蛋白酶的测定实验——偶氮酪蛋白测定法

实验方法原理酪蛋白的敏感性鉴定可以通过这个实验得到很大程度的改善。含氮的基团与酪蛋白的共价键被蛋白水解时切断,用 TCA 上清液测定它们的颜色变化。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒磷酸钾偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)三氯乙酸仪器、耗材分光光度计实验步骤0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液0.2 ml 蛋白酶溶液25℃ 时培养 30 min 后,加 0.2 ml 10% 三氯乙酸停止反应,离心 5 min。于 340 nm 处测上清液的吸收值,1U 是指 1 h 内,能使吸收值变化 1 的酶量。注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 8.00.2% 偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)溶于 0.1 mol/L 磷酸钾溶液,pH 8.010% 三氯乙酸(TCA,质量浓度)展......阅读全文

钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验

试剂、试剂盒 消化缓冲液经 TPCK 处理的胰蛋白酶HCl纯的钙调蛋白实验步骤 材料经 TPCK 处理的胰蛋白酶(其干粉可从 WorthingtonBiochemicalCorp. 买到)HCl(1 mmol/L)纯的钙调蛋白(干粉;无盐(0.1~1 mg)试剂消化缓冲液(配方,见"试剂的配制

钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验

试剂、试剂盒消化缓冲液经 TPCK 处理的胰蛋白酶HCl纯的钙调蛋白实验步骤材料经 TPCK 处理的胰蛋白酶(其干粉可从 WorthingtonBiochemicalCorp. 买到)HCl(1 mmol/L)纯的钙调蛋白(干粉;无盐(0.1~1 mg)试剂消化缓冲液(配方,见"试剂的配制'

钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验

钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验             试剂、试剂盒 消化缓冲液 经 TPCK 处理的胰蛋白酶

发光免疫测定法的实验目的

中文名称发光免疫测定英文名称luminescent immunoassay;LIA定  义以发光物质标记抗原或抗体,免疫反应后引发发光反应,根据发光强度对抗体或抗原进行的测定。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

Fe(II)EDTA保护测定法实验

实验方法原理 Fe(II)-EDTA 能够催化 RNA 或 DNA 的断裂,是 RNase 保护分析的一个补充方法,其优点是很少或没有碱基序列的特异性,其沿着整个长度的 RNA 或 DNA 链的剪切几乎是一致的,它可被用于解释一些 RNA 的较高级的折叠方式。试剂、试剂盒 RNA洗脱缓冲液退火缓冲液

Fe(II)EDTA保护测定法实验

Fe(II)-EDTA 能够催化 RNA 或 DNA 的断裂,是 RNase 保护分析的一个补充方法,其优点是很少或没有碱基序列的特异性,其沿着整个长度的 RNA 或 DNA 链的剪切几乎是一致的,它可被用于解释一些 RNA 的较高级的折叠方式。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方

Fe(II)EDTA保护测定法实验

方案5.9 Fe(II)-EDTA保护测定法             实验方法原理 Fe(II)-EDTA 能够催化 RNA 或 DNA 的断裂,是 RNase 保护分析的一个补

融合蛋白酶解实验

基本方案 用 Xa 因子             实验方法原理 实验材料 1 mg/ml 融合蛋白

融合蛋白酶解实验

实验方法原理 实验材料 1 mg/ml 融合蛋白试剂、试剂盒 200 μg Xa 因子/ml 反应缓冲液2 × SDS 样品缓冲液仪器、耗材 沸水浴实验步骤 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间。反应 1:20 μl 含有 1 μl 200μg /ml Xa 因子的 1 mg/ml 融合蛋白反应

关于酪蛋白的制备方法介绍

  (1)新鲜牛奶脱脂,加酸(乳酸、乙酸、盐酸或硫酸),将pH调至4.8,使干酪素微胶粒失去电荷而凝固沉淀。用这种方法得到的干酪素称为酸酪蛋白,加酸的种类不同得到的酸酪蛋白却几乎毫无区别。酸酪蛋白是白色至淡黄色粉末或颗粒,稍有奶臭和酸味。在水中只是溶胀,若加入氨、碱及其盐时,则可分散溶解于水中。可溶

