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小鼠胸腺细胞增殖3HTdR掺入法检测IL1的生物活性

实验试剂1. 75%酒精2. 5% FCS-RPMI-1640完全培养液与RPMI-1640完全培养液3. ConA或PHA4. IL-1标准品：倍比稀释成至少6个不同浓度值。实验设备1. 3H-TdR、β-液闪汁数仪，微量细胞收集仪2. 解剖刀、剪、单皿、研磨工具(玻璃匀浆器，不诱钢网或者毛玻璃片，用于研磨小鼠胸腺)3. 96孔细胞培养板4. 刻度吸管，毛细吸管，刻度离心管、离心机、细胞计数板，倒置显微镜，加样器(头)，50%CO2培养箱，超净工作台实验材料1. 小鼠：BALB/C或C57BL/6小鼠，6-10周龄，雌雄均可。2. IL-1待测样品：倍比稀释成至少6个不同浓度值。实验步骤1. 准备工作与ConA或PHA亚适剂量的确定测定样品前必须作ConA或PHA的剂量曲线，观察其对小鼠胸腺细胞增殖的影响，选择一个既能够激活胸腺细胞，但又不引起其明显增殖的合适剂量，即亚适剂量。 1) 在96孔......阅读全文