为主。酪蛋白是一种大型、坚硬、致密、极困难消化分解的凝乳(curds)。 酪蛋白是乳中含量最高的蛋白质,龋齿,防治骨质疏松与佝偻病,促进动物体外受精,调节血压,治疗缺铁性贫血、缺镁性神
酪蛋白激酶的基本信息
中文名称酪蛋白激酶英文名称casein kinase;CK定 义催化肽链中邻近酸性氨基酸残基的丝氨酸/苏氨酸磷酸化的酶。包括酪蛋白激酶1(CK1)和酪蛋白激酶2(CK2)。近来发现也能磷酸化酪氨酸残基,具有广谱底物特异性,因而具有多种生物功能。最初因能磷酸化酪蛋白而得此名,事实上CK2在体内并不参
关于酪蛋白多肽的作用机理介绍
1、酪蛋白多肽全面解除代谢紊乱 脂质、糖甚至蛋白代谢紊乱事实上三位一体,互相联系的。高脂血症、高体重(肥胖)、高血糖等代谢综合症的发生,都与代谢进程中吸收、分解、氧化、转运、合成、再分解等各个环节出现障碍所致。 经过严格序列设计及分离纯化多肽细胞因子,有以下功能: (A)使营养物质吸收、能
酪蛋白的性质鉴定,该如何操作?
一说到蛋白粉,大家第一想到的就是乳清蛋白,当然也有极少数不懂的人买植物蛋白粉在吃,这类咱就不讨论了,其实还有种蛋白叫酪蛋白,很少有人知道或者购买,众所周知的是牛奶当中每一百克含有3克蛋白质,这3克蛋白质当中有80%就是酪蛋白,剩下的20%才是乳清蛋白,那酪蛋白如何提取?本文将对此进行介绍。 一
关于酪蛋白多肽的吸收机制介绍
过去的科学研究认为,蛋白质经消化道酶促水解后,主要以氨基酸的形式被吸收。近两年的科学研究认为,人体吸收蛋白质的主要形式不是以氨基酸,而是以多肽的形式吸收的,这是人体吸收蛋白质机制研究的重大突破。科学试验证明,酪蛋白多肽的的吸收机制具有十大特点: 1、不需消化,直接吸收。通常,多肽是人体自身合成
关于酪蛋白的基本信息介绍
酪蛋白是一种含磷钙的结合蛋白,对酸敏感,pH较低时会沉淀。 酪蛋白是哺乳动物包括母牛,羊和人奶中的主要蛋白质,又称:干酪素、酪朊、乳酪素。 α-酪蛋白是哺乳动物的主要蛋白,人乳中没有α-酪蛋白,以β-酪蛋白为主要酪蛋白形式。酪蛋白对幼儿既是氨基酸的来源,也是钙和磷的来源,酪蛋白在胃中形成凝乳
木瓜蛋白酶的酶活测定方法
25℃恒温条件下,取25mL烧杯装在pH自动滴定仪上,加底物溶液3.75mL、3mol/L氯化钠溶液2.50mL、重蒸馏水1.25mL,混合后加入待测酶液后立即计时,用0.1mol/L氢氧化钠在电磁搅拌下连续滴定以保持pH6.2,记下每分钟所耗0.01mol/L氢氧化钠毫升数。同时进行空白校正。
胃蛋白酶片的效价测定方法
照紫外可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品5片,置研钵中,加盐酸溶液适量研磨均匀,全量转移至250m量瓶中,用盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,精密量取适量,用盐酸溶液定量稀释制成每1ml中约含0.2~0.4单位的溶液。盐酸溶液、对照品溶液与测定法见胃蛋白酶效价测定项下
角蛋白酶的活性测定方法介绍
角蛋白不溶于水及大部分有机溶剂,使得角蛋白酶活性测定比一般蛋白酶困难。常用测定角蛋白酶的原理是以底物水解后释放的氨基酸的量来确定角蛋白酶的活性。目前测定角蛋白酶的方法主要有三种,一种是直接用角蛋白粉作为底物进行测定,涂国全等(1998)曾以羽毛粉作为测定角蛋白酶的底物[59]。第二种是使用经过修
关于糜蛋白酶的效价测定介绍
1、底物溶液的制备 取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯23.7mg,置100ml量瓶中,加磷酸盐缓冲液(取0.067mol/L磷酸二氢钾溶液38. 9ml与0.067mol/L磷酸氢二钠溶液61.1ml,混合,pH值为7.0)50ml,温热使溶解,冷却后再稀释至刻度,摇匀。冰冻保存,但不得反复冻融。
利福平的测定法
临用新制或存放于2~8℃条件下6小时内使用。取本品适量,精密称定,加乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液;精密量取适量,用乙腈-水(1:1)定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液,作为供试品溶液,精密量取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另取利福平对照品适量,精密称定,同法测定。按
测定尿胰蛋白酶有哪些意义?
(1)胰蛋白酶原的分子量比较小(25kd),很容易由肾小球滤出,但是肾小管对胰蛋白酶原-2的回吸收低于胰蛋白酶原-1,尿中前者的浓度较大。(2)在急性胰腺炎时尿中胰蛋白酶原-2的浓度明显升高。有报道急性胰腺炎时尿胰蛋白酶原-2的特异性为95%,敏感性为94%,说明其优于淀粉酶,是一个比较敏感而特异的
熔点测定法的测定原理
熔点是指一种物质按照规定的方法测定,由固相熔化成液相(有时会伴随分解)时的温度范围,是物质的一种物理常数。依法测定熔点可以鉴别药物,也可以检查药物的纯杂程度。根据被测物质的不同性质,《中国药典》二部附录“熔点测定法”项下列有3种不同的测定方法:第一法,用于测定易粉碎的固体药物;第二法,用于测定不易粉