方案27.2用PHA刺激淋巴细胞

实验材料添加10%FBS的培养液或自体血清植物血凝素秋水仙酰胺试剂、试剂盒KCl仪器、耗材试管或普通容器显微镜下使用的载玻片实验步骤1. 取在方案 27.1 中步骤 7 清洗的细胞,用 HEPES 或 CO2 缓冲的 DMEM、CMRL 1066 或添加 10 % 自体血清或 FBS 的 RPMI 1640 培养,细胞密度为 2×106 个/ml,培养深度为 1.5~2.0 cm。2. 按 5 μg/ml 终浓度加入 PHA,刺激有丝分裂 24~72 h。3. 分别在 24、36、48、60 和 72 h 收集细胞,制备涂片或离心制备细胞玻片,以确定最佳培养时间(即最大分裂指数)。4. 按 0.001 μg/ml 终浓度加人秋水仙酰胺(用 BSS 配制),处理 2 h。有丝分裂高峰的出现比在步骤 3 所观察到的提前 [ Berger, 1979 ]。5. 在秋水仙酰胺处理后,将细胞离心。然后,用 0.075 ......阅读全文

淋巴细胞转化实验

淋巴细胞转化实验在临床上应用可用于(1)反映出受试者T细胞总体水平的应答功能,判断细胞免疫状态和探讨发病机制(2)选择适宜的移植供体(3)寻找迟发型变态反应的原因(4)估计疾病的疗效和预后。实验方法原理正常机体的T淋巴细胞在体外培养过程中受到特异性抗原或有丝分裂原刺激。可转化为淋巴母细胞。细胞免疫缺

T淋巴细胞转化试验的注意事项

  检测方法可分为3H-TdR掺入法、形态学法和MTT法等。  1、3H-TdR掺入法 T淋巴细胞受PHA或特异性抗原刺激后,发生有丝分裂,细胞进入S期,且伴随新的DNA合成,若此时加入氚标记的胸腺嘧啶核苷3H-TdR,则3H-TdR可被淋巴细胞作为合成DNA的原料摄入,根据3H-TdR的摄入量,可

外周血培养基配制方法

一、配制用水培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。 二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(

海洋性光合菌可产高分子量生物塑料-合成量翻倍

  日本理化学研究所环境资源科学研究中心的沼田圭司领导的研究小组日前发现,海洋性光合成细菌(简称光合菌)可生产高分子量羟基酸(PHA)。  PHA是微生物体内产生的一种生物塑料,是生物为预防营养缺乏而储藏碳和能量的贮藏物质。由于PHA具有生物降解性和生物适应性等特征,可以成为以石油为原料的塑料的替代

正常细胞常规核型的标本制备实验

微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析             实验方法原理 采用微量全血培养人体外

正常细胞常规核型的标本制备实验

微量全血培养人淋巴细胞染色体标本制备肿瘤细胞的染色体标本制备人体染色体常规核型的分析实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋

正常细胞常规核型的标本制备实验

微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析             实验方法原理 采用微量全血培养人体外

结核菌素试验的基本内容

  结核菌素试验(PPDtest)是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起超敏反应的一种试验。 [1]  常规试验分别取2种PPD 5个单位注射两前臂皮内,48~72h后红肿硬结超过5mm者为阳性,≥15mm为强阳性,对临床诊断有意义。若PPD-C侧红肿大于BCG-PPD侧为感染

结核菌素试验的相关内容

  结核菌素试验(PPDtest)是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起超敏反应的一种试验。  常规试验分别取2种PPD 5个单位注射两前臂皮内,48~72h后红肿硬结超过5mm者为阳性,≥15mm为强阳性,对临床诊断有意义。若PPD-C侧红肿大于BCG-PPD侧为感染。反之,

淋巴细胞转化实验

实验材料 肝素试剂、试剂盒 199培养液小牛血清链霉素青霉素PHA仪器、耗材 注射器针头试管吸管离心机实验步骤1.  采肝素抗凝血1~2毫升(1毫升血中加肝素20单位)充分混匀。37℃静置1~2小时。红细胞沉淀后,吸取血浆层并捎带些红细胞。移入另一无菌试管中。计算白细胞数然后2000 rpm 离心1