酸水解酪蛋白的理化指标

  项目单位值最低限度最高  pH值(25·C)5.04.86.5  灰份%3.02.05.0  氯化钠%3.02.05.0  铁ppm00100  氮(凯氏定氮法)%80.70.085.0  水份%6.0

关于酪蛋白的基本用途介绍

  酸酪蛋白主要用作涂料的基料,木、纸和布的粘合剂,食品用添加剂等。作为涂料的基料约占总消费的一半,具有优良的耐水性,在颜料中能很好地分散,提高涂料的均匀性。此外,因流动性好,易于涂装施工,粗制凝乳酶蛋白主要用于制造塑料钮扣。酪蛋白钮扣与其他树脂钮扣相比,染色性、加工性、色泽鲜艳性均好,质量在钮扣中

关于酪蛋白的物化性质

  干酪素是等电点为pH4.8的两性蛋白质。在牛奶中以磷酸二钙、磷酸三钙或两者的复合物形式存在,构造极为复杂,直到现在没有完全确定的分子式,分子量大约为57000-375000。干酪素在牛奶中约含3%,约占牛奶蛋白质的80%。纯干酪素为白色、无味、无臭的粒状固体。相对密度约1.26。不溶于水和有机溶

关于酪蛋白胶粒的内容介绍

  牛乳中蛋白质含量为3.0%-3.7%,其中约80%为酪蛋白(casein),20%为乳清蛋白。酪蛋白胶束是几种含磷蛋白质交联形成的复合体,酪蛋白含有4种蛋白组分:αs1-酪蛋白(αs1-casein)、αs2-酪蛋白(αs2-casein)、β-酪蛋白(β-casein)、κ-酪蛋白(κ-cas

酪蛋白的功能和应用特点

酪蛋白是一种含磷钙的结合蛋白,对酸敏感,pH较低时会沉淀。酪蛋白是哺乳动物包括母牛,羊和人奶中的主要蛋白质,又称:干酪素、酪朊、乳酪素。α-酪蛋白是哺乳动物的主要蛋白,人乳中没有α-酪蛋白,以β-酪蛋白为主要酪蛋白形式。酪蛋白对幼儿既是氨基酸的来源,也是钙和磷的来源,酪蛋白在胃中形成凝乳以便消化。

简述酪蛋白的物化性质

  酪蛋白是等电点为pH4.6 [2]的两性蛋白质。在牛奶中以磷酸二钙、磷酸三钙或两者的复合物形式存在,构造极为复杂,直到现在没有完全确定的分子式,分子量大约为57000-375000。干酪素在牛奶中约含3%,约占牛奶蛋白质的80%。纯干酪素为白色、无味、无臭的粒状固体。相对密度约1.26。不溶于水

关于β酪蛋白的性质结构介绍

  β-CN 由 226 个氨基酸残基组成,分子量为 25 382 Da。β-酪蛋白含有大量的谷氨酰胺,此氨基酸序列是非常保守的,在N-末端附近形成了主要的磷酸化作用位点,β-酪蛋白磷酸化位点的数量和磷酸化水平比α-酪蛋白少。在牛的β-酪蛋白中,一个完全磷酸化形式包含5个磷酸基团,而在其他物种里,β

酪蛋白的主要用途

酸酪蛋白主要用作涂料的基料,木、纸和布的粘合剂,食品用添加剂等。作为涂料的基料约占总消费的一半,具有优良的耐水性,在颜料中能很好地分散,提高涂料的均匀性。此外,因流动性好,易于涂装施工,粗制凝乳酶蛋白主要用于制造塑料钮扣。酪蛋白钮扣与其他树脂钮扣相比,染色性、加工性、色泽鲜艳性均好,质量在钮扣中居中