当波长色散型X射线荧光光谱仪探测器出现故障

  ZSX Primus Ⅱ波长色散型X射线荧光光谱仪在使用过程上假如出现了PC探测器的PHA调节不能正常进行怎么处理,广州仪德精密科学仪器股份有限公司工程师教你一招,自己也可以进行故障排除。   ZSX Primus Ⅱ波长色散型X射线荧光光谱仪探测器故障问题   故障现象:   进行P

当波长色散型X射线荧光光谱仪探测器出现故障

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当波长色散型X射线荧光光谱仪探测器出现故障

  ZSX Primus Ⅱ波长色散型X射线荧光光谱仪在使用过程上假如出现了PC探测器的PHA调节不能正常进行怎么处理,广州仪德精密科学仪器股份有限公司工程师教你一招,自己也可以进行故障排除。   ZSX Primus Ⅱ波长色散型X射线荧光光谱仪探测器故障问题   故障现象:   进行P

淋巴细胞转化试验

实验方法原理 T、B细胞在抗原或有丝分裂原的刺激下可转化为淋巴母细胞,借此可了解淋巴细胞对异物刺激的反应性。仪器、耗材 试管吸管细胞培养物PHA瑞氏染液载玻片实验步骤 1. 取肝素抗凝血1~2毫升,用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞;2. 调整细胞浓度为2×106/毫升;3. 加PHA,使终浓度为1%;4

淋巴细胞转化试验

实验方法原理T、B细胞在抗原或有丝分裂原的刺激下可转化为淋巴母细胞,借此可了解淋巴细胞对异物刺激的反应性。仪器、耗材试管吸管细胞培养物PHA瑞氏染液载玻片实验步骤1. 取肝素抗凝血1~2毫升,用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞;2. 调整细胞浓度为2×106/毫升;3. 加PHA,使终浓度为1%;4. 5

小鼠胸腺细胞增殖3HTdR掺入法检测IL1的生物活性

实验概要IL-1可协同有丝分裂原(如ConA或PHA)刺激的T细胞或胸腺细胞发生增殖反应,通过3H-TdR DNA掺入法,即可测定IL-1生物活性。此法是目前测定IL-1活性常用而简便的方法,其敏感度达10-50pg/ml。但本法缺乏特异性,因为IL-1亦可刺激T细胞或胸腺细胞产生一些细胞因

3H胸腺嘧啶核苷掺入检查法

实验概要3H胸腺嘧啶核苷(3Hthymidine,3HTdR)掺入试验,是体外淋巴细胞转化试验较客观、重复性好、结果准确的方法之一。实验原理当淋巴细胞受分裂原(PHA等)或特异性抗原刺激发生转化时,必然伴有DNA的大量合成,若将具有放射性的3HTdR加到培养液内,则可被作为合成DNA的原料而摄入转化

3H胸腺嘧啶核苷掺入检查法

实验概要3H胸腺嘧啶核苷(3Hthymidine,3HTdR)掺入试验,是体外淋巴细胞转化试验较客观、重复性好、结果准确的方法之一。实验原理当淋巴细胞受分裂原(PHA等)或特异性抗原刺激发生转化时,必然伴有DNA的大量合成,若将具有放射性的3HTdR加到培养液内,则可被作为合成DNA的原料而摄入转化

细胞增殖检测:3HTdR渗入法原理和操作步骤

一、原理 T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD2、抗CD3McAb作为多克隆刺激剂可选择性地刺激T细胞增殖;而抗IgM、含葡萄球菌A蛋白的菌体(SAC)、脂多糖(LPS,对小鼠有

小鼠胸腺细胞增殖3HTdR掺入法检测IL1的生物活性

实验试剂1. 75%酒精2. 5% FCS-RPMI-1640完全培养液与RPMI-1640完全培养液3. ConA或PHA4. IL-1标准品:倍比稀释成至少6个不同浓度值。实验设备1. 3H-TdR、β-液闪汁数仪,微量细胞收集仪2. 解剖刀、剪、单皿、研磨工具(玻璃匀浆器,不诱钢网或者毛玻璃片

小鼠胸腺细胞增殖3HTdR掺入法检测IL1的生物活性实验

实验试剂1. 75%酒精2. 5% FCS-RPMI-1640完全培养液与RPMI-1640完全培养液3. ConA或PHA4. IL-1标准品:倍比稀释成至少6个不同浓度值。实验设备1. 3H-TdR、β-液闪汁数仪,微量细胞收集仪2. 解剖刀、剪、单皿、研磨工具(玻璃匀浆器,不诱钢网或者毛玻璃片

大象也会剥香蕉

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/4/498513.shtm大象喜欢吃香蕉,但它们通常不像人类那样先剥香蕉皮。现在,德国科学家发现,柏林动物园生活的一只名叫Pang Pha的亚洲象自己学会了剥香蕉皮。它会先把香蕉掰碎,抖出果肉,留下厚厚的果皮。

正常细胞常规核型的标本制备实验_微量全血培养

正常细胞常规核型的标本制备可应用于:(1)进行核型分析;(2)与肿瘤核型进行对比研究。实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的

人外周血淋巴细胞培养

在正常情况下,人外周血中是没有分裂相的,只有在异常情况下才能发现。植物血球凝集素(PHA)是人类淋巴细胞有丝分裂的刺激剂,在PHA作用下,原处于Go期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞,进而进行有丝分裂。利用PHA这一特性,淋巴细胞经过含有HPA培养液培养,在体外便可获得丰富的含有丝分裂的生长活跃的细胞群体

人外周血淋巴细胞培养实验材料和操作过程

在正常情况下,人外周血中是没有分裂相的,只有在异常情况下才能发现。植物血球凝集素(PHA)是人类淋巴细胞有丝分裂的刺激剂,在PHA作用下,原处于Go期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞,进而进行有丝分裂。利用PHA这一特性,淋巴细胞经过含有HPA培养液培养,在体外便可获得丰富的含有丝分裂的生长活跃的细胞群体

可溶性白细胞介素2受体检测实验

实验方法原理 将抗Tac特异性单克隆抗体Ab1吸附于固相载体,识别细胞培养上清或血清等标本中Tac并与之结合。应用辣根过氧化物酶标记的识别另一种Tac表位的特异性单克隆抗体Ab2识别固定于固相载体的Tac并与之结合。通过酶催化底物显色反映待检标本中游离Tac的水平。实验材料 抗体PHA试剂、试剂盒

T淋巴细胞转化试验的临床意义及注意事项

  临床意义  1、T淋巴细胞在体外培养过程中受有丝分裂原刺激,可转化成为体积较大的母细胞。计数转化的细胞可反映机体的细胞免功能。  2、细胞免疫功能缺陷或低下者,其转化率可明显低于正常,如运动失调性毛细血管扩张症。此外,恶性肿瘤、霍奇金病、淋巴瘤、淋巴肉芽肿、重症真菌感染、重症结核转化率可低于正常

非接触亚微米分辨红外拉曼同步测量在解决微塑料监测...

非接触亚微米分辨红外拉曼同步测量在解决微塑料监测难题的应用近年来,塑料污染在水环境(海洋和淡水)中的问题日益严重,得到广泛报道和关注。据《Science》杂志研究报告,2010 年全球192 个沿海国家和地区共制造2.75 亿吨塑料垃圾,其中约有800 万吨排入海洋,并且塑料垃圾数量不断增多,到

T淋巴细胞转化试验的详细介绍

  样本要求  肝素抗凝血5ml,室温  参考值  形态学检测法:60.1%±7.6%。 3H-TdR渗入法:0~2%。 刺激指数(SI)>2为有意义。  临床意义  1、T淋巴细胞在体外培养过程中受有丝分裂原刺激,可转化成为体积较大的母细胞。计数转化的细胞可反映机体的细胞免功能。  2、细胞免疫功

关于艾滋病毒细胞的培养方法介绍

  常用方法为共培养法,即用正常人外周血液分离单个核细胞,加PHA刺激并培养后,加入病人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中。  将病人自身外周或骨髓中淋巴细胞经PHA刺激48~72小时作体外培养(培养液中加IL2)1~2周后,病毒增殖可释放至细胞外,并使细胞融合成多核巨细胞,最后细胞破溃死亡。亦可用传代