关于酪蛋白的制备方法介绍

  (1)新鲜牛奶脱脂,加酸(乳酸、乙酸、盐酸或硫酸),将pH调至4.8,使干酪素微胶粒失去电荷而凝固沉淀。用这种方法得到的干酪素称为酸酪蛋白,加酸的种类不同得到的酸酪蛋白却几乎毫无区别。酸酪蛋白是白色至淡黄色粉末或颗粒,稍有奶臭和酸味。在水中只是溶胀,若加入氨、碱及其盐时,则可分散溶解于水中。可溶

关于β酪蛋白的分离技术介绍

  蛋白质的分离纯化可根据蛋白质分子的大小、电荷量、溶解度以及亲和性结合部位的有无,建立许多分离纯化的方法。常用的有离心分离、沉淀分离、透析法、超滤法、层析分离、膜分离以及酶法分离等。这些分离纯化蛋白质的方法各有利弊。  1、离心分离  离心分离是利用不同物质之间的沉降系数或浮力密度等差异,用离心力

用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——酪蛋白激酶

试剂、试剂盒酪蛋白激酶分析缓冲液β-酪蛋白β-酪蛋白储存液实验步骤1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物:5X 酪蛋白激酶分析缓冲液                            4 μl  β-酪蛋白                               

麻醉大鼠动脉血压的测定实验(直接测定法)

实验材料大鼠试剂、试剂盒氨基甲酸乙酯戊巴比妥钠普鲁卡因注射液肝素仪器、耗材大鼠实验台聚乙烯医用塑料导管压力换能器多通道生理信号采集记录仪器实验步骤(1)颈总动脉测量动脉血压:取体重为200~250g左右的大白鼠,用20%氨基甲酸乙酯注射液0.5ml/100g或者1.5%戊巴比妥钠注射液0.2ml/1

麻醉大鼠动脉血压的测定实验(直接测定法)

实验材料 大鼠试剂、试剂盒 氨基甲酸乙酯戊巴比妥钠普鲁卡因注射液肝素仪器、耗材 大鼠实验台聚乙烯医用塑料导管压力换能器多通道生理信号采集记录仪器实验步骤 (1)颈总动脉测量动脉血压:取体重为200~250g左右的大白鼠,用20%氨基甲酸乙酯注射液0.5ml/100g或者1.5%戊巴比妥钠注射液0.2

胃蛋白酶测定的检查过程

  取试管6支,其中3支各精密加入对照品溶液1ml,另3支各精密加入供试品溶液1ml,置37℃±0.5℃水浴中,保温5分钟,精密加入预热至37℃±0.5℃的血红蛋白试液5ml,摇匀,并准确计时,在37℃±0.5℃水浴中反应10分钟。立即精密加入5%三氯醋酸溶液5ml,摇匀,滤过,取续滤液备用。另取试

含糖胃蛋白酶的效价测定

照紫外可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取本品,精密称定,加盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.2~0.4单位的溶液盐酸溶液、对照品溶液与测定法见胃蛋白酶效价测定项下。

胃蛋白酶测定的注意事项

  检查前禁忌:食用大量食物,影响检查过程。  检查时要求: 血液中胃蛋白酶同工酶原水平能更准确地反映胃黏膜的情况。患者服从医生指示,做好相关检查。

胃蛋白酶颗粒的效价测定

照紫外可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取装量差异项下的内容物,混匀,精密称取适量(约相当于胃蛋白酶240单位),加盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.2~0.4单位的溶液。盐酸溶液、对照品溶液与测定法见胃蛋白酶效价测定项下。

关于菠萝蛋白酶的含量测定介绍

  菠萝蛋白酶的含量测定:精密量取供试品溶液1.0ml,置具塞试管(15mm×130mm)中,于(37±0.5)℃水浴预热5分钟,精密加入(37±0.5)℃预热的底物溶液(取硅胶干燥器中干燥至恒重的酪蛋白0.6g,精密称定,置烧杯中,加0.05mol/L磷酸氢二钠溶液80ml,水浴中加热溶解,放冷,

木瓜蛋白酶的酶活测定

基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。酶活单位在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。试液制备1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.42g,加10mmol/LE

木瓜蛋白酶的酶活测定

  一、基本原理  木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。  酶活单位  在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。  二、试液制备  1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